komórki 4T1 - istotne informacje na temat badań i zastosowań komórek raka piersi
4T1 to przeszczepialna linia komórek mysiego raka piersi. Jest ona szeroko stosowana jako genetycznie identyczny model nowotworu in vitro do badania ludzkiego raka piersi. komórki 4T1 są wysoce inwazyjne i nowotworowe; mają tendencję do przerzutów z pierwotnego miejsca guza w gruczole sutkowym do innych miejsc, w tym wątroby, węzłów chłonnych, płuc, kości i mózgu, dzięki czemu są idealne do badania przerzutów raka piersi [1].
Ogólna charakterystyka i pochodzenie komórek 4T1
Wiedza na temat pochodzenia i ogólnej charakterystyki linii komórkowej jest niezbędna przed rozpoczęciem pracy z nią. W tej sekcji wspomnieliśmy o podstawach komórek raka piersi 4T1. Na przykład, czym są komórki 4T1? Jakie są cechy linii komórkowej 4T1? Jakie jest pochodzenie linii komórkowej 4T1? Jaka jest morfologia linii komórkowej 4T1?
- 4T1 to linia komórek guza piersi pochodząca z guza sutka, który spontanicznie powstał u myszy szczepu BALB/c. Te wysoce inwazyjne i nowotworowe komórki ściśle naśladują zachowanie ludzkiego raka piersi pod względem wzrostu i rozprzestrzeniania się przerzutów. W szczególności model guza 4T1 bada potrójnie ujemnego raka piersi (TNBC).
- komórki 4T1 są przylegające i mają morfologię podobną do komórek nabłonkowych.
linia komórkowa 4T1 i EMT-6
4T1 i EMT-6 to nieimmunogenne, mysie modele komórkowe do badań nad potrójnie ujemnym rakiem piersi. W tym przypadku 4T1 są bardziej agresywnymi i inwazyjnymi komórkami nowotworowymi niż EMT-6 o mniej inwazyjnych właściwościach [2].
komórki 4T1 vs 4T07
4T07 to również mysia linia komórek nowotworowych. Główna różnica między komórkami 4T1 i 4T07 polega na tym, że komórki 4T1 mogą opuścić pierwotne miejsce guza i rozprzestrzeniać się, tworząc widoczne wtórne przerzuty, podczas gdy komórki 4T07 nie mogą tworzyć widocznych przerzutów pomimo opuszczenia pierwotnego miejsca [3].
Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej 4T1
linia komórkowa raka piersi 4T1 oferuje szerokie zastosowania badawcze w dziedzinie biomedycyny. Aby hodować te komórki, należy zapoznać się z następującymi kluczowymi punktami opisującymi; jaki jest czas podwojenia 4T1? Jak hodowane są komórki 4T1? Jaka jest gęstość wysiewu komórek 4T1?
Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek 4T1
|
Czas podwojenia: |
Średni czas podwojenia populacji dla komórek raka piersi 4T1 wynosi 14 godzin. |
|
Adherentne lub w zawiesinie: |
4T1 to adherentna linia komórkowa. |
|
Stosunek podhodowli: |
Dla linii komórek potrójnie ujemnego raka piersi 4T1 zalecany jest stosunek podziału 1:6 i 1:8. W celu podziału komórki są płukane PBS i inkubowane z enzymem Accutase przez 8 do 10 minut. Zdysocjowane komórki są zbierane przez odwirowanie i ponownie zawieszane w świeżej pożywce. Zawieszone komórki są dozowane do nowej kolby w celu wzrostu. |
|
Pożywka wzrostowa: |
Do hodowli komórek 4T1 używana jest pożywka RPMI 1640. 10% płodowej surowicy bydlęcej (FBS), 2,0 g / L NaHCO3 i 2,1 mM stabilnej glutaminy dodaje się do pożywki hodowlanej w celu idealnego wzrostu komórek. |
|
Warunki wzrostu: |
komórki nowotworowe 4T1 są przechowywane w nawilżanym inkubatorze o temperaturze 37°C z 5% podażąCO2. |
|
Przechowywanie: |
komórki 4T1 powinny być przechowywane w temperaturze poniżej -150°C, tj. w zamrażarce elektrycznej lub w fazie gazowej ciekłego azotu, aby zachować żywotność komórek. |
|
Proces zamrażania i pożywka: |
CM-1 lub CM-ACF są zalecane dla linii komórkowej 4T1. Preferowana jest metoda powolnego zamrażania, która chroni żywotność komórek poprzez umożliwienie stopniowego spadku temperatury o 1°C. |
|
Proces rozmrażania: |
Fiolka z zamrożonymi komórkami jest trzymana w łaźni wodnej o temperaturze 37°C przez kilka sekund, aż komórki rozmrożą się i pozostanie tylko niewielka grudka lodu. Komórki te są ponownie zawieszane w świeżej pożywce i wlewane do kolby w celu hodowli. Po 24 godzinach inkubacji pożywka jest wymieniana w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Do hodowli komórek raka piersi 4T1 zalecane jest laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1. |
linia komórkowa 4T1: Zalety i wady
W tej części artykułu omówione zostaną zalety i wady związane z modelem przerzutowym 4T1.
