Linia komórkowa BxPC-3
BxPC-3 to ludzka linia komórkowa raka trzustki. Znajduje szerokie zastosowanie w badaniach nad rakiem. Naukowcy wykorzystują te komórki głównie do badania biologii raka trzustki, identyfikacji celów terapeutycznych oraz opracowywania leków przeciwnowotworowych.
- Pożywka
- Do hodowli linii komórkowej BxPC-3 stosuje się pożywkę RPMI 1640. W celu uzyskania idealnych warunków wzrostu komórek uzupełnia się ją 10% surowicą płodową bydlęcą, 2,1 mM stabilną glutaminą oraz 2,0 g/l NaHCO3. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
- Czas podwojenia
- Czas podwojenia komórek BxPC-3 wynosi od 48 do 60 godzin.
- Typ wzrostu
- BxPC-3 jest linią komórek przylegających.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- BSL-3
- Dostępne w
- Cytion — Zamów BxPC-3
Ten artykuł zawiera kluczowe informacje na temat linii komórkowej BxPC-3, które mogą znacznie pomóc w pracy z nią. Omówione zostaną głównie:
- Ogólne informacje i pochodzenie linii komórkowej BxPC-3
- Hodowla komórek BxPC-3
- Linia komórkowa BxPC-3: zalety i ograniczenia
- Zastosowania komórek BxPC-3 w badaniach naukowych
- Publikacje naukowe dotyczące komórek BxPC-3
- Materiały dotyczące linii komórkowej BxPC-3: protokoły, filmy i inne
- Ogólne informacje i pochodzenie linii komórkowej BxPC-3
- Hodowla komórek BxPC-3
- Linia komórkowa BxPC-3: zalety i ograniczenia
- Zastosowania komórek BxPC-3 w badaniach
- 5. Publikacje naukowe dotyczące komórek BxPC-3
- Materiały dotyczące linii komórkowej BxPC-3: protokoły, filmy i inne
- Często zadawane pytania
Ogólne informacje i pochodzenie linii komórkowej BxPC-3
Znajomość pochodzenia linii komórkowej ma kluczowe znaczenie dla jej zastosowania w badaniach. Znajomość jej cech, w tym morfologii, wielkości komórek i ploidii, sprawia, że jej wykorzystanie jest prostsze i wygodniejsze. W niniejszym artykule dowiesz się o pochodzeniu i ogólnych cechach komórek BxPC-3: Czym są komórki BxPC-3? Czym jest linia komórkowa BxPC-3? Jakie jest pochodzenie linii komórkowej BxPC-3? Jaka jest morfologia komórek BxPC-3?
- Komórki BxPC-3, ludzkie komórki raka trzustki, zostały pozyskane w 1986 roku od 61-letniej Europejki z gruczolakorakiem trzustki. Potwierdzono, że komórki te zachowały zdolność do tworzenia nowotworów nawet po tym, jak pacjentka przeszła kilka sesji radioterapii i chemioterapii. W związku z tym ustanowiona linia komórkowa stanowi nieoceniony model do badania rozwoju i progresji nowotworu.
- Komórki BxPC-3 mają morfologię podobną do komórek nabłonkowych.
- Modalna liczba chromosomów dla BxPC-3 wynosi 59. Komórki te mają homozygotyczną delecję w chromosomie 18q, który koduje białko SMAD4/DPC4. Ponadto w linii komórkowej brakuje mutacji BxPC-3 kras, powszechnej wśród nowotworów trzustki. W tych komórkach raka trzustki stwierdzono również delecję BxPC-3 braf.
Jaka jest różnica między BxPC3 a PANC-1?
Komórki BxPC-3 PADC (gruczolakorak przewodowy trzustki) i PANC-1 są pierwotnymi liniami komórkowymi raka trzustki o morfologii nabłonkowej. Komórki pierwsze z nich posiadają więcej cech nabłonkowych, podczas gdy komórki drugie wykazują więcej cech mezenchymalnych [1].
Hodowla komórek BxPC-3
Linia komórkowa BxPC-3 jest szeroko stosowana w laboratoriach zajmujących się badaniami nad rakiem. Aby skutecznie hodować tę linię komórkową raka trzustki, należy znać następujące kluczowe informacje. Dowiesz się: Jaki jest czas podwojenia dla linii BxPC-3? Jak hodować linię komórkową BxPC-3?
Kluczowe informacje dotyczące hodowli komórek BxPC-3
Czas podwojenia populacji:
Czas podwojenia populacji komórek BxPC-3 wynosi od 48 do 60 godzin.
Komórki przylegające czy w zawiesinie:
BxPC-3 to linia komórek przylegających.
