Caco-2 šūnas
430,00 €*
Produkti tiek piegādāti sasaldēti sausā ledū kriotubās. Katra kriotuba parasti satur 3 × 10 6 šūnas adhezīvām līnijām vai 5 × 106 šūnas suspensijas līnijām (sīkāka informācija atrodama partijas CoA).
Ievads par Caco-2 šūnām
| Apraksts | Caco-2 šūnas kalpo kā moderns cilvēka zarnu barjeras in vitro modelis, galvenokārt tāpēc, ka tās diferencējas šūnu monoslānī, kas ir ļoti līdzīgs tievo zarnu gļotādas enterocytiem. Kultivējot Caco-2 šūnu līniju uz audu kultūru filtru ieliktņiem ar polikarbonāta filtriem, Caco-2 šūnas spontāni diferencējas. Caco2 šūnu diferenciācijas rezultātā veidojas specializēti šūnu tipi ar mikrovilielām, enzīmiem un transportētājiem, kas atbilst sarežģītām iezīmēm un mehānismiem, kas sastopami in vivo apstākļos. Saistībā ar zarnu absorbcijas pētījumu modeļiem Caco-2 šūnas, kas iegūtas no cilvēka kolorektālās adenokarcinomas pacienta, ir ļoti noderīgas, jo tās spēj sasniegt augstas TEER vērtības, kas liecina par neskartiem hermētiskiem savienojumiem un epitēlija barjeras funkciju. Šīs īpašības ir ļoti svarīgas tādiem testiem kā holesterīna izplūdes tests un pētījumi par šūnu transportu, tostarp lipīdu nanodaļiņu kustību un proteīnu mijiedarbības noteikšanu. Caco-2 šūnas ir ļoti svarīgas zarnu uzsūkšanās pētījumos, jo tās nodrošina uzticamu zarnu epitēlija in vitro tuvinājumu. Imitējot zarnu enterocītus, šīs šūnas atvieglo zāļu absorbcijas analīzi iekšķīgi, imitējot zarnu barjeru. Pētnieki izmanto Caco-2 šūnas, lai prognozētu, kā vielas šķērso zarnu gļotādu, kas ir būtiski perorāli lietojamo zāļu farmakokinētiskajai profilēšanai. Turklāt tās ir galvenais rīks holesterīna uzņemšanas, homeostāzes un transportēšanas pētniecībā zarnās, kas ir būtiski procesi, lai izprastu lipīdu metabolismu un ar to saistītās slimības. Caco-2 šūnas joprojām ir stūrakmens resnās zarnas karcinomas un toksikoloģijas pētījumos ne tikai tāpēc, ka tās ir nozīmīgas cilvēka kuņģa un zarnu trakta pētījumos, bet arī tāpēc, ka tās sniedz detalizētu ieskatu par žultsceļu, ksenobiotiku metabolismu resnajā zarnā, vēža un toksikoloģijas pētījumos. |
|---|---|
| Organisms | Cilvēks |
| Audu | Resnās zarnas |
| Slimība | Adenokarcinoma |
| Pieteikumi | Kuņģa un zarnu trakta modelis, transepiteliālās/endotēlija elektriskās pretestības (TEER) mērīšana. Caco-2 šūnām ir augstas TEER vērtības līdz pat 2000 cm2 (izmērīts ar CLS, izmantojot CellZscope, nanoAnalytics, Minstere, Vācija). |
| Sinonīmi | CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco2, Cacoo-II |
Sīkāka informācija
| Vecums | 72 gadi |
|---|---|
| Dzimums | Vīrieši |
| Etniskā piederība | Kaukāzietis |
| Morfoloģija | Epitēlijveidīgs |
| Augšanas īpašības | Adherent |
Dokumentācija
| Citāts | CaCo-2 (Cytion kataloga numurs 300137) |
|---|---|
| Bioloģiskās drošības līmenis | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0025 |
Caco-2 šūnu līnijas ģenētiskais sastāvs
| Izteiktie receptori | Termiski stabils enterotoksīns (Sta, E. coli), epidermālais augšanas faktors (EGF), retinoskābi saistošais proteīns I un retinolu saistošais proteīns II, keratīns pozitīvs. |
|---|---|
| Antigēna ekspresija | O asinsgrupa, Rh+, HLA II klase negatīva |
| Izolenzīmi | Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B. |
| Tumorigēnas | Jā, kailām pelēm. Veidojas vidēji labi diferencētas adenokarcinomas, kas atbilst kolīta primārajām (II pakāpes) |
| Izturība pret vīrusiem | Cilvēka imūndeficīta vīruss (HIV, LAV) |
| Ploidijas statuss | (P14), hipertetraploīds |
| MSI statuss | Stabils (MSS) |
Darbs ar
| Kultūras barotne | EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a) |
|---|---|
| Papildinājumi | Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA |
| Disociācijas reaģents | Accutase |
| Dubultošanās laiks | 60 līdz 70 stundas |
| Subkultivēšana | Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne. |
| Sēšanas blīvums | 1 x 104 šūnas/cm2 radīs 90 % konfluentu monoslāni aptuveni 4 dienu laikā. |
| Atjaunošanās pēc atkušņa | Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas. |
| Vidēja sasaldēšanas pakāpe | Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu. |
| Šūnu atkausēšana un kultivēšana |
|
| Inkubācijas atmosfēra | 37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra. |
| Flakona pārklājums | Optimālai piestiprināšanai un dzīvotspējai pēc atkausēšanas ieteicams izmantot ar kolagēnu pārklātas kolbas vai plates. |
| Sasaldēšanas procedūra | Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu. |
| Nosūtīšanas nosacījumi | Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu. |
| Uzglabāšanas apstākļi | Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli. |
Kvalitātes kontrole
| Sterilitāte | Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes. Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda. |
|---|---|
| HLA alēles |
A*: '02:01:01
B*: '15:01:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:04:01
DQA1*: '03:01:01
DQB1*: '03:02:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:03:02
|
Analīzes sertifikāts (CoA)
| Partijas numurs | Sertifikāta veids | Datums | Kataloga numurs |
|---|---|---|---|
| 300137-170625 | Analīzes sertifikāts | 18. Aug. 2025 | 300137 |
| 300137-220424 | Analīzes sertifikāts | 23. May. 2025 | 300137 |
Materiālu nodošanas līgums
Ja plānojat izmantot Cytion šūnu līnijas tikai iekšējiem pētījumiem vienā pētniecības vietā, lūdzu, aizpildiet un parakstiet mūsu Materiālu nodošanas līgumu (MTA) un iesniedziet to kopā ar savu pasūtījumu.
Jebkādiem komerciāliem mērķiem, tostarp, bet ne tikai, maksas pakalpojumiem, kvalitātes kontroles testēšanai, produktu laišanai tirgū, diagnostikai vai regulatīviem pētījumiem, lūdzu, aizpildiet paredzētās izmantošanas veidlapu, lai mēs varētu sagatavot jūsu projektam piemērotu līgumu.
Lūdzu, ņemiet vērā: MTA attiecas tikai uz noteiktām šūnu līnijām. Ja šis paziņojums un MTA dokuments ir redzams produkta lapā, līgums ir piemērojams. Šūnu līnijām, uz kurām neattiecas MTA, atsauce uz līgumu netiks parādīta. MTA nav spēkā klientiem Amerikas kontinentā, Ķīnā vai Taivānā. Lūdzu, sazinieties ar mūsu ASV pārstāvniecību, lai saņemtu atbilstošo līgumu.