Capire il "numero di passaggio"

Il concetto di "numero di passaggio" è centrale nella coltura cellulare e si riferisce al numero di volte in cui una linea cellulare è stata sottocoltivata o trasferita in un nuovo terreno di coltura dopo il suo iniziale risveglio dalla crioconservazione o dal ricevimento da una banca di cellule di riferimento. Questa metrica è fondamentale per tracciare il lignaggio e la storia di una coltura cellulare.

Panoramica del processo

• Nella pratica delle colture cellulari di routine, quando le cellule raggiungono una certa densità, vengono trasferite in un nuovo terreno di coltura per sostenere la crescita e prevenire un'eccessiva influenza. Ogni trasferimento di questo tipo viene registrato come passaggio.
• Tradizionalmente, quando ricevevamo una linea cellulare, ad esempio, al passaggio 60 dal depositante, continuavamo a partire da questo numero di passaggio, aumentando con ogni sottocoltura. Questa pratica, pur mantenendo un filo conduttore storico, portava spesso a numeri di passaggio elevati fin dall'inizio. Dato l'uso esteso e spesso pluridecennale di alcune linee cellulari, come la linea HeLa creata nel 1951, non è possibile determinare il numero totale di passaggi dall'inizio della linea cellulare.
• Per migliorare la chiarezza e la qualità dei nostri processi di coltura cellulare, abbiamo rivisto questo approccio all'inizio del 2023. Ora, quando iniziamo una coltura da una nuova fiala, indipendentemente dal numero di passaggio del depositante, azzeriamo e ricominciamo il conteggio dal primo passaggio per ogni lotto prodotto

Motivazione

Il passaggio è una procedura fondamentale per garantire la salute e l'utilità delle colture cellulari per la ricerca. Quando le cellule crescono eccessivamente, subiscono un'inibizione da contatto, riducendo il loro tasso di proliferazione, che può influire negativamente sui risultati sperimentali. Per attenuare questi problemi, Cytion attua controlli rigorosi sulle densità cellulari a cui avviene la subcoltura, mantenendo così un basso numero di passaggi durante la produzione delle sue linee cellulari. Questa precauzione aiuta a prevenire gli effetti negativi di un eccessivo passaggio, come le anomalie morfologiche, le variazioni del tasso di crescita e la deriva genetica, che possono far sì che le cellule differiscano notevolmente dal loro stato originale. Periodi prolungati di subcoltura possono inoltre aumentare il rischio di contaminazione microbica.

La nostra promessa

Garantiamo che le cellule fornite ai ricercatori siano il più possibile simili al patrimonio genetico e alle caratteristiche fenotipiche originali, migliorando l'affidabilità dei dati sperimentali. Inoltre, documentando meticolosamente ogni passaggio, Cytion contribuisce alla tracciabilità e alla riproducibilità della ricerca, un impegno che riflette gli elevati standard di pratica della coltura cellulare. I ricercatori sono incoraggiati a mantenere una registrazione accurata dei numeri di passaggio, sia sui recipienti di coltura che nei loro quaderni di laboratorio, come riferimento per la salute e la storia delle loro colture cellulari.