Komórki SiHa - rzucają światło na badania nad rakiem szyjki macicy

KomórkiSiHa to komórki raka szyjki macicy szeroko stosowane w badaniach biomedycznych. Są doskonałymi gospodarzami do transfekcji, a zatem nadają się do badań ekspresji genów. Ze względu na ich ludzkie pochodzenie i znaczenie dla raka szyjki macicy, komórki te są wykorzystywane głównie w biologii nowotworów, wirusologii i badaniach nad rozwojem leków.

Ogólna charakterystyka i pochodzenie komórek SiHa

Zrozumienie pochodzenia i ogólnych cech linii komórkowej ma kluczowe znaczenie, ponieważ wpływa na jej wykorzystanie w badaniach. W tej sekcji artykułu dowiesz się o pochodzeniu linii komórkowej SiHa, charakterystycznych cechach i wielu innych: Czym jest nowotworowa linia komórkowa SiHa? Czym są komórki SiHa HPV? Jakie jest pochodzenie linii komórkowej SiHa? Jaka jest morfologia SiHa?

SiHa, linia komórkowa raka szyjki macicy, została uzyskana z fragmentów pierwotnej biopsji macicy azjatyckiej kobiety (55 lat) z rakiem płaskonabłonkowym [1].
Linia komórkowa SiHa wykazuje hipertriploidalny kariotyp. Większość komórek ma średnią liczbę chromosomów między 69 a 72. Jednak około 24% komórek posiada modalną liczbę chromosomów 71.
Komórki SiHa są nosicielami wirusa brodawczaka ludzkiego 16. Wykazują one integrację około 1 do 2 kopii genomu HPV na komórkę [2].
Te komórki raka szyjki macicy wykazują morfologię nabłonkową.

Podział komórek raka szyjki macicy HeLa pod mikroskopem.

Linia komórkowa SiHa: Informacje dotyczące hodowli

Utrzymanie hodowli linii komórkowej nie jest łatwe, dopóki nie pozna się wszystkich kluczowych punktów dotyczących jej hodowli. Powinieneś wiedzieć: Jaki jest czas podwojenia SiHa? Co to jest pożywka dla komórek SiHa? Jak hodować linię komórkową SiHa?

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek SiHa

Czas podwojenia:	Czas podwojenia dla komórek SiHa wynosi około 17 godzin.
Adherentne lub w zawiesinie:	SiHa jest linią komórek przylegających.
Stosunek podhodowli:	Stosunek podhodowli dla komórek SiHa wynosi od 1:2 do 1:4. W celu pasażowania, przylegające komórki są płukane 1x PBS. Dodawany jest roztwór Accutase, a komórki są inkubowane przez 8 do 10 minut w temperaturze otoczenia. Następnie dodaje się pożywkę i odwirowuje komórki. Osad komórek jest ponownie zawieszany, a komórki są przelewane do nowej kolby w celu hodowli.
Pożywka hodowlana:	Minimalna niezbędna pożywka Eagle'a (EMEM) zawierająca 10% FBS, 2 mM L-glutaminy, 2,2 g/L NaHCO3 i Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) jest używana do idealnego wzrostu komórek SiHa. Pożywka jest wymieniana 2 do 3 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:	Komórki SiHa są hodowane w nawilżanym inkubatorze w temperaturze 37°C z 5% dodatkiem CO2.
Przechowywanie:	Zamrożone fiolki z linią komórkową raka szyjki macicy SiHa są przechowywane w temperaturze poniżej -150°C w zamrażarce elektrycznej lub w fazie gazowej ciekłego azotu przez dłuższy czas.
Proces zamrażania i medium:	Do zamrażania komórek SiHa stosuje się pożywkę CM-1 lub CM-ACF. Komórki są zamrażane przy użyciu metody powolnego zamrażania, która pozwala na spadek temperatury tylko o 1°C na minutę w celu ochrony żywotności komórek.
Proces rozmrażania:	Zamrożone komórki są trzymane przez 40 do 60 sekund w łaźni wodnej o temperaturze 37°C, aż do pozostawienia małej grudki lodu. Następnie dodawana jest świeża pożywka wzrostowa, a komórki są odwirowywane w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej. Pelet komórek jest ponownie zawieszany, a komórki są dozowane do kolby hodowlanej w celu wzrostu.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Do obsługi i utrzymania hodowli komórek SiHa wymagane jest laboratorium poziomu bezpieczeństwa biologicznego 1.

