Wilms11 šūnas

800,00 €*

Produkti tiek piegādāti sasaldēti sausā ledū kriotubās. Katra kriotuba parasti satur 3 × 10 ⁶ šūnas adhezīvām līnijām vai 5 × 10⁶ šūnas suspensijas līnijām (sīkāka informācija atrodama partijas CoA).

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

cryovial

Produkta numurs: 300420

Drošības datu lapa

Produkta lapa

Analīzes sertifikāts (CoA)

Materiālu nodošanas līgums

Apraksts	Wilms11 šūnu līnija tika iegūta no primārā Wilms audzēja (nefroblastomas) pediatriskā pacientā. Atšķirībā no daudzām citām Vilmsa audzēja šūnu līnijām Wilms11 ir raksturīga savvaļas tipa WT1 klātbūtne, t. i., tajā nav WT1 gēna mutāciju, kas parasti ir saistītas ar agresīvākiem vai stromas fenotipiem raksturīgiem Vilmsa audzējiem. Tomēr Wilms11 audzējs uzrādīja ievērojamu stromālo diferenciāciju ar lieliem rabdomiomatozas diferenciācijas apgabaliem, kas liecina par mezenhimāliem elementiem audzējā. Savvaļas tipa WT1 klātbūtne kopā ar audzēja stromālo diferenciāciju nodrošina unikālu modeli, lai izprastu Vilmsa audzēja bioloģiju gadījumos, kad WT1 mutācijas nav konstatētas. Wilms11 ģenētiskie pētījumi liecina, ka šai šūnu līnijai ir audzējam raksturīga mutācija CTNNB1 gēnā, kas kodē β-katenīnu, kuram ir izšķiroša nozīme Wnt signalizācijas ceļā. Wilms11 gadījumā šī mutācija ietekmē 45. serīnu, kas ir galvenā fosforilēšanas vieta β-Catenin noārdīšanās procesā. CTNNB1 mutācijas rezultātā β-Catenin stabilizējas, kā rezultātā tas uzkrājas un konstitīvi aktivizējas Wnt signalizācijas ceļš, kas ir šūnu proliferācijas un audzēju rašanās virzītājspēks. Tas padara Wilms11 par svarīgu modeli, lai pētītu mijiedarbību starp Wnt signalizāciju un Wilms audzēja attīstību, īpaši gadījumos, kad WT1 paliek neskarts. Wilms11 proteomikas analīzes ir atklājušas vairāku receptoru tirozīna kināžu (RTK), tostarp PDGFRβ un AXL, aktivizāciju, kas veicina audzēja šūnu augšanu un izdzīvošanu. Wilms11 šūnās ir aktivizēti arī tādi pakārtotie signalizācijas ceļi kā MAPK un PI3K/AKT ceļi, kas veicina to audzēja uzvedību. Wilms11 šūnu spēja veikt mezenhimālo diferenciāciju, jo īpaši rabdomiomatozo diferenciāciju, izceļ to potenciālu kā modeļa Vilmsa audzēja mezenhimālo komponentu izpētei. Kopumā Wilms11 kalpo kā vērtīgs instruments, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas nosaka Wilms audzēju rašanos, ja nav WT1 mutāciju, bet Wnt ceļa aktivizācijas kontekstā.
Organisms	Cilvēks
Audu	Nieres
Slimība	Vilmsa audzējs
Pieteikumi	In vitro šūnu kultūras modelis. Bioķīmiskie pētījumi

Vecums	22 mēneši
Dzimums	Vīrieši
Etniskā piederība	Kaukāzietis
Morfoloģija	Vārpstas formas
Šūnas tips	Vilmsa šūnas
Augšanas īpašības	Adherent

Citāts	Wilms11 (Cytion kataloga numurs 300420)
Bioloģiskās drošības līmenis	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SM

Mutaciju profils	WT1 mutācijas stāvoklis: homozigotiska WT1 c.901c>T, p.R301x. LOH: . CTNNB1 mutācijas statuss: savvaļas tips

