Cellule 4T1 - Approfondimenti fondamentali sulla ricerca e le applicazioni relative alle cellule del cancro al seno
La 4T1 è una linea cellulare murina di cancro al seno trapiantabile. È ampiamente utilizzata come modello tumorale in vitro geneticamente identico per lo studio del cancro al seno umano. Le cellule 4T1 sono altamente invasive e tumorigeniche; tendono a metastatizzare dal sito tumorale primario nella ghiandola mammaria ad altri siti, tra cui fegato, linfonodi, polmoni, ossa e cervello, risultando quindi ideali per lo studio delle metastasi del cancro al seno [1].
- Terreno di coltura
- Per la coltura delle cellule 4T1 si utilizza il terreno RPMI 1640. Al terreno di coltura vengono aggiunti siero fetale bovino (FBS) al 10%, 2,0 g/L di NaHCO3 e 2,1 mM di glutammina stabile per garantire una crescita cellulare ottimale.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo medio di raddoppio della popolazione riportato per le cellule di cancro al seno 4T1 è di 14 ore.
- Tipo di crescita
- La 4T1 è una linea cellulare aderente.
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina 4T1
- Caratteristiche generali e origine delle cellule 4T1
- Informazioni sulla coltura della linea cellulare 4T1
- Linea cellulare T1: vantaggi e svantaggi
- Acquista la linea cellulare 4T1: modello di cancro al seno di alta qualità
- Linea cellulare T1: applicazioni nella ricerca sul cancro
- Cellule 4T1: pubblicazioni di ricerca
- Risorse per la linea cellulare 4T1: protocolli, video e altro
- Domande frequenti sulla linea cellulare 4T1
- Riferimenti
- Domande frequenti
Caratteristiche generali e origine delle cellule 4T1
Prima di lavorare con una linea cellulare, è fondamentale conoscerne l'origine e le caratteristiche generali. In questa sezione abbiamo riportato le informazioni di base sulle cellule di carcinoma mammario 4T1. Ad esempio, cosa sono le cellule 4T1? Quali sono le caratteristiche della linea cellulare 4T1? Qual è l'origine della linea cellulare 4T1? Qual è la morfologia della linea cellulare 4T1?
- La 4T1 è una linea cellulare tumorale mammaria derivante da un tumore mammario insorto spontaneamente nel ceppo di topi BALB/c. Queste cellule altamente invasive e tumorigeniche imitano da vicino il comportamento del carcinoma mammario umano in termini di crescita e diffusione metastatica. Nello specifico, il modello tumorale 4T1 studia il carcinoma mammario triplo negativo (TNBC).
- Le cellule 4T1 sono aderenti e presentano una morfologia simile a quella delle cellule epiteliali.
Linea cellulare 4T1 vs EMT-6
4T1 ed EMT-6 sono modelli cellulari murini non immunogenici per studi sul carcinoma mammario triplo negativo. In questo caso, le cellule 4T1 sono più aggressive e invasive rispetto alle cellule EMT-6, che presentano proprietà meno invasive [2].
Cellule 4T1 vs 4T07
Anche la 4T07 è una linea cellulare tumorale murina. La differenza principale tra le cellule 4T1 e 4T07 è che le cellule 4T1 possono lasciare il sito del tumore primario e diffondersi formando metastasi secondarie visibili, mentre le cellule 4T07 non possono formare metastasi visibili nonostante lascino il sito primario [3].
Informazioni sulla coltura della linea cellulare 4T1
La linea cellulare 4T1 del cancro al seno offre ampie applicazioni di ricerca nel campo biomedico. Per la coltura di queste cellule, è necessario prendere in considerazione i seguenti punti chiave: qual è il tempo di raddoppio delle cellule 4T1? Come vengono coltivate le cellule 4T1? Qual è la densità di semina cellulare per le cellule 4T1?
Punti chiave per la coltura delle cellule 4T1
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio medio della popolazione riportato per le cellule di carcinoma mammario 4T1 è di 14 ore.
Aderenzi o in sospensione:
La 4T1 è una linea cellulare aderente.
Rapporto di subcoltura:
Per la linea cellulare 4T1 del carcinoma mammario triplo negativo si raccomanda un rapporto di divisione di 1:6 e 1:8. Per la divisione, le cellule vengono risciacquate con PBS e incubate con l'enzima Accutase per 8-10 minuti. Le cellule dissociate vengono raccolte mediante centrifugazione e risospese in un mezzo fresco. Le cellule risospese vengono trasferite in una nuova fiasca per la crescita.