Przylegająca warstwa komórek SiHa w powiększeniu 10× i 20×.

Zalety i wady linii komórkowej SiHa

Podobnie jak inne linie komórkowe ludzkiego raka, SiHa również posiada pewne cechy charakterystyczne związane z pewnymi zaletami i wadami. Poniżej omówiliśmy kilka istotnych z nich.

Zalety linii komórkowej raka szyjki macicy SiHa

Model raka szyjkimacicy
- Pochodzi z płaskonabłonkowego raka szyjki macicy.
- Służy do badania mechanizmów, wzrostu i rozwoju raka szyjki macicy.
- Ekspresja genów p53+ i pRB+, które są związane z naprawą DNA, regulacją cyklu komórkowego i supresją nowotworów.
Potencjał nowotworotwórczy
- Komórki SiHa są nowotworotwórcze i mogą indukować słabo zróżnicowane guzy naskórkowe III stopnia u nagich myszy.
- Wykorzystywane do badań nad rakiem in vivo i testowania terapii przeciwnowotworowych.

Wady komórek SiHa

Szybkość proliferacji
- Komórki SiHa szybko się namnażają, prowadząc do przerostu.
- Wymagają częstego pasażowania, co zwiększa ryzyko niestabilności genetycznej, która może wpływać na zachowanie komórek w czasie.

Zastosowania badawcze komórek SiHa

Linia komórkowa SiHa jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem szyjki macicy. Poniżej omówiono kilka konkretnych zastosowań tej linii komórkowej.

Badania związane z wirusem brodawczaka ludzkiego (HPV): Komórki SiHa są HPV 16 dodatnie, a zatem są cennymi jednostkami do badania zakażenia wirusem brodawczaka ludzkiego, jego mechanizmów molekularnych oraz jego roli w rozwoju i progresji raka szyjki macicy. Naukowcy wykorzystują również te komórki do badania replikacji wirusa, integracji i jego wpływu na procesy zachodzące w komórkach gospodarza. W badaniu przeprowadzonym w 2020 r. wykorzystano linię komórkową SiHa do zbadania roli onkoprotein HPV E6/E7 w rozwoju raka szyjki macicy poprzez celowanie w nie za pomocą technologii CRISPR. Odkrycia ujawniły, że knockdown genów E6/E7 spowodował zahamowanie wzrostu i apoptozę komórek SiHa. Dlatego też te geny wirusowe mogą służyć jako kluczowe cele dla opracowywania terapii przeciwko rakowi szyjki macicy związanemu z HPV [3].
Biologia nowotworów: Komórki SiHa służą jako nieoceniony model do badania biologii raka szyjki macicy, w tym rozwoju raka, progresji, przerzutów i inwazji. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania mutacji genetycznych i leżących u ich podstaw szlaków molekularnych przyczyniających się do rozwoju i wzrostu raka szyjki macicy, np. w badaniu wykorzystano komórki SiHa i stwierdzono, że podwyższony poziom SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) sprzyja proliferacji komórek raka szyjki macicy poprzez aktywację kaskady MAPK [4].
Badania przesiewowe i testowanie leków: SiHa jest szeroko stosowaną linią raka szyjki macicy do oceny skuteczności potencjalnych leków przeciwnowotworowych specyficznych dla raka szyjki macicy związanego z HPV. Naukowcy badają potencjał antyproliferacyjny, apoptotyczny i przeciwprzerzutowy leków przy użyciu tych komórek. Tak jak w badaniu przeprowadzonym w 2019 r., w którym badano potencjał cytotoksyczny ekstraktów z owoców Vatica diospyroides Symington Type SS na linii komórkowej raka szyjki macicy SiHa [5].

