Linia komórkowa KG-1
Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej KG-1
Pochodzenie i ogólna charakterystyka linii komórkowej pomagają badaczowi w podjęciu decyzji o jej wykorzystaniu w pracy. Przed rozpoczęciem badań warto zapoznać się z tymi informacjami. Ta sekcja artykułu poświęcona jest pochodzeniu i charakterystyce makrofagów KG-1. Dowiesz się z niej: Czym są komórki KG-1? Czym jest linia komórkowa KG-1a? Jakie jest pochodzenie linii komórkowej KG-1? Jaka jest morfologia komórek KG-1?
- KG-1 to linia komórkowa o charakterze limfoblastycznym, uzyskana z aspiratu szpiku kostnego mężczyzny rasy kaukaskiej (59 lat) cierpiącego na ostrą białaczkę szpikową. Została ona wyhodowana przez Koefflera i Golde'a w 1978 roku. Komórki te znajdują się głównie w stadium dojrzewania promielocytów lub mieloblastów [1].
- Komórki KG-1 charakteryzują się morfologią podobną do limfoblastów.
- Kariotyp linii komórkowej KG-1 wykazuje pseudodiploidalną liczbę modalną chromosomów.
KG-1 i KG-1a
KG-1a to podlinia komórek macierzystych KG-1. Została wyhodowana po 35 pasażach linii komórkowej KG-1. Jest mniej zróżnicowana w porównaniu z linią komórkową KG-1. Ponadto ta podlinia jest pod względem cytochemicznym, morfologicznym i funkcjonalnym mniej dojrzała w porównaniu z linią macierzystą (KG-1).
Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej KG-1
W tej części artykułu omówimy wszystkie niezbędne informacje dotyczące hodowli komórek KG-1, które mogą ułatwić Państwu pracę. Dowiedzą się Państwo: Jaki jest czas podwojenia liczby komórek linii KG-1? Jakie są warunki hodowli makrofagów KG-1? Jak hodować komórki KG-1?
Kluczowe informacje dotyczące hodowli komórek KG-1
Czas podwojenia:
Czas podwojenia komórek KG-1 wynosi około 45 godzin. Może się on jednak różnić w zależności od warunków hodowli.
Hodowla adhezyjna czy w zawiesinie:
Komórki KG-1 rosną w zawiesinie.
Gęstość komórek:
Optymalna gęstość komórek dla linii komórkowej KG-1 wynosi od 1 do 3 x 10⁵ komórek/ml. W celu przeprowadzenia subkultury zawiesinę komórek przenosi się do sterylnej probówki i odwirowuje. Zebrane komórki dodaje się następnie do świeżej pożywki i ostrożnie zawiesza. Następnie komórki rozlewa się do nowych kolb i hoduje przy optymalnej gęstości komórkowej. Komórki można podzielić, gdy osiągną maksymalną gęstość komórkową wynoszącą 1–2 × 10⁶ komórek/ml.
Pożywka wzrostowa:
IMDM (zmodyfikowana pożywka Dulbecco’a według Iscove’a) zawierająca 10% FBS, 4,5 g/l glukozy, 4 mM L-glutaminy, 1,0 mM pirogronianu sodu oraz 3,0 g/l NaHCO₃. Pożywkę należy wymieniać co trzy dni.
Warunki hodowli:
Linia komórkowa KG1 AML jest hodowana w nawilżanym inkubatorze w temperaturze 37°C przy stężeniu CO₂ wynoszącym 5%.
Przechowywanie:
Zamrożone komórki przechowuje się w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150 °C w elektrycznej zamrażarce ultra-niskotemperaturowej w celu zachowania żywotności komórek.
Proces zamrażania i pożywka:
Do zamrażania komórek KG-1 nadaje się pożywka CM-1 lub CM-ACF. Komórki zamraża się metodą powolnego zamrażania, aby chronić je przed szokiem termicznym. Metoda ta pozwala na stopniowy spadek temperatury o 1 °C na minutę.
