Komórki U87MG - badania nad glejakiem przy użyciu U87MG i ich wpływ na badania nad rakiem mózgu
U-87 MG, ludzka pierwotna linia komórek glejaka wielopostaciowego, jest szeroko stosowana w badaniach biologicznych. W szczególności, komórki te są wykorzystywane w neuronauce i immunoonkologii.
Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej U-87 MG
W tej sekcji omówiono pochodzenie i ogólną charakterystykę linii komórkowej U87. Dowiesz się, czym są komórki U-87 MG? Skąd pochodzą komórki U87? Jaka jest pełna forma U-87 MG? Jak duże są komórki U87? Jaka jest morfologia linii komórkowej U87?
- Linia komórkowa U87 to linia komórkowa glejaka i gwiaździaka. Została stworzona w 1966 roku na Uniwersytecie w Uppsali. Komórki uzyskano od 44-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej cierpiącego na glejaka. Ta linia komórkowa jest formalnie nazywana U 87 MG, co oznacza Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Komórki U 87 MG reprezentują morfologię podobną do komórek nabłonkowych.
- Rozmiar komórek U 87 MG wynosi od 12 do 14 µm średnicy.
- Ta ludzka linia komórek glejaka jest hipodiploidalna i posiada modalną liczbę chromosomów 44 w około 48% populacji komórek. Jednak wyższe ploidie występują również w 5,9% populacji komórek.
Informacje dotyczące hodowli komórek U-87 MG
Przed rozpoczęciem pracy z komórkami U 87 MG należy zapoznać się z następującymi kluczowymi punktami dotyczącymi hodowli tych komórek glejaka wielopostaciowego. W szczególności należy wiedzieć: Jaki jest czas podwojenia populacji komórek U 87 MG? Jakie pożywki są używane do hodowli komórek U87? Jaka jest gęstość wysiewu linii komórkowej U 87 MG?
Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek U-87 MG
|
Czas podwojenia populacji: |
Czas podwojenia populacji komórek U 87 MG wynosi od 18 do 38 godzin. |
|
Adherentne lub w zawiesinie: |
U 87 MG jest linią komórek przylegających. Komórki mają wydłużony kształt i rosną jako monowarstwy. |
|
Gęstość wysiewu: |
Linię komórek glejaka U 87 MG zaleca się wysiewać w gęstości 1 x104 komórek/cm2. Adherentne komórki U87 są przemywane 1 x PBS i inkubowane z roztworem Accutase. Następnie zdysocjowane komórki są odwirowywane i odzyskiwane. Komórki są ostrożnie zawieszane i dodawane do nowych kolb zawierających pożywkę wzrostową. |
|
Pożywka wzrostowa: |
Linia komórkowa U 87 MG jest hodowana w EMEM (minimalne niezbędne podłoże Eagle'a) z dodatkiem 1,0 g/L L-glukozy, 2,0 mM L-glutaminy, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM pirogronianu sodu i 10% roztworu FBS. Pożywka powinna być odnawiana co 2-3 dni. |
|
Warunki wzrostu: |
Komórki U-87 MG wymagają nawilżanego inkubatora z 5% podażą CO2 i temperaturą 37°C dla optymalnego wzrostu. |
|
Przechowywanie: |
Komórki U87 są przechowywane w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150°C w celu utrzymania maksymalnej żywotności komórek glejaka. |
|
Proces zamrażania i pożywka: |
Do zamrażania komórek U 87 MG odpowiednie są pożywki CM-1 lub CM-ACF. Zaleca się powolny proces zamrażania, ponieważ zapobiega to szokowi komórek i chroni ich żywotność. |
|
Proces rozmrażania: |
Zamrożone fiolki z linią komórkową U-87 MG są rozmrażane w łaźni wodnej o temperaturze 37°C. Komórki są dodawane z pożywką wzrostową, ponownie zawieszane i dozowane do hodowli w nowych kolbach. W przeciwieństwie do tego, komórki U87 można odwirować w celu usunięcia pożywki zamrażającej, a następnie hodować. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Do obsługi hodowli komórek U 87 MG wymagany jest poziom bezpieczeństwa biologicznego 1. |
Zalety i wady komórek U-87 MG
Kiedy myślimy o linii komórkowej, pierwszą rzeczą, która przychodzi nam do głowy jest: Jakie są zalety korzystania z komórek U-87 MG? Jakie są wady komórek U87?
Zalety
Linie komórkowe U 87 MG są szeroko stosowane w badaniach. Oto kilka zalet związanych z tą linią komórkową:
Zalety
- Łatwość hodowli: Komórki U 87 MG są łatwe do utrzymania w hodowli. Nie wymagają one skomplikowanych wymagań dotyczących hodowli komórek
- Jednorodność: U-87 MG jest jednorodną linią komórkową. Większość komórek w populacji ma ten sam skład genetyczny, a zatem ma podobne cechy. Komórki te są wykorzystywane do badania procesów komórkowych, badań przesiewowych leków i testów
- Dobrze scharakteryzowane: Ta linia komórek glejaka jest dobrze scharakteryzowana pod względem cech wzrostu, morfologii i ekspresji genów, co czyni ją cennym narzędziem badawczym
Wady
- Ograniczone zastosowanie: U 87 MG jest linią komórkową glejaka, więc jej zastosowania ograniczają się głównie do badania glejaków i leżących u ich podstaw mechanizmów molekularnych. Może nie nadawać się do badania innych typów nowotworów.
