DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 er et allment anerkjent og mye brukt basismedium i cellekulturer for biologisk forskning. Det fungerer som en grunnleggende næringskilde for veksten av ulike pattedyrcellelinjer, særlig når det tilsettes føtal bovint serum (FBS).
Denne unike formuleringen kombinerer Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) og Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i et nøyaktig 1:1-forhold. Tilsetningen av L-glutamin forbedrer sammensetningen ytterligere.
DMEM, avledet fra Eagles Minimal Essential Medium (EMEM), tilbyr en økt konsentrasjon av aminosyrer og vitaminer sammenlignet med sin forgjenger. I kontrast er Hams F-12 basert på Hams F-10-medium, som gir et komplementært sett av essensielle komponenter.
For å støtte optimal cellevekst er det vanlig praksis å supplere DMEM:Ham's F12 med FBS i en typisk konsentrasjon på 5–10 %. Dette tilskuddet er nødvendig, da mediet mangler veksthormoner, lipider og proteiner som er avgjørende for celleutviklingen.
DMEM:Ham's F12 inneholder et pH-buffersystem og tilsettes ofte fenolrødt, en pH-indikator. Dyrkede celler i DMEM:Ham's F12, eller ethvert medium som bruker bikarbonatbuffersystemet, krever et kontrollert CO2-miljø på 5–10 % for å opprettholde riktige pH-nivåer.
Kvalitetskontroll
- Sterilfiltrert
Oppbevaring og holdbarhet
- Oppbevares ved +2 °C til +8 °C, beskyttet mot lys.
- Etter åpning skal produktet oppbevares ved 4 °C og brukes innen 6–8 uker.
Fraktbetingelser
- Omgivelsestemperatur
Oppbevaring
- Oppbevares i kjøleskap ved +2 °C til +8 °C i mørke. Unngå frysing og hyppig oppvarming til +37 °C, da dette reduserer produktkvaliteten.
- Ikke varm opp mediet til over 37 °C eller bruk ukontrollerte varmekilder som mikrobølgeovner.
- Hvis bare en del av mediet skal brukes, fjern den nødvendige mengden og varm den opp til romtemperatur før bruk.
Sammensetning
| Kategori | Komponenter | Konsentrasjon (mg/L) |
| Aminosyrer | Glycin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin-HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| L-asparaginsyre | 6,65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystin 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutaminsyre | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin-HCl-H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucin | 54,47 | |
| L-leucin | 59,05 | |
| L-lysin-HCl | 91,25 | |
| L-metionin | 17,24 | |
| L-fenylalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-treonin | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrosin 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitaminer | D-biotin | 0,0035 |
| Kolin klorid | 8,98 | |
| D-kalsiumpantotenat | 2,24 | |
| Folsyre | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Pyridoksin-HCl | 0,031 | |
| Pyridoksal-HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Tiamin-HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Uorganiske salter | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Andre komponenter | D-glukose | 3151,00 |
| Hypoxantin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolsyre | 0,042 | |
| Liponsyre | 0,105 | |
| Fenolrødt natriumsalt | 8,63 | |
| Putrescin-2-HCl | 0,081 | |
| Natrium-pyruvat | 55,00 | |
| Tymidin | 0,365 |