DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 er et allment anerkjent og mye brukt basismedium i cellekultur for biologisk forskning. Det fungerer som en grunnleggende næringskilde for veksten av ulike pattedyrcellelinjer, særlig når det tilsettes føtalt okseserum (FBS).
Denne unike formuleringen kombinerer Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) og Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i et nøyaktig 1:1-forhold. Tilsetningen av L-glutamin forbedrer sammensetningen ytterligere.
DMEM, som er avledet fra Eagles Minimal Essential Medium (EMEM), har en høyere konsentrasjon av aminosyrer og vitaminer sammenlignet med forgjengeren. Ham's F-12 er derimot basert på Ham's F-10-medium og gir et komplementært sett av essensielle komponenter.
For å støtte optimal cellevekst er det vanlig praksis å tilsette FBS til DMEM:Ham's F12 i en typisk konsentrasjon på 5–10 %. Denne tilsetningen er nødvendig, da mediet mangler veksthormoner, lipider og proteiner som er avgjørende for celleutviklingen.
DMEM:Ham's F12 inneholder et pH-buffersystem og tilsettes ofte fenolrødt, en pH-indikator. Dyrkede celler i DMEM:Ham's F12, eller ethvert medium som benytter bikarbonatbuffersystemet, krever et kontrollert CO₂-miljø på 5–10 % for å opprettholde riktige pH-nivåer.
Kvalitetskontroll
- Sterilfiltrert
Oppbevaring og holdbarhet
- Oppbevares ved +2 °C til +8 °C, beskyttet mot lys.
- Etter åpning skal produktet oppbevares ved 4 °C og brukes innen 6–8 uker.
Fraktbetingelser
- Omgivelsestemperatur
Vedlikehold
- Oppbevares i kjøleskap ved +2 °C til +8 °C i mørke. Unngå frysing og hyppig oppvarming til +37 °C, da dette reduserer produktkvaliteten.
- Ikke varm opp mediet til over 37 °C, og unngå å bruke ukontrollerte varmekilder som mikrobølgeovner.
- Hvis bare en del av mediet skal brukes, fjern den nødvendige mengden og varm den opp til romtemperatur før bruk.
Sammensetning
| Kategori | Komponenter | Konsentrasjon (mg/L) |
| Aminosyrer | Glycin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin-HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| L-asparaginsyre | 6,65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystin-2-HCl | 31,29 | |
| L-glutaminsyre | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin-HCl-H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucin | 54,47 | |
| L-leucin | 59,05 | |
| L-lysin-HCl | 91,25 | |
| L-metionin | 17,24 | |
| L-fenylalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-treonin | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrosin 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitaminer | D-biotin | 0,0035 |
| Kolin-klorid | 8,98 | |
| D-kalsiumpantotenat | 2,24 | |
| Folsyre | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Pyridoksin-HCl | 0,031 | |
| Pyridoksal-HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Tiamin-HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Uorganiske salter | CaCl₂·2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5 H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9 H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄·7H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂·6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2 H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄·7 H₂O | 0,432 | |
| Andre komponenter | D-glukose | 3151,00 |
| Hypoxantin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolsyre | 0,042 | |
| Liponsyre | 0,105 | |
| Fenolrødt natriumsalt | 8,63 | |
| Putrescin-2-HCl | 0,081 | |
| Natriumpyruvat | 55,00 | |
| Tymidin | 0,365 |