Zastosowania badawcze z wykorzystaniem komórek U-87 MG
Linia komórkowa glejaka U87MG jest szeroko wykorzystywana w badaniach nad rakiem, w szczególności w badaniach nad glejakiem. Niektóre z zastosowań badawczych komórek U 87 MG są następujące:
- Badania nad biologią nowotworów: Linia komórkowa U87 jest wykorzystywana do badania wzrostu i rozwoju raka, podstawowych mechanizmów molekularnych, szlaków sygnałowych i mikrośrodowiska guza. W badaniu opublikowanym w 2020 r. wykorzystano model glejaka in vitro, linię komórkową U-87 MG, do zbadania genu BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) jako celu terapeutycznego. Wyniki wykazały, że gen BMAL1 hamuje proliferację, migrację i inwazję komórek glejaka poprzez hamowanie ekspresji cykliny B1, metaloproteinazy-9 i fosfo-AKT [1]. W innym badaniu przeprowadzonym w 2019 r. wykorzystano linię komórkową U87 i zbadano, że obniżona ekspresja czynnika transkrypcyjnego czynnika martwicy nowotworów alfa indukowanego lipopolisacharydem (LITAF) może zwiększać promieniowrażliwość komórek glejaka poprzez regulację w górę szlaku FOXO-1. LITAF jest również znany jako gen 7 indukowany przez p53 (PIG7) [2].
- Odkrywanie i rozwój leków: Komórki U-87 MG mogą być wykorzystywane do badań przesiewowych i testowania leków, umożliwiając naukowcom identyfikację nowych potencjalnych leków przeciwnowotworowych oraz ocenę ich skuteczności i toksyczności. W badaniach wykorzystano linię komórkową glejaka U 87 MG do oceny potencjału przeciwnowotworowego i przeciwutleniającego ekstraktu z Inula helenium (L.) [3]. Podobnie, w innej publikacji wspomniano o wykorzystaniu linii komórkowej U87 do badania cytotoksycznego i apoptotycznego działania ekstraktów roślinnych [4]. Ponadto w badaniach opublikowanych w 2018 r. badano cytotoksyczny wpływ alkaloidów seskwiterpenowych ekstrahowanych z roślin Nuphar na wrażliwe i lekooporne linie komórkowe U 87 MG [5].
Zamów linię komórkową glejaka U87 MG już dziś
Linia komórkowa U-87 MG: Publikacje badawcze
Oto kilka ważnych publikacji naukowych dotyczących linii komórkowej U 87 MG.
W artykule opublikowanym w Neuroreport 2018 zaproponowano, że niedotlenienie może zwiększać migrację i inwazję ludzkich komórek glejaka poprzez regulację szlaku sygnałowego PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Badanie to zostało opublikowane w czasopiśmie Frontiers in Pharmacology w 2020 roku. Wyniki badań wskazują, że flawonoid, Eriodictyol, wywiera działanie przeciwnowotworowe na linię komórkową U87 i hamuje proliferację komórek oraz przerzuty. Związek ten pośredniczy w swoich właściwościach przeciwnowotworowych poprzez modulację szlaku PI3K/Akt/NF-κB.
Badania opublikowane w Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) sugerują, że chińska formuła ziołowa o nazwie Xihuang pill może indukować apoptozę w komórkach U87 poprzez celowanie w aktywowaną przez ROS kaskadę Akt/mTOR/FOXO1.
LITAF zwiększa promieniowrażliwość ludzkich komórek glejaka poprzez szlak FoxO1
Ten artykuł badawczy został opublikowany w czasopiśmie Cellular and Molecular Neurobiology w 2019 roku. W badaniu zaproponowano, że czynnik transkrypcyjny LITAF obniża i zwiększa promieniowrażliwość komórek glejaka poprzez regulację szlaku sygnałowego FOXO-1.
Ten artykuł został opublikowany w Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Naukowcy wykorzystali komórki U 87 MG do zbadania cytotoksycznego działania nanocząstek PLGA zawierających kurkuminę.
Zasoby dotyczące komórek U-87 MG: Protokoły, filmy i nie tylko
Linia komórkowa glejaka U87MG jest wykorzystywana w wielu laboratoriach zajmujących się badaniami nad rakiem. Kilka zasobów dotyczących tej linii komórkowej to:
- Transfekcja linii komórkowej U87: Ten dokument opisuje protokół transfekcji komórek U 87 MG.
- Transfekcja linii komórkowej U 87 MG: Ten film jest samouczkiem wyjaśniającym krok po kroku protokół transfekcji komórek U87.
Zasoby dotyczące protokołu hodowli komórek U87 są wymienione poniżej:
- Komórki U87 MG: Ten link zawiera podstawowe informacje na temat linii komórkowej U 87 MG. Obejmuje on krótkie protokoły dzielenia, zamrażania i rozmrażania komórek.
Wgląd w badania nad glejakiem U87 MG: Często zadawane pytania
Referencje
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 Suppresses Proliferation, Migration, and Invasion of U87MG Cells by Downregulating Cyclin B1, Phospho-AKT, and Metalloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF zwiększa promieniowrażliwość ludzkich komórek glejaka poprzez szlak FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., działanie przeciwutleniające i przeciwnowotworowe ekstraktu z Inula helenium (L.) w ludzkiej linii komórkowej glejaka U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoksyczność alkaloidów seskwiterpenowych z roślin Nuphar w stosunku do wrażliwych i lekoopornych linii komórkowych. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.