KLE-celler

550,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 305051

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Avtale om materialoverføring

Beskrivelse	KLE-cellelinjen er en adherent cellelinje som stammer fra endometriet til en hvit, kvinnelig pasient med adenokarsinom. Denne cellelinjen ble etablert fra en 64 dager gammel pasient, og har siden blitt et viktig verktøy i forskning på endometriecancer. KLE-cellene ble deponert av GR Richardson og er kjent for sine tumorigeniske egenskaper, ettersom de danner svulster i løpet av 21 dager med 100 % frekvens når de inokuleres subkutant i nakne mus. Disse svulstene danner ikke kjertler, men har mikrovilli, junksjonskomplekser og nukleolære kanalsystemer som ligner dem man finner i normalt endometrium under gestagenstimulering. KLE-celler uttrykker blodtype O og er Rh-positive, noe som kan være relevant for spesifikke studier som involverer antigenuttrykk. Cellelinjen brukes ofte til å studere patofysiologien til endometriecancer, og det er spesielt interessant at den er østrogenreseptor-negativ og progesteronreseptor-positiv. Denne reseptorprofilen gjør KLE-cellene svært godt egnet for forskning på progesterons rolle i utviklingen av endometriecancer. Elektronmikroskopistudier av KLE-celleavledede svulster har gitt detaljert innsikt i den cellulære ultrastrukturen, noe som gjør denne cellelinjen til en viktig ressurs for å forstå de morfologiske aspektene ved endometrieadenokarsinom.
Organisme	Menneskelig
Vev	Livmor, livmorslimhinne
Sykdom	Endometrieadenokarsinom

Alder	64 år
Kjønn	Kvinne
Etnisitet	Europeisk
Morfologi	Epitelial
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	KLE (Cytion katalognummer 305051)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1329

Antigenuttrykk	Blodtype O, Rh+
Tumorfremkallende	Ja, svulster utviklet seg innen 21 dager med 100 % frekvens (5/5) hos nakne mus som ble podet subkutant med 1×10⁷ celler.

Kulturmedium	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Kosttilskudd	Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Doblingstid	114 timer
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Delingsforhold	1: 2 til 1: 4
Fornyelse av væske	2 ganger per uke
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	For optimal feste og levedyktighet etter tining anbefaler vi å bruke kollagenbelagte kolber eller plater.
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
STR-profil	Amelogenin: x,x CSF1PO: 13,14 D13S317: 12 D16S539: 11,12 D5S818: 9,12 D7S820: 11,12 TH01: 6,7 TPOX: 8,11 vWA: 16 D3S1358: 17 D21S11: 28,30 D18S51: 13,17 Penta E: 7 Penta D: 13 D8S1179: 8,14 FGA: 23,25 D1S1656: 15.3 D6S1043: 15.3 D2S1338: 18,19 D12S391: 20,25 D19S433: 15

Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.

For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.

Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.

KLE-celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Avtale om materialoverføring