Zalety
Główne zalety linii komórkowej 4T1 są następujące:
- Tumorogenność:
4T1 jest wysoce nowotworową linią komórkową. Komórki te mają zdolność do tworzenia syngenicznego mysiego modelu 4T1 do badania raka piersi po wstrzyknięciu do myszy. Dlatego model 4T1 idealnie nadaje się do badania rozwoju guza, wzrostu i przerzutów. Ponadto jest przydatny do badań przesiewowych i oceny leków terapeutycznych.
- Model przerzutów in vitro:
model 4T1 ma naturalną tendencję do przerzutów, co pozwala naukowcom skutecznie badać podstawowe mechanizmy i szlaki zaangażowane w proces przerzutów. Co więcej, komórki 4T1 są odporne na 6-tioguaninę. Pomaga to w skutecznym wykrywaniu komórek mikroprzerzutów z większą dokładnością w porównaniu z innymi modelami, ponieważ eliminuje potrzebę ważenia narządów docelowych i liczenia guzków.
Wady
Wadą związaną z linią komórkową 4T1 jest:
- Agresywność/szybkie tempo wzrostu:
linia komórkowa 4T1 jest wysoce agresywną linią komórkową potrójnie ujemnego raka piersi. Ze względu na szybkie tempo wzrostu, wykorzystanie tej linii komórkowej w długoterminowych eksperymentach i kontrolowanie zmiennych eksperymentalnych staje się wyzwaniem.
Zakup linii komórkowej 4T1: wysokiej jakości model raka piersi
linia komórkowa 4T1: Zastosowania w badaniach nad rakiem
Linia komórek mysiego modelu 4T1 jest cennym narzędziem badawczym do badania biologii nowotworów i oceny nowych metod leczenia. Poniżej wymieniono główne zastosowania komórek 4T1:
Biologia nowotworów
Linia komórkowa 4T1 jest szeroko stosowana do badania rozwoju i wzrostu nowotworów. Jest to idealny model in vitro do badania różnych mechanizmów komórkowych i molekularnych zaangażowanych w progresję nowotworu i przerzuty. Ponadto może ujawnić rolę szlaków sygnalizacji komórkowej, mikrośrodowiska i ekspresji genów w tych procesach. Badania przeprowadzone w 2019 roku wykorzystały komórki 4T1 do odkrycia mechanizmów stojących za inwazją i migracją komórek nowotworowych. Wyniki ujawniły, że zaangażowane są geny STAT3, MMP2 i MMP9, a zahamowanie tych genów może znacznie ograniczyć migrację i inwazję w komórkach nowotworowych [4]. Podobne badania wskazały również na kilka innych szlaków sygnałowych zaangażowanych w rozwój guza i przerzuty.
Co więcej, model 4T1 odgrywa kluczową rolę w zrozumieniu mikrośrodowiska raka piersi, w tym infiltracji komórek odpornościowych i wzrostu guza pierwotnego. Badania koncentrujące się na mikrośrodowisku guza 4T1 wykazały znaczący wgląd w rolę komórek odpornościowych i cytokin, takich jak ekspresja CXCL13, w progresji nowotworu. Model ten pomaga również w badaniu nisz przerzutowych i przerzutów nowotworowych, szczególnie w późnym stadium raka piersi, gdzie kolonizacja raka sutka jest powszechna.
Badania nad terapią nowotworową
Linia komórkowa 4T1 jest szeroko stosowana w badaniach nad terapią nowotworową do badań przesiewowych i oceny nowych metod leczenia. W badaniu zbadano potencjał cytotoksyczny zielonych zsyntetyzowanych nanocząstek żelaza z ekstraktu z rozmarynu (Rosemary-FeNPs) i czystego ekstraktu z rozmarynu na linii komórkowej 4T1. Wyniki badań sugerują, że Rosemary-FeNPs są bardziej obiecujące niż czysty ekstrakt [5]. Podobnie w badaniu przeprowadzonym w 2021 r. zbadano potencjał przeciwnowotworowy ekstraktu z imbiru w komórkach raka piersi 4T1 i modelu mysim 4T1 [6].
Oprócz naturalnych ekstraktów, linia komórkowa 4T1 jest wykorzystywana do oceny skuteczności tradycyjnych środków chemioterapeutycznych. Na przykład badania obejmujące połączenie cisplatyny z innymi terapiami wykazały zwiększoną śmierć komórek nowotworowych i zmniejszoną progresję guza w modelu 4T1. Wprowadzenie lucyferazy firefly do komórek 4T1 umożliwiło obrazowanie w czasie rzeczywistym wzrostu guza i fenotypu przerzutów, ułatwiając ocenę wpływu różnych metod leczenia.
