HROG06 T0 M2 Celler

800,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300883

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Tredjepartsavtale

Beskrivelse	HROG06 T0 M2 er en primær human glioblastoma multiforme (GBM) cellelinje etablert fra ferskt resektert tumorvev fra en voksen pasient diagnostisert med WHO grad IV glioblastoma. Betegnelsen «T0» indikerer at tumorprøven ble hentet ved den første kirurgiske inngrepet, mens «M2» refererer til den andre uavhengig genererte in vitro-modellen avledet fra samme primære tumor. Cellelinjen ble utviklet innenfor HROG-plattformen (Hansestadt Rostock Glioma), som fokuserer på å generere gliomkulturer med ultralav passasje som bevarer de biologiske og molekylære egenskapene til den opprinnelige pasienttumoren. HROG06 T0 M2 vokser vedheftende under standardiserte dyrkningsforhold og viser en spindelformet, fibroblastlignende morfologi som er typisk for primære GBM-kulturer. Immunofenotypiske analyser på tvers av HROG-serien viser uttrykk for nevrale og gliale linjemarkører som glial fibrillary acidic protein (GFAP), nestin og vimentin, noe som støtter astrocyttisk tumoropprinnelse. Molekylær karakterisering innenfor HROG-plattformen inkluderer vurdering av klinisk relevante biomarkører som MGMT-promotor-metyleringsstatus, EGFR-amplifikasjon og mutasjonsprofilering av gener, inkludert TP53, IDH1/2, KRAS og BRAF, noe som bekrefter bevaring av tumorassosierte genomiske endringer i tidlige passasjekulturer. HROG06 T0 M2 har blitt brukt til in vitro-evaluering av terapeutiske responser på standardbehandlinger for glioblastom, inkludert alkylerende kjemoterapeutiske midler, samt målrettede inhibitorer. Sammenlignende analyser innenfor HROG-samlingen indikerer stabil morfologi, reproduserbar vekstkinetikk og konsistente legemiddelfølsomhetsprofiler i tidlige passasjer, noe som støtter dens egnethet som en translasjonell forskningsmodell. Som en pasientavledet GBM-cellelinje med lav passasje, gir HROG06 T0 M2 en klinisk relevant plattform for å studere glioblastombiologi, tumorheterogenitet og mekanismer for behandlingsresistens.
Organisme	Menneskelig
Vev	Hjerne
Sykdom	Glioblastom

Etnisitet	Kaukasisk
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	HROG06 T0 M2 (Cytion-katalognummer 300883)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_B7FP
Innskyter	M. Linnebacher

Kulturmedium	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Kosttilskudd	Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	Ingen
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Vær oppmerksom på at denne cellelinjen ikke er tilgjengelig under en standard Cytion MTA, da den krever en tredjepartsavtale og/eller er gjenstand for forhandlinger med den opprinnelige lisensgiveren.

HROG06 T0 M2 Celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Tredjepartsavtale