Terreno di coltura:
Per la coltura delle cellule 4T1 si utilizza il terreno RPMI 1640. Al terreno di coltura vengono aggiunti siero fetale bovino (FBS) al 10%, 2,0 g/L di NaHCO3 e 2,1 mM di glutammina stabile per una crescita cellulare ottimale.
Condizioni di crescita:
Le cellule tumorali 4T1 vengono mantenute in un incubatore umidificato a 37 °C con un apporto di CO2 al 5%.
Conservazione:
Le cellule 4T1 devono essere conservate a una temperatura inferiore a -150 °C, ad esempio in un congelatore elettrico o in fase vapore di azoto liquido, per mantenere la vitalità cellulare.
Processo di congelamento e terreno:
Per la linea cellulare 4T1 si raccomandano CM-1 o CM-ACF. È preferibile un metodo di congelamento lento, poiché protegge la vitalità cellulare consentendo un abbassamento graduale della temperatura di 1 °C.
Processo di scongelamento:
La fiala contenente le cellule congelate viene tenuta in un bagno d'acqua a 37 °C per alcuni secondi fino a quando le cellule si scongelano e rimane solo un piccolo grumo di ghiaccio. Queste cellule vengono risospese nel terreno fresco e versate nel pallone per la coltura. Dopo 24 ore di incubazione, il terreno viene sostituito per rimuovere i componenti del terreno di congelamento.
Livello di biosicurezza:
Per la coltura delle cellule di cancro al seno 4T1 si raccomanda un laboratorio di livello di biosicurezza 1.
Linea cellulare T1: vantaggi e svantaggi
Questa sezione dell'articolo tratterà i vantaggi e gli svantaggi associati al modello metastatico 4T1.
Vantaggi
I principali vantaggi della linea cellulare 4T1 sono:
- Tumorigenicità:
La 4T1 è una linea cellulare altamente tumorigenica. Queste cellule hanno la capacità di formare un modello murino singeneico 4T1 per lo studio del cancro al seno quando vengono iniettate in un topo. Pertanto, il modello 4T1 è ideale per studiare lo sviluppo, la crescita e la metastasi del tumore. Inoltre, è utile per lo screening e la valutazione dei farmaci terapeutici.
- Modello metastatico in vitro:
Il modello 4T1 presenta una naturale tendenza alla metastasi che consente ai ricercatori di indagare efficacemente i meccanismi e i percorsi sottostanti coinvolti nel processo di metastasi. Inoltre, le cellule 4T1 sono resistenti alla 6-tioguanina. Ciò contribuisce a un rilevamento efficiente delle cellule micrometastatiche con una maggiore accuratezza rispetto ad altri modelli, poiché elimina la necessità di pesare gli organi bersaglio e contare i noduli.
Svantaggi
Lo svantaggio associato alla linea cellulare 4T1 è:
- Aggressività/rapido tasso di crescita:
La linea cellulare 4T1 è una linea cellulare di carcinoma mammario triplo negativo altamente aggressiva. A causa del rapido tasso di crescita, l'utilizzo di questa linea cellulare in esperimenti a lungo termine e il controllo delle variabili sperimentali diventano difficili.
Acquista la linea cellulare 4T1: un modello di alta qualità per il cancro al seno
Linea cellulare 4T1: applicazioni nella ricerca sul cancro
La linea cellulare del modello murino 4T1 è un prezioso strumento di ricerca per lo studio della biologia del cancro e la valutazione di nuovi trattamenti. Di seguito sono elencate le principali applicazioni delle cellule 4T1:
Biologia del cancro
La linea cellulare 4T1 è ampiamente utilizzata per studiare lo sviluppo e la crescita del cancro. Si tratta di un modello in vitro ideale per indagare ed esplorare i diversi meccanismi cellulari e molecolari coinvolti nella progressione tumorale e nelle metastasi. Inoltre, può svelare il ruolo delle vie di segnalazione cellulare, del microambiente e dell'espressione genica in questi processi. Una ricerca condotta nel 2019 ha utilizzato le cellule 4T1 per scoprire i meccanismi alla base dell'invasione e della migrazione delle cellule tumorali. I risultati hanno rivelato che sono coinvolti i geni STAT3, MMP2 e MMP9 e che l'inibizione di questi geni può limitare notevolmente la migrazione e l'invasione delle cellule tumorali [4]. Studi simili hanno anche indicato diverse altre vie di segnalazione coinvolte nello sviluppo del tumore e nelle metastasi.