Kultūras barotne	MSCGM komplekts (no Lonza)
Disociācijas reaģents	Accutase
Subkultivēšana	Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Vidēja sasaldēšanas pakāpe	Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Šūnu atkausēšana un kultivēšana	Pārliecinieties, ka pēc piegādes flakons paliek dziļi sasaldēts, jo šūnas tiek sūtītas uz sausā ledus, lai pārvadāšanas laikā saglabātu optimālu temperatūru. Pēc saņemšanas vai nu nekavējoties uzglabāt kriovialu temperatūrā, kas zemāka par -150 °C, lai nodrošinātu šūnu integritātes saglabāšanu, vai arī turpināt 3. posmu, ja nepieciešama tūlītēja kultivēšana. Tūlītējas kultivēšanas gadījumā ātri atkausējiet flakonu, iegremdējot to 37°C ūdens vannā ar tīru ūdeni un antibakteriālu līdzekli, viegli maisot 40-60 sekundes, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Visas turpmākās darbības veiciet sterilos apstākļos plūsmas nosūcējā, pirms atvēršanas dezinficējot kriovialu ar 70% etanolu. Uzmanīgi atveriet dezinficēto flakonu un pārnesiet šūnu suspensiju 15 ml centrifūgas mēģenē, kurā ir 8 ml istabas temperatūras barotnes, uzmanīgi samaisot. Centrifugējiet maisījumu ar 300 x g 3 minūtes, lai atdalītu šūnas, un uzmanīgi izmetiet virskārtu, kas satur saldēšanas barotnes atlikumus. Viegli resuspendēt šūnu granulas 10 ml svaigas barotnes. Adhēzijas šūnu gadījumā suspensiju sadalīt divās T25 kolbās; suspensijas kultūrām visu barotni pārnest vienā T25 kolbā, lai veicinātu efektīvu šūnu mijiedarbību un augšanu. Ievērojiet noteiktos subkultūru protokolus, lai nodrošinātu nepārtrauktu šūnu līnijas augšanu un uzturēšanu, tādējādi nodrošinot uzticamus eksperimentu rezultātus.
Inkubācijas atmosfēra	37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.
Flakona pārklājums	Neviens
Sasaldēšanas procedūra	Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
Nosūtīšanas nosacījumi	Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
Uzglabāšanas apstākļi	Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Sterilitāte	Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes. Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Partijas numurs	Sertifikāta veids	Datums	Kataloga numurs
300420-221	Analīzes sertifikāts	23. May. 2025	300420
300420-240226	Analīzes sertifikāts	25. Mar. 2026	300420

Ja plānojat izmantot Cytion šūnu līnijas tikai iekšējiem pētījumiem vienā pētniecības vietā, lūdzu, aizpildiet un parakstiet mūsu Materiālu nodošanas līgumu (MTA) un iesniedziet to kopā ar savu pasūtījumu.

Jebkādiem komerciāliem mērķiem, tostarp, bet ne tikai, maksas pakalpojumiem, kvalitātes kontroles testēšanai, produktu laišanai tirgū, diagnostikai vai regulatīviem pētījumiem, lūdzu, aizpildiet paredzētās izmantošanas veidlapu, lai mēs varētu sagatavot jūsu projektam piemērotu līgumu.

Lūdzu, ņemiet vērā: MTA attiecas tikai uz noteiktām šūnu līnijām. Ja šis paziņojums un MTA dokuments ir redzams produkta lapā, līgums ir piemērojams. Šūnu līnijām, uz kurām neattiecas MTA, atsauce uz līgumu netiks parādīta. MTA nav spēkā klientiem Amerikas kontinentā, Ķīnā vai Taivānā. Lūdzu, sazinieties ar mūsu ASV pārstāvniecību, lai saņemtu atbilstošo līgumu.

Wilms11 šūnas

Vispārīga informācija

Raksturojums

Normatīvie dati

Biomolekulārie dati

Darbs ar

Kvalitātes kontrole / Ģenētiskais profils / HLA

Analīzes sertifikāts (CoA)

Materiālu nodošanas līgums