Proces rozmrażania:
Komórki rozmraża się w podgrzanej wcześniej łaźni wodnej o temperaturze 37 °C, aż pozostanie niewielka grudka lodu. Do rozmrożonych komórek dodaje się świeżą pożywkę i odwirowuje w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej. Osad komórkowy ostrożnie zawiesza się ponownie i przelewa do nowych kolb zawierających pożywkę wzrostową.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:
Do prowadzenia hodowli komórek KG-1 niezbędne jest laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.
Opublikowano: 2023 | Ostatnia aktualizacja: maj 2026
- Linia komórkowa KG-1: zalety i ograniczenia
- Zastosowania komórek KG-1 w badaniach naukowych
- Publikacje dotyczące komórek KG-1
- Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej KG-1
- Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej KG-1
- 6. Materiały dotyczące linii komórkowej KG-1: protokoły, filmy i inne
- Najczęściej zadawane pytania
Linia komórkowa KG-1: zalety i ograniczenia
Podobnie jak inne linie komórkowe, linia komórkowa KG-1, pochodząca z białaczki szpikowej, ma wiele zalet i ograniczeń. W tej sekcji omówimy niektóre z nich, które mogą mieć kluczowe znaczenie przy podejmowaniu decyzji o jej wykorzystaniu w badaniach.
Zalety
Główne zalety komórek KG-1 to:
-
Łatwość hodowli
Komórki KG-1 można z łatwością hodować w laboratoriach badawczych, a wymagania dotyczące hodowli komórkowej są nieskomplikowane. Łatwość utrzymania i proste warunki wzrostu sprawiają, że są one dostępne dla szerokiego grona naukowców dysponujących podstawowym wyposażeniem do hodowli komórkowej.
-
Model ostrej białaczki szpikowej (AML)
Pochodząca od mężczyzny cierpiącego na ostrą białaczkę szpikową (AML) linia komórkowa KG-1 AML stanowi cenne narzędzie do badania biologii AML oraz prowadzenia badań nad potencjalnymi metodami leczenia, dostarczając informacji na temat mechanizmów leżących u podstaw tej choroby oraz strategii terapeutycznych.
Ograniczenia
Ograniczenia związane z linią komórkową KG1 to:
-
Model in vitro
Komórki KG-1 stanowią cenny model in vitro do badań nad AML; należy jednak pamiętać, że mogą one nie odzwierciedlać w pełni złożoności choroby in vivo, stanowiąc uproszczony model komórkowy, który może nie obejmować wszystkich aspektów biologii AML.
Zastosowania komórek KG-1 w badaniach
KG-1 oferuje kilka obiecujących zastosowań w badaniach biomedycznych. Niektóre z ważnych badań, w których wykorzystuje się makrofagi KG-1, obejmują:
- Badania nad rakiem: Komórki KG-1 pochodzą od pacjenta z ostrą białaczką szpikową i dlatego są uważane za cenne narzędzie badawcze do analizy biologii AML. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania mechanizmów komórkowych i molekularnych odpowiedzialnych za rozwój, wzrost i oporność na leki w AML. Obejmuje to również identyfikację i odkrywanie nowych biomarkerów, mutacji genetycznych oraz szlaków sygnałowych związanych z AML. Na przykład w badaniu przeprowadzonym w 2019 r. wykazano, że długi niekodujący RNA linc00239 sprzyja oporności na doksorubicynę i złośliwemu zachowaniu komórek ostrej białaczki szpikowej KG-1. Dalsze badania wykazały, że lncRNA aktywuje szlak sygnałowy PI3K/Akt/mTOR, wywołując te efekty w komórkach AML [2].
