Komórki SH-SY5Y - badania nad neuroblastomą i znaczenie komórek SH-SY5Y dla neuronauki

Linia komórkowa SH-SY5Y, pochodząca z ludzkiego neuroblastoma, jest szeroko wykorzystywana w badaniach medycznych do badania chorób neurodegeneracyjnych i opracowywania leków. Naukowcy wykorzystują te komórki w ich pierwotnej niezróżnicowanej formie lub różnicują je w komórki przypominające neurony.

Informacje ogólne i pochodzenie linii komórkowej SH-SY5Y

W tej sekcji omówione zostaną podstawowe informacje na temat linii komórkowej SH-SY5Y, w tym jej pochodzenie, definicja i struktura komórkowa. Zajmiemy się kwestiami takimi jak morfologia i pochodzenie komórek.

  • SH-SY5Y to linia komórkowa pochodzenia ludzkiego, która powstała w wyniku subklonowania linii komórkowej nerwiaka niedojrzałego SK-N-SH w 1970 roku.
  • Macierzysta linia komórkowa, SK-N-SH, została opracowana z biopsji szpiku kostnego czteroletniej pacjentki z nerwiakiem niedojrzałym.
  • Komórki SH-SY5Y są fenotypowo adrenergiczne i wyrażają markery dopaminergiczne, co czyni je użytecznym modelem in vitro do badania chorób neurodegeneracyjnych, neurogenezy i charakterystyki komórek mózgowych [1].
  • Komórki SH-SY5Y rosną jako skupiska żywych komórek neuroblastycznych z neurytami i są luźno przylegające.
  • Rozmiar komórek SH-SY5Y wynosi 12 μm.
  • Modalna liczba chromosomów dla komórek SH-SY5Y wynosi 47 i posiadają one rzadki marker chromosomu numer 1, trisomię 1q, spowodowaną wstawieniem dodatkowej kopii segmentu 1q do długiego ramienia chromosomu 1.

Hodowla komórek SH-SY5Y

W laboratoriach neurobiologicznych komórki SH-SY5Y są najczęściej hodowanymi komórkami neuroblastoma. Aby pracować z tymi komórkami, konieczne jest zrozumienie, jaki rodzaj pożywki jest odpowiedni do ich hodowli, ich charakterystyki wzrostu, optymalnej gęstości wysiewu i właściwej metody ich zamrażania. Ta sekcja dostarczy niezbędnych informacji na temat hodowli komórek SH-SY5Y, aby pomóc ci w tych aspektach.

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek SH-SY5Y

Czas pod wojeniapopulacji: Średni czas podwojenia populacji komórek SH-SY5Y wynosi około 3 do 4 dni.

Adherentne lub w zawiesinie: Komórki SH-SY5Y są komórkami luźno przylegającymi. Rosną jako kępy, gdy są wysiewane w wysokiej gęstości.

Gęstość wysiewu: Optymalna gęstość wysiewu dla SH-SY5Y wynosi 1 x 104 komórki/cm2. Hodowle SH-SY5Y składają się zarówno z komórek przylegających, jak i pływających.

Podłoże hodowlane: Pożywka DMEM:Ham's F12 z dodatkiem 3,1 g/l glukozy, 10% FBS i 1,6 mM L-glutaminy jest idealna do hodowli linii komórkowej SH-SY5Y.

Warunki wzrostu (temperatura, CO2): Komórki SH-SY5Y są hodowane w temperaturze 37°C w nawilżanym inkubatorze z 5% podażą CO2.

Przechowywanie: Aby utrzymać żywotność komórek SH-SY5Y, są one przechowywane w fazie gazowej ciekłego azotu w temperaturze poniżej -150°C.

Proces zamrażania i pożywka: Do zamrażania komórek SH-SY5Y stosuje się pożywki CM-1 lub CM-ACF. Do zamrażania tej linii komórek neuroblastoma wybrano metodę powolnego zamrażania, która stopniowo obniża temperaturę o 1°C.

Proces rozmrażania: Zamrożone fiolki zawierające komórki SH-SY5Y umieszcza się w łaźni wodnej ustawionej na temperaturę 37°C. Fiolka jest szybko mieszana, aż komórki rozmrożą się i pozostanie tylko niewielka grudka lodu.

Poziom bezpieczeństwa biologicznego: Komórki SH-SY5Y mogą być hodowane w laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.

Komórki SH-SY5Y przy średnim i wysokim konfluencji.

Komórki SH-SY5Y: Zalety i ograniczenia

Zalety

  • Różnicowanie w neurony: Komórki SH-SY5Y można różnicować w funkcjonalne neurony przy użyciu określonych związków, zapewniając wygodniejszą alternatywę dla neuronów pierwotnych i unikając obaw etycznych związanych z ich wykorzystaniem [2].
  • Model in vitro dla chorób neurodegeneracyjnych: Ekspresja markerów molekularnych, w tym markerów neuronów dopaminergicznych, sprawia, że komórki SH-SY5Y nadają się do badania zaburzeń neurodegeneracyjnych, takich jak choroba Parkinsona.