Współczynnik podziału:
Komórki BxPC-3 są subkultywowane w stosunku 1:2 do 1:4. Komórki są płukane 1 x PBS i inkubowane z roztworem do pasażowania o nazwie accutase. Po 8–10 minutach do komórek dodaje się świeżą pożywkę, a komórki są odwirowywane. Osad ponownie zawiesza się w pożywce, a komórki przelewa się do nowego naczynia hodowlanego w celu dalszego wzrostu.
Pożywka wzrostowa:
Do hodowli linii komórkowej BxPC-3 stosuje się pożywkę RPMI 1640. Jest ona uzupełniona 10% surowicą płodową bydlęcą, 2,1 mM stabilną glutaminą i 2,0 g/l NaHCO3 w celu uzyskania idealnego wzrostu komórek. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:
Hodowle komórek BxPC-3 są utrzymywane w nawilżanym inkubatorze o temperaturze 37 °C, podłączonym do źródła 5% CO2.
Przechowywanie:
Zamrożone komórki są zazwyczaj przechowywane w temperaturze poniżej -150 °C lub w fazie gazowej ciekłego azotu w celu zachowania żywotności komórek.
Proces zamrażania i pożywka:
Do zamrażania kultur komórek BxPC-3 można używać CM-1 lub CM-ACF. Stosuje się proces powolnego zamrażania, który pozwala na spadek temperatury tylko o 1 °C, aby zapobiec szokowi termicznemu komórek.
Proces rozmrażania:
Zamrożone komórki BxPC-3 rozmraża się w łaźni wodnej o temperaturze 37 °C przez 40 do 60 sekund. Po pozostawieniu niewielkiej grudki lodu do komórek dodaje się świeże pożywki hodowlane i odwirowuje w celu usunięcia elementów pożywki zamrażającej. Następnie osad komórkowy jest ponownie zawieszany, a komórki są umieszczane w kolbie w celu wzrostu.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:
Hodowle komórek BxPC-3 są utrzymywane w laboratoriach o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.
Linia komórkowa BxPC-3: zalety i ograniczenia
BxPC-3 to dobrze znana linia komórkowa gruczolakoraka trzustki, która ma kilka zalet i ograniczeń. Poniżej wymieniono najważniejsze zalety i wady tej linii komórkowej.
Zalety
Główne zalety komórek BxPC-3 to:
-
Model in vitro raka trzustki
Komórki BxPC-3, pochodzące od pacjentów z gruczolakorakiem trzustki, wykazują istotne cechy, dzięki czemu stanowią odpowiedni model do badania zachowania raka trzustki in vitro.
-
Linia komórkowa o właściwościach nowotworowych
Komórki BxPC-3 posiadają właściwości nowotworowe i mogą tworzyć guzy po wstrzyknięciu myszom nagim lub z obniżoną odpornością. Guzy te bardzo przypominają pierwotne guzy gruczolakoraka trzustki, co sprawia, że model przeszczepu heterogenicznego BxPC-3 jest idealny do badania wzrostu i progresji nowotworu.
Ograniczenia
Ograniczenia związane z linią komórkową BxPC-3 to:
-
Zanieczyszczenie krzyżowe
Linia komórkowa BxPC-3, podobnie jak każda inna, niesie ze sobą ryzyko zanieczyszczenia krzyżowego. Naukowcy powinni zachować ostrożność i przestrzegać rygorystycznych protokołów zapobiegania zanieczyszczeniom podczas pracy z tymi komórkami.
-
Powolne tempo wzrostu
Komórki BxPC-3 charakteryzują się stosunkowo wolnym tempem proliferacji, a czas podwojenia wynosi od 48 do 60 godzin. Ta cecha może wymagać dłuższych okresów inkubacji w przypadku niektórych eksperymentów, co może potencjalnie spowodować opóźnienia w postępach badań.
Zastosowania komórek BxPC-3 w badaniach
Komórki BxPC-3 mają wiele zastosowań w badaniach nad rakiem. Najczęstsze z nich to:
- Badania nad rakiem trzustki: Komórki BxPC-3 naśladują gruczolakoraka trzustki i dlatego są wykorzystywane do badania genetycznych i molekularnych mechanizmów leżących u podstaw rozwoju i wzrostu nowotworu. Ponadto naukowcy odkrywają nowe biomarkery i cele terapeutyczne przy użyciu tych komórek. Co więcej, komórki BxPC-3 wykazują znaczną ekspresję czynników angiogennych, tj. interleukiny-8 (IL-8), prostaglandyny E2 (PGE2) i czynnika wzrostu śródbłonka naczyniowego (VEGF), co sprawia, że nadają się one do badania angiogenezy. W tym przypadku angiogeneza jest kluczowym procesem związanym ze wzrostem nowotworu i przerzutami. W badaniu opublikowanym w 2022 r. wykazano, że nadekspresja lamininy-5 gamma-2 (LAMC2) w BxPC3 PDAC (gruczolakorak przewodowy trzustki) wzmacnia proces powstawania nowotworu poprzez regulację szlaku sygnałowego BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR [2].