Co więcej, oporność linii komórkowej 4T1 na 6-tioguaninę ułatwiła badania nad komórkami mikroprzerzutowymi, poprawiając wykrywanie i analizę przerzutów. Ta linia komórkowa odgrywa również kluczową rolę w badaniu odporności przeciwnowotworowej i skutków immunoterapii, szczególnie w kontekście ortotopowych modeli myszy, w których naukowcy mogą ściśle naśladować ludzkie nowotwory.
Ogólnie rzecz biorąc, linia komórkowa 4T1 pozostaje niezbędnym narzędziem w badaniach onkologicznych, od zrozumienia podstawowych mechanizmów biologii raka po opracowywanie i testowanie nowych strategii terapeutycznych.
komórki 4T1: Publikacje badawcze
Ta sekcja artykułu obejmie kilka interesujących i najczęściej cytowanych publikacji na temat komórek 4T1.
Artykuł ten został opublikowany w 2018 roku w Journal of Photochemistry and Photobiology. W badaniach zaproponowano, że nanocząstki srebra zsyntetyzowane z Madhuca longifolia wywierają działanie antyproliferacyjne w komórkach nowotworowych 4T1 poprzez degradację ściany komórkowej i generowanie ROS.
Cytotoksyczność i apoptotyczne działanie werbaskozydu na linię komórek raka piersi 4T1
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie BMC Pharmacology and Toxicology (2021) zaproponowano, że werbaskozyd, naturalny związek, indukował efekty apoptotyczne w komórkach raka piersi 4T1 poprzez sygnalizację TLR4.
Eupatorin hamował progresję nowotworu i wzmacniał odporność w mysim modelu raka piersi 4T1
Badania te zostały opublikowane w czasopiśmie Integrative Cancer Therapies w 2020 roku. W badaniu tym wykorzystano komórki 4T1 do opracowania mysiego modelu syngenicznego 4T1 i zbadano potencjał przeciwnowotworowy Eupatorinu. Eupatorin opóźnił rozwój guza w mysim modelu 4T1.
Hamujący wpływ ekstraktu z Viola odorata na wzrost guza i przerzuty w modelu raka piersi 4T1
W badaniu opublikowanym w Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018) zaproponowano, że zioło medyczne, Viola odorata, ma potencjalne działanie cytotoksyczne na komórki 4T1.
W badaniu tym zaproponowano, że stałe nanocząstki lipidowe obciążone docetakselem (SLN obciążone DTX) mogą być obiecującym środkiem do leczenia raka piersi i zapobiegania przerzutom, ponieważ ograniczają wzrost nowotworu i przerzuty do płuc komórek 4T1.
Zasoby dla linii komórkowej 4T1: Protokoły, filmy i nie tylko
Poniżej znajduje się kilka zasobów dotyczących komórek 4T1:
- samouczek transfekcji 4T1: Ten film jest przewodnikiem krok po kroku do przeprowadzenia transfekcji linii komórkowej 4T1.
- Subkultura linii komórkowej: Ten film wyjaśnia protokół subkultury dla adherentnych linii komórkowych.
Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek 4T1:
- linia komórkowa 4T1: Ten link do strony internetowej zawiera wszystkie przydatne informacje dotyczące obsługi hodowli 4T1. Zawiera informacje o podłożach hodowlanych, protokoły postępowania z kulturami kriokonserwowanymi i kulturami proliferacyjnymi.
Często zadawane pytania dotyczące linii komórkowej 4T1
Odniesienia
- Pulaski, B.A. i S. Ostrand-Rosenberg, Mysi model guza piersi 4T1. Curr Protoc Immunol, 2001. Rozdział 20: str. Jednostka 20.2.
- Maxwell, K.G., Immunomodulation of Breast Cancer Cells for Whole Tumor Vaccination. 2016.
- Walker, I., et al., Mammary tumors induce central pro-inflammatory cytokine expression, but not behavioral deficits in Balb/C mice. Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.
- Li, Y., et al., Hamowanie szlaku sygnałowego Stat3 przez naturalny produkt pektolinarygeninę osłabia przerzuty raka piersi. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., Green synthesis of iron nanoparticles by Rosemary extract and cytotoxicity effect evaluation on cancer cell lines. Biokataliza i biotechnologia rolnicza, 2018. 16: p. 54-62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Effect of Ginger Extract on 4T1 Breast Cancer Cell Line in Balb/c Mouse (Wpływ ekstraktu z imbiru na linię komórkową raka piersi 4T1 u myszy Balb/c ). Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.