Ograniczenia

  • Niezsynchronizowany cykl komórkowy: Hodowle komórek SH-SY5Y wykazują niezsynchronizowane cykle komórkowe w stanie niezróżnicowanym [3].
  • Niezdefiniowany stan zróżnicowania: Komórki SH-SY5Y mają niezdefiniowany stan różnicowania, który waha się od nowotworowego stanu neuroblastoma do postmitotycznych neuronów lub neuronalnych komórek progenitorowych. Nie wyrażają one markerów molekularnych, które posiadają dojrzałe komórki neuronowe [4].

Komórki SH-SY5Y dla neurofarmakologii in vitro i odkrywania leków

Zastosowania komórek SH-SY5Y

Badania nad chorobami neurodegeneracyjnymi: Komórki SH-SY5Y są wykorzystywane do badania zaburzeń neurodegeneracyjnych, takich jak choroba Alzheimera i Parkinsona. Na przykład, w badaniu poddano komórki SH-SY5Y działaniu peptydu amyloidowego β 1-42 w celu stworzenia modelu in vitro choroby Alzheimera. Opracowana linia komórkowa została następnie transfekowana pcDNA-17A i 17A shRNA w celu zbadania wpływu długiego niekodującego RNA 17A na komórki podobne do komórek choroby Alzheimera. Badanie wykazało, że LncRNA-17A reguluje apoptozę i autofagię komórek SH-SY5Y, naśladując AD [5].

Rozwój leków: Komórki SH-SY5Y są wykorzystywane do badań przesiewowych i walidacji leków pod kątem ich działania terapeutycznego przeciwko chorobom neurodegeneracyjnym. Na przykład badanie przeprowadzone w 2021 r. wywołało parkinsonizm w komórkach SH-SY5Y przy użyciu herbicydu (Paraquat), a następnie wykorzystało te komórki do zbadania potencjału terapeutycznego flawonoidu, Naringeniny. Związek ten wykazał działanie ochronne przed neurodegeneracją i neurotoksycznością związaną z chorobą Parkinsona w modelach komórkowych, wskazując na jego potencjał w opracowywaniu terapii PD [6].

Publikacje badawcze dotyczące komórek SH-SY5Y

Istnieje wiele badań naukowych dotyczących komórek SH-SY5Y. W tej sekcji omówimy kilka znaczących przykładów.

Zasoby dotyczące komórek SH-SY5Y: Protokoły, filmy i inne

Dostępnych jest kilka zasobów internetowych dotyczących tej słynnej linii komórek nerwiaka niedojrzałego. Zasoby te mogą dostarczyć informacji na temat obsługi i utrzymania hodowli SH-SY5Y.

Protokoły hodowli komórek

Poniższe artykuły internetowe mogą pomóc w poznaniu metod hodowli, zamrażania i rozmrażania komórek SH-SY5Y.

  • Hodowlakomórek SH-SY5Y: Podstawoweinformacje o komórkach SH-SY5Y, w tym rozmrażanie, zamrażanie i subkultura komórek.
  • Hodowla komórek SH-SY5Y: Pokazuje informacje o stosowanych pożywkach i etapach subhodowli komórek SH-SY5Y.
  • Transfekcja komórek SH-SY5Y: Ten dokument opisuje protokół transfekcji przejściowej dla linii komórkowej SH-SY5Y.
  • Protokół różnicowania: Ten film wyjaśnia protokół różnicowania komórek SH-SY5Y.

Oczekujemy, że ten artykuł dostarczy korzystnych informacji dotyczących obsługi, hodowli i wykorzystania komórek SH-SY5Y w badaniach naukowych; jeśli chcesz pracować z tą linią komórek neuroblastoma, rozważ złożenie u nas zamówienia.

Linia komórkowa SH-SY5Y: Często zadawane pytania

Piśmiennictwo

  1. Carvajal-Oliveros, A., et al., Linia komórkowa BE (2)-M17 ma lepszy fenotyp dopaminergiczny niż tradycyjnie stosowana w badaniach nad chorobą Parkinsona SH-SY5Y, która jest głównie serotoninergiczna. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
  2. Kovalevich, J. i D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology. Hodowla komórek neuronalnych: metody i protokoły, 2013: s. 9-21.
  3. Martin, E.-R., J. Gandawijaya i A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells utilizing B-27 supplement. Frontiers in Pharmacology, 2022: s. 4042.
  4. Feles, S., et al., Usprawnienie warunków hodowli linii komórkowej nerwiaka niedojrzałego SH-SY5Y: warunek wstępny badań funkcjonalnych. Methods and Protocols, 2022. 5(4): p. 58.
  5. Wang, X., M. Zhang i H. Liu, LncRNA17A reguluje autofagię i apoptozę linii komórkowej SH-SY5Y jako model in vitro choroby Alzheimera. Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 2019. 83(4): p. 609-621.
  6. Ahmad, M.H., et al., Naringenin łagodzi indukowaną parakwatem utratę neuronów dopaminergicznych w komórkach SH-SY5Y i szczurzym modelu choroby Parkinsona. Neuropharmacology, 2021. 201: p. 108831.

Wykryliśmy, że znajdujesz się w innym kraju lub używasz innego języka przeglądarki niż aktualnie wybrany. Czy chcesz zaakceptować sugerowane ustawienia?

Zamknij