- Odkrywanie i rozwój leków: linia komórkowa BxPC-3 służy jako nieoceniony model do testowania leków przeciwnowotworowych. Naukowcy badają cytotoksyczne, przeciwprzerzutowe i apoptyczne działanie potencjalnych leków na BxPC3 PDAC. W badaniu przeprowadzonym przez Alexandrię Turner i współpracowników w 2020 r. zbadano właściwości apoptyczne ekstraktów z owoców Elaeocarpus reticulatus w komórkach raka trzustki BxPC-3 [3]. Podobnie, w 2020 r. przeprowadzono badania, które określiły potencjał przeciwnowotworowy ekstraktu metanolowego z rośliny o nazwie Oxialis obtriangulata w komórkach BxPC-3. Ponadto naukowcy zbadali również mechanizm komórkowy, poprzez który ekstrakt roślinny wywierał działanie terapeutyczne [4].
5. Publikacje naukowe dotyczące komórek BxPC-3
W tej sekcji wymieniono niektóre z najczęściej cytowanych i najciekawszych publikacji dotyczących linii komórkowej BxPC-3.
Likokumaron indukuje śmierć komórek gruczolakoraka trzustki BxPC-3 poprzez hamowanie DYRK1A
W tej publikacji w czasopiśmie „Chemico-Biological Interactions” (2020) zbadano wpływ licokumaronu, produktu pochodzenia naturalnego, na apoptozę komórek raka trzustki BxPC-3.
Ten artykuł naukowy został opublikowany w czasopiśmie „Anticancer Research” (2022). W badaniu wysunięto hipotezę, że hydroksychlorochina powoduje śmierć komórek BxPC3 poprzez hamowanie genu BCL-XL.
Badania te zostały opublikowane w 2020 r. w czasopiśmie „Journal of Cellular Biochemistry”. W badaniu stwierdzono, że naturalny związek, salidrosid, wykazuje działanie przeciwnowotworowe w komórkach BxPC-3 poprzez regulację kaskady sygnałowej HIF-1α (czynnika indukowanego niedotlenieniem) i LOXL2.
Artykuł opublikowany w czasopiśmie „Biomedicine & Pharmacotherapy” sugeruje, że ibrutynib może być stosowany jako doskonały środek zwiększający wrażliwość na promieniowanie u pacjentów z rakiem trzustki. Badania in vitro przeprowadzone na komórkach BxPC-3 wskazują, że zmniejsza on fosforylację EGFR w komórkach BxPC3 oraz ekspresję pAKT i genów niższego rzędu, których ekspresja jest regulowana w górę przez radioterapię.
Chelidonina indukuje apoptozę poprzez regulację GADD45a-p53 w ludzkich komórkach raka trzustki
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „Integrative Cancer Therapies” zasugerowano, że naturalny produkt, chelidonina, wywiera działanie apoptyczne w ludzkich komórkach trzustki BxPC-3 poprzez regulację sygnalizacji p53 i GADD45a w komórkach BxPC-3.
Zasoby dotyczące linii komórkowej BxPC-3: protokoły, filmy i inne materiały
Linia komórkowa BxPC-3 ma wiele fascynujących zalet, które sprawiają, że nadaje się do zastosowań badawczych. Wiele zasobów internetowych dotyczących linii komórkowej BxPC-3 wspomina o protokołach jej obsługi, utrzymania i transfekcji.
- Transfekcja BxPC3: Ten film jest przewodnikiem krok po kroku, który pozwala poznać protokół transfekcji komórek BxPC-3.
Ta sekcja artykułu zawiera linki wyjaśniające protokoły hodowli komórek BxPC3.
- Hodowla komórek BxPC3: Ta strona internetowa pomoże Ci poznać protokoły dotyczące subkultury oraz postępowania z kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi hodowlami BxPC-3.
Referencje
- Kim, Y. i in., Porównawcze profilowanie proteomiczne linii komórkowych gruczolakoraka przewodowego trzustki. Mol Cells, 2014. 37(12): str. 888-98.
- Kirtonia, A. i in., Nadekspresja lamininy-5 gamma-2 sprzyja powstawaniu nowotworów gruczolakoraka przewodowego trzustki poprzez kaskadę EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): s. 362.
- Turner, A. i in., Ekstrakty z owoców Elaeocarpus reticulatus zmniejszają żywotność i indukują apoptozę w komórkach raka trzustki in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: s. 2073-2084.
- An, E.-J. i in., Potencjał przeciwnowotworowy Oxialis obtriangulata w komórkach raka trzustki poprzez regulację szlaku ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): s. 2301.