Inoltre, il modello 4T1 è fondamentale per comprendere il microambiente del cancro al seno, compresa l'infiltrazione delle cellule immunitarie e la crescita del tumore primario. Gli studi incentrati sul microambiente tumorale 4T1 hanno fornito importanti informazioni sul ruolo delle cellule immunitarie e delle citochine, come l'espressione di CXCL13, nella progressione del tumore. Il modello aiuta anche a studiare le nicchie metastatiche e le metastasi tumorali, in particolare nel cancro al seno in stadio avanzato, dove è prevalente la colonizzazione del carcinoma mammario.
Ricerca sulla terapia del cancro
La linea cellulare 4T1 è ampiamente utilizzata nella ricerca sulla terapia del cancro per lo screening e la valutazione di nuovi trattamenti. Uno studio ha esplorato il potenziale citotossico delle nanoparticelle di ferro sintetizzate in modo ecologico dall'estratto di rosmarino (Rosemary-FeNPs) e dell'estratto puro di rosmarino sulla linea cellulare 4T1. I risultati della ricerca hanno suggerito che le Rosemary-FeNPs sono più promettenti dell'estratto puro [5]. Analogamente, uno studio condotto nel 2021 ha esaminato il potenziale antitumorale dell'estratto di zenzero nelle cellule di carcinoma mammario 4T1 e in un modello murino 4T1 [6].
Oltre agli estratti naturali, la linea cellulare 4T1 viene utilizzata per valutare l'efficacia degli agenti chemioterapici tradizionali. Ad esempio, la ricerca che ha coinvolto la combinazione del cisplatino con altre terapie ha dimostrato una maggiore morte delle cellule tumorali e una ridotta progressione del tumore nel modello 4T1. L'introduzione della luciferasi di lucciola nelle cellule 4T1 ha consentito l'imaging in tempo reale della crescita tumorale e del fenotipo metastatico, rendendo più facile valutare l'impatto dei vari trattamenti.
Inoltre, la resistenza della linea cellulare 4T1 alla 6-tioguanina ha facilitato gli studi sulle cellule micro-metastatiche, migliorando l'individuazione e l'analisi delle metastasi. Questa linea cellulare svolge inoltre un ruolo cruciale nello studio dell'immunità antitumorale e degli effetti dell'immunoterapia, in particolare nel contesto dei modelli murini ortotopici, in cui i ricercatori possono riprodurre fedelmente i tumori umani.
Nel complesso, la linea cellulare 4T1 rimane uno strumento indispensabile nella ricerca oncologica, dalla comprensione dei meccanismi fondamentali della biologia del cancro allo sviluppo e alla sperimentazione di nuove strategie terapeutiche.
Cellule 4T1: Pubblicazioni di ricerca
Questa sezione dell'articolo tratterà alcune pubblicazioni interessanti e più citate sulle cellule 4T1.
Questo articolo è stato pubblicato nel 2018 sul Journal of Photochemistry and Photobiology. La ricerca ha ipotizzato che le nanoparticelle d'argento sintetizzate da Madhuca longifolia esercitino un effetto antiproliferativo nelle cellule tumorali 4T1 attraverso la degradazione della parete cellulare e la generazione di ROS.
Cytotoxicità ed effetti apoptotici del verbascoside sulla linea cellulare 4T1 del cancro al seno
Questo studio, pubblicato sulla rivista BMC Pharmacology and Toxicology (2021), ha suggerito che il verbascoside, un composto naturale, induca effetti apoptotici nelle cellule tumorali mammarie 4T1 attraverso la segnalazione TLR4.
Questa ricerca è stata pubblicata su Integrative Cancer Therapies nel 2020. Lo studio ha utilizzato cellule 4T1 per sviluppare un modello murino singeneico 4T1 e ha esplorato il potenziale antitumorale dell'eupatorina utilizzando tale modello. L'eupatorina ha ritardato lo sviluppo del tumore nel modello murino 4T1.
Questa ricerca, pubblicata sull'Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018), ha suggerito che un'erba medicinale, la Viola odorata, abbia potenziali effetti citotossici sulle cellule 4T1.