Komórki SiHa do badań!

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 305023

Publikacje badawcze z wykorzystaniem komórek SiHa

Niektóre znaczące i często cytowane publikacje naukowe dotyczą linii komórkowej raka płaskonabłonkowego szyjki macicy SiHa.

Przeciwnowotworowe działanie aloe-emodyny na komórki raka szyjki macicy było związane z wirusem brodawczaka ludzkiego E6/E7 i metabolizmem glukozy

W publikacji w OncoTargets and Therapy (2019) zaproponowano, że naturalny związek aloe-emodyna wywiera działanie apoptotyczne związane z HPV E6/E7 i metabolizmem glukozy w komórkach raka szyjki macicy SiHa.

Ocena potencjału przeciwnowotworowego ekstraktu z liści Excoecaria agallocha (L.) na linii komórkowej ludzkiego raka szyjki macicy (SiHa) i ocena podstawowego mechanizmu działania

Ten artykuł został opublikowany w Future Journal of Pharmaceutical Sciences w 2022 roku. W niniejszym badaniu zbadano działanie przeciwnowotworowe ekstraktu z liści rośliny Excoecaria agallocha (L.) w linii komórkowej raka szyjki macicy SiHa.

Działanie antyproliferacyjne 1,10-fenantroliny sprzężonej z siarczanowanymi nanocząstkami ZnO w linii komórkowej raka szyjki macicy SiHa

W badaniu opublikowanym w Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) zaproponowano, że cząsteczka 1,10-fenantroliny po sprzężeniu z nanocząsteczkami siarczanu cynku wywiera znaczące działanie antyproliferacyjne w komórkach SiHa.

Astragalozyd IV hamuje inwazję i przerzuty komórek raka szyjki macicy SiHa poprzez szlaki PI3K i MAPK, w których pośredniczy TGF-β1

Badania te zostały opublikowane w Oncology Reports w 2019 roku. Badanie wykazało, że Astragalozyd IV, produkt naturalny, hamuje migrację i inwazję komórek SiHa poprzez modulację szlaków sygnałowych PI3K i MAPK, w których pośredniczy TGF-β1.

IFI16 promuje progresję raka szyjki macicy poprzez regulację PD-L1 w immunomikrośrodowisku poprzez szlak STING-TBK1-NF-kB

Badanie opublikowane w czasopiśmie Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) wykazało, że IFI16 (białko indukowane interferonem gamma 16) reguluje gen PD-L1 poprzez aktywację szlaku STING-TBK1-NF-kB, aby pobudzić wzrost komórek raka szyjki macicy SiHa.

Zasoby dla linii komórkowej SiHa: Protokoły, filmy i nie tylko

Oto kilka zasobów internetowych dotyczących komórek SiHa.

Transfekcja komórek SiHa: Ten artykuł badawczy zawiera protokół utrzymywania komórek raka szyjki macicy SiHa i transfekcji komórek SiHa.

Poniższy link zawiera informacje na temat hodowli komórek SiHa.

Linia komórkowa SiHa: Ta strona internetowa zawiera wiele cennych danych na temat linii komórkowej SiHa. Obejmują one informacje na temat pożywek wzrostowych, warunków hodowli, protokołów subkulturowania komórek SiHa i postępowania z ich kulturami proliferacyjnymi i kriokonserwowanymi.

Najczęściej zadawane pytania dotyczące komórek raka szyjki macicy SiHa

Piśmiennictwo

Melzer, C., J. von der Ohe i R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Komórki macierzyste, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Badanie wpływu wirusa brodawczaka ludzkiego wysokiego ryzyka na skład biochemiczny komórek raka szyjki macicy z wykorzystaniem spektroskopii wibracyjnej. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7 mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G promuje proliferację raka szyjki macicy poprzez aktywację szlaku sygnałowego MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines. The Scientific World Journal, 2019. 2019.