- Toksykologia: Linia komórkowa KG1 jest szeroko stosowana w badaniach toksykologicznych. Naukowcy badają toksyczność i skuteczność potencjalnych środków terapeutycznych, w tym leków chemioterapeutycznych i terapii celowanych, na komórkach białaczki szpikowej KG1, aby zidentyfikować obiecujące kandydatki na leki do przyszłych ocen przedklinicznych i klinicznych. W badaniach przeprowadzonych w 2018 roku przeanalizowano toksyczność nano-niosomów zawierających doksorubicynę na linii komórkowej KG1 AML. W badaniu tym wysunięto hipotezę, że nano-niosomy są odpowiednim nośnikiem do dostarczania leków, ponieważ zwiększają skuteczność leczenia [3]. W innym badaniu naukowcy analizowali działanie terapeutyczne herbaty z pokrzywy przygotowanej z liści rośliny Urtica dioica. Badanie wykazało, że ten wodny ekstrakt z liści rośliny wykazuje działanie przeciwnowotworowe w komórkach ostrej białaczki szpikowej KG-1 i U937 [4].
Publikacje dotyczące komórek KG-1
W tej części artykułu wymieniono kilka interesujących publikacji naukowych dotyczących komórek KG-1.
Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „Journal of Cellular Physiology” (2019). W badaniu wysunięto hipotezę, że kwercetyna uwrażliwia linię komórkową KG1 AML na ligand indukujący apoptozę powiązany z TNF (TRAIL) i może nasilać efekt cytotoksyczności wywołanej przez TRAIL w komórkach.
KLF8 wzmacnia wzrost komórek ostrej białaczki szpikowej i glikolizę poprzez szlak AKT/mTOR
W artykule opublikowanym w czasopiśmie „Tropical Journal of Pharmaceutical Research” (2022) wysunięto hipotezę, że obniżenie ekspresji czynnika transkrypcyjnego typu Krüppel 8 hamuje proliferację komórek AML oraz glikolizę, sprzyjając apoptozie poprzez regulację szlaku sygnałowego AKT/mTOR.
Wpływ sorafenibu i trójtlenku arsenu na linie komórkowe U937 i KG-1: apoptoza czy autofagia?
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „Cell Journal” (Yakhteh) (2020) zbadano potencjalny wpływ trójtlenku arsenu i sorafenibu na komórki U937 i KG-1.
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „Medical Oncology” (2020) oceniono OXPHOS i glikolizę jako cele terapeutyczne w linii komórkowej AML KG-1.
W publikacji z czasopisma „Drug Design, Development, and Therapy” z 2020 r. wysunięto hipotezę, że związki kurkuminy i talidomidu synergistycznie wywołują efekt apoptozy w komórkach KG-1 poprzez zmniejszenie ekspresji STAT3 i Bcl-xL.
6. Materiały dotyczące linii komórkowej KG-1: protokoły, filmy i inne materiały
Poniżej przedstawiono kilka zasobów internetowych dotyczących komórek KG-1.
- Subkulturowanie komórek w zawiesinie: Ten film przedstawia protokół subkulturowania hodowli komórek w zawiesinie, takich jak KG-1.
Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek KG-1:
- Linia komórkowa KG-1: Ta strona internetowa zawiera obszerne podstawowe informacje na temat hodowli komórek linii KG-1. Znajdują się tam informacje o pożywkach dla tej linii komórkowej oraz protokoły dotyczące subkulturowania i postępowania z hodowlami kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi.
Bibliografia
- Pelliccia, F., V. Ubertini i N. Bosco, Znaczenie analizy cytogenetyki molekularnej przed wykorzystaniem linii komórkowych w badaniach naukowych: przypadek linii komórkowej białaczki KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): s. 237–240.
- Yang, Y. i in., Długi niekodujący RNA linc00239 sprzyja zachowaniom nowotworowym i oporności na chemioterapię doksorubicyną, częściowo poprzez aktywację szlaku PI3K/Akt/mTOR w komórkach ostrej białaczki szpikowej. Oncology Reports, 2019. 41(4): s. 2311–2320.
- Bahrami-Banan, F. i in., Przygotowanie i badanie nanosomów zawierających doksorubicynę oraz ocena ich toksyczności na linii komórkowej ostrej białaczki szpikowej KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): s. 309–323.
- Hodroj, M.H. i in., Herbata z pokrzywy hamuje wzrost komórek ostrej białaczki szpikowej in vitro poprzez stymulację apoptozy. Nutrients, 2020. 12(9): s. 2629.