Questo studio ha suggerito che le nanoparticelle lipidiche solide caricate con docetaxel (SLN caricate con DTX) possono essere un agente promettente per il trattamento del cancro al seno e la prevenzione delle metastasi, poiché limitano la crescita del cancro e le metastasi polmonari delle cellule 4T1.
Risorse per la linea cellulare 4T1: protocolli, video e altro
Di seguito sono riportate alcune risorse sulle cellule 4T1:
- Tutorial sulla trasfezione delle cellule 4T1: questo video è una guida passo passo per eseguire la trasfezione della linea cellulare 4T1.
- Subcoltura di una linea cellulare: questo video spiega il protocollo di subcoltura per le linee cellulari aderenti.
Il seguente link contiene il protocollo di coltura cellulare per le cellule 4T1:
- Linea cellulare 4T1: questo link al sito web contiene tutte le informazioni utili relative alla gestione delle colture 4T1. Include informazioni sui terreni di coltura e sui protocolli di gestione per le colture crioconservate e quelle in proliferazione.
Domande frequenti sulla linea cellulare 4T1
Il blog 4T1 offre approfondimenti, aggiornamenti sulla ricerca e tecniche sperimentali relative alla linea cellulare 4T1 del carcinoma mammario, comunemente utilizzata negli studi sulla crescita e sulle metastasi del cancro al seno.
Le linee cellulari di carcinoma mammario, tra cui il modello 4T1, sono fondamentali per lo studio della crescita tumorale e delle metastasi, nonché dell'infiltrazione delle cellule immunitarie nel microambiente del cancro al seno.
L'espressione di CXCL13 è fondamentale nella ricerca sul cancro al seno, poiché è coinvolta nell'infiltrazione delle cellule immunitarie e nella formazione delle nicchie metastatiche, fornendo informazioni sulla progressione del tumore e sulle metastasi.
Il modello di tumore ghiandolare, come il modello 4T1, viene utilizzato per simulare il cancro al seno in stadio avanzato e la colonizzazione del carcinoma mammario, aiutando i ricercatori a comprendere la progressione della malattia e i potenziali trattamenti.
La crescita del tumore primario è un fattore fondamentale negli studi sulle metastasi tumorali, poiché costituisce la base per indagare il modo in cui i tumori si diffondono ad altri organi, come nel modello intraduttale del topo.
Il modello murino di carcinoma mammario 4T1 viene utilizzato per studiare l'immunità antitumorale, le terapie combinate con il cisplatino e la morte cellulare tumorale, offrendo una visione completa dell'efficacia del trattamento del carcinoma mammario.
I modelli murini ortotopici, tra cui il modello 4T1, sono fondamentali per lo studio del microambiente tumorale, della risposta immunitaria e delle metastasi in un contesto che riproduce fedelmente il carcinoma mammario umano.
Un modello 4T1 visualizzabile consente ai ricercatori di osservare in tempo reale la crescita del tumore e le metastasi, facilitando gli studi sulle metastasi ossee, sul volume dei tumori 4T1 e sull'efficacia di trattamenti come il cisplatino.
L'immunoterapia antitumorale agisce sulle nicchie metastatiche potenziando la capacità del sistema immunitario di combattere le cellule tumorali, spesso in combinazione con altri trattamenti come il cisplatino per migliorare l'efficacia complessiva.
La luciferasi di Firefly viene utilizzata nell'introduzione nelle cellule 4T1 per monitorare la crescita tumorale e il fenotipo metastatico, fornendo ai ricercatori un potente strumento per lo studio della progressione del cancro e degli interventi terapeutici.
Bibliografia
- Pulaski, B.A. e S. Ostrand-Rosenberg, Modello murino di tumore al seno 4T1. Curr Protoc Immunol, 2001. Capitolo 20: p. Unità 20.2.
- Maxwell, K.G., Immunomodulazione delle cellule tumorali mammarie per la vaccinazione tumorale totale. 2016.
- Walker, I., et al., I tumori mammari inducono l'espressione centrale di citochine pro-infiammatorie, ma non deficit comportamentali nei topi Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.
- Li, Y., et al., L'inibizione della via di segnalazione Stat3 da parte del prodotto naturale pectolinarigenina attenua le metastasi del cancro al seno. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., Sintesi verde di nanoparticelle di ferro mediante estratto di rosmarino e valutazione dell'effetto citotossico su linee cellulari tumorali. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: p. 54-62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Effetto dell'estratto di zenzero sulla linea cellulare di cancro al seno 4T1 nel topo Balb/c. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.