Wilms10M šūnas
800,00 €*
Produkti tiek piegādāti sasaldēti sausā ledū kriotubās. Katra kriotuba parasti satur 3 × 10 6 šūnas adhezīvām līnijām vai 5 × 106 šūnas suspensijas līnijām (sīkāka informācija atrodama partijas CoA).
Vispārīga informācija
| Apraksts | Wilms10M šūnu līnija tika iegūta no metastātiska plaušu mezgliņa pacientam ar Wilms audzēju (nefroblastomu). Wilms10M šūnu līnijai, tāpat kā tās primārajam audzējam, Wilms10T, ir raksturīga homozigotiska WT1 gēna delecija, kā rezultātā WT1 proteīns pilnībā nav sastopams. WT1 ir būtisks normālai nieru attīstībai, un tā izdzēšana ir saistīta ar agresīvāku audzēja uzvedību, jo īpaši metastātiskā vidē. Turklāt Wilms10M šūnām piemīt heterozigotiskuma zudums (LOH) 11p15 hromosomu apgabalā, kas ietver IGF2 gēnu, kas vēl vairāk veicina šo šūnu ļaundabīgās īpašības. Wilms10M šūnas saglabā stabilu kariotipu bez būtiskām hromosomu pārkārtojumiem, izņemot specifisku WT1 reģiona izdzēšanu. Šī šūnu līnija, kas iegūta no metastātiskiem audiem, ir īpaši vērtīga, lai pētītu molekulāros mehānismus, kas izraisa metastāzes Vilmsa audzējā. Šīm šūnām piemīt mezenhimālas īpašības, tās ekspresē tādus marķierus kā vimentīns, bet tām nav epitēlija marķieru, piemēram, citokeratīna, kas norāda uz to izcelsmi no audzēja stromālā komponenta. Wilms10M pētījumos galvenā uzmanība ir pievērsta signalizācijas ceļiem, kas ir aktīvi šajās metastātiskajās šūnās. Proteomiskās analīzes ir pierādījušas vairāku receptoru tirozīna kināžu (RTK), tostarp IGF1R, PDGFRβ un AXL, aktivizāciju, kas veicina šūnu izdzīvošanu, proliferāciju un metastātisko potenciālu. Aktivizējas arī pakārtotie MAPK un PI3K/AKT signalizācijas ceļi, kam ir būtiska nozīme Wilms10M šūnu invazīvā un metastātiskā fenotipa uzturēšanā. Ņemot vērā Wilms10M metastātisko izcelsmi, tā ir būtisks modelis, lai izprastu molekulārās norises, kas ir Wilms audzēja metastāžu pamatā, un lai izstrādātu mērķtiecīgas terapeitiskās stratēģijas metastātisku slimību ārstēšanai. |
|---|---|
| Organisms | Cilvēks |
| Audu | Nieres |
| Slimība | Vilmsa audzējs |
| Pieteikumi | In vitro šūnu kultūras modelis. Bioķīmiskie pētījumi |
| Sinonīmi | Wilms10 |
Raksturojums
| Vecums | 2 gadi |
|---|---|
| Dzimums | Sievietes |
| Etniskā piederība | Kaukāzietis |
| Morfoloģija | Vārpstas formas |
| Šūnas tips | Vilmsa šūnas |
| Augšanas īpašības | Adherent |
Normatīvie dati
| Citāts | Wilms10M (Cytion kataloga numurs 300418) |
|---|---|
| Bioloģiskās drošības līmenis | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SL |
Biomolekulārie dati
| Mutaciju profils | WT1 mutācijas statuss: homozigotiska del WT1 del11p13. LOH: nav 11p13, bet UPD 11p15. CTNNB1 mutācijas statuss: homozigotiska del TCT, p.DS45, UPD 3p |
|---|
Darbs ar
| Kultūras barotne | MSCGM komplekts (no Lonza) |
|---|---|
| Disociācijas reaģents | Accutase |
| Subkultivēšana | Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne. |
| Vidēja sasaldēšanas pakāpe | Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu. |
| Šūnu atkausēšana un kultivēšana |
|
| Inkubācijas atmosfēra | 37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra. |
| Flakona pārklājums | Neviens |
| Sasaldēšanas procedūra | Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu. |
| Nosūtīšanas nosacījumi | Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu. |
| Uzglabāšanas apstākļi | Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli. |
Kvalitātes kontrole / Ģenētiskais profils / HLA
| Sterilitāte | Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes. Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda. |
|---|
Analīzes sertifikāts (CoA)
| Partijas numurs | Sertifikāta veids | Datums | Kataloga numurs |
|---|---|---|---|
| 300418-030325 | Analīzes sertifikāts | 26. May. 2025 | 300418 |
| 300418-110324 | Analīzes sertifikāts | 23. May. 2025 | 300418 |
Materiālu nodošanas līgums
Ja plānojat izmantot Cytion šūnu līnijas tikai iekšējiem pētījumiem vienā pētniecības vietā, lūdzu, aizpildiet un parakstiet mūsu Materiālu nodošanas līgumu (MTA) un iesniedziet to kopā ar savu pasūtījumu.
Jebkādiem komerciāliem mērķiem, tostarp, bet ne tikai, maksas pakalpojumiem, kvalitātes kontroles testēšanai, produktu laišanai tirgū, diagnostikai vai regulatīviem pētījumiem, lūdzu, aizpildiet paredzētās izmantošanas veidlapu, lai mēs varētu sagatavot jūsu projektam piemērotu līgumu.
Lūdzu, ņemiet vērā: MTA attiecas tikai uz noteiktām šūnu līnijām. Ja šis paziņojums un MTA dokuments ir redzams produkta lapā, līgums ir piemērojams. Šūnu līnijām, uz kurām neattiecas MTA, atsauce uz līgumu netiks parādīta. MTA nav spēkā klientiem Amerikas kontinentā, Ķīnā vai Taivānā. Lūdzu, sazinieties ar mūsu ASV pārstāvniecību, lai saņemtu atbilstošo līgumu.