Cellule U87MG - La ricerca sul glioblastoma con U87MG e il suo impatto sugli studi sul cancro al cervello
U-87 MG, linea cellulare primaria di glioblastoma umano, è ampiamente utilizzata nella ricerca biologica. In particolare, queste cellule sono impiegate nei campi delle neuroscienze e dell'immuno-oncologia.
Caratteristiche generali e origine della linea cellulare U-87 MG
Questa sezione illustra l'origine e le caratteristiche generali della linea cellulare U87. Imparerete che cosa sono le cellule U-87 MG? Da dove provengono le cellule U87? Qual è la forma completa di U-87 MG? Quanto sono grandi le cellule U87? Qual è la morfologia della linea cellulare U87?
- La linea cellulare U87 è una linea cellulare di glioblastoma e astrocitoma. È stata creata nel 1966 presso l'Università di Uppsala. Le cellule sono state ottenute da un uomo caucasico di 44 anni affetto da glioblastoma. Questa linea cellulare è formalmente chiamata U 87 MG, acronimo di Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Le cellule U 87 MG presentano una morfologia simile alle cellule epiteliali.
- Le dimensioni delle cellule U 87 MG variano da 12 a 14 µm di diametro.
- Questa linea cellulare di glioblastoma umano è ipodiploide e possiede un numero modale di cromosomi pari a 44 in circa il 48% della popolazione cellulare. Tuttavia, esistono anche ploidie superiori nel 5,9% della popolazione cellulare.
Informazioni sulla coltura delle cellule U-87 MG
Prima di lavorare con le cellule U 87 MG, è necessario conoscere i seguenti punti chiave per la coltura di queste cellule di glioblastoma. In particolare, è necessario sapere Qual è il tempo di raddoppio della popolazione delle cellule U 87 MG? Quali sono i terreni di coltura utilizzati per le cellule U87? Qual è la densità di semina della linea cellulare U 87 MG?
Punti chiave per la coltura delle cellule U-87 MG
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Tempo di raddoppiamento della popolazione: |
Le cellule U 87 MG hanno un tempo di raddoppiamento della popolazione che varia da 18 a 38 ore. |
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Aderenti o in sospensione: |
U 87 MG è una linea cellulare aderente. Le cellule hanno una forma allungata e crescono come monostrati. |
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Densità di semina: |
Si raccomanda di seminare la linea cellulare di glioblastoma U 87 MG a una densità cellulare di 1 x104 cellule/cm2. Le cellule U87 aderenti vengono lavate con 1 x PBS e incubate con la soluzione di Accutase. Successivamente, le cellule dissociate vengono centrifugate e recuperate. Le cellule vengono accuratamente risospese e aggiunte in nuove fiasche contenenti terreno di coltura. |
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Terreno di crescita: |
La linea cellulare U 87 MG è coltivata in EMEM (terreno minimo essenziale di Eagle) aumentato con 1,0 g/L di L-glucosio, 2,0 mM di L-glutammina, 2,2 g/L di NaHCO3, 1% di NEAA, 1 mM di piruvato di sodio e 10% di FBS. Il terreno di coltura deve essere rinnovato ogni 2 o 3 giorni. |
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Condizioni di crescita: |
Le cellule U-87 MG richiedono un incubatore umidificato con un apporto di CO2 del 5% e una temperatura di 37°C per una crescita ottimale. |
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Conservazione: |
Le cellule U87 vengono conservate in fase vapore di azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150°C per mantenere la massima vitalità delle cellule di glioblastoma. |
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Processo e terreno di congelamento: |
I terreni di congelamento CM-1 o CM-ACF sono adatti per congelare le cellule U 87 MG. Si raccomanda un processo di congelamento lento per evitare che le cellule subiscano shock e per proteggere la vitalità cellulare. |
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Processo di scongelamento: |
Le fiale di linea cellulare U-87 MG congelate vengono scongelate in un bagno d'acqua a 37°C. Le cellule vengono aggiunte al terreno di crescita, risospese e distribuite per la coltura in nuove fiasche. Al contrario, le cellule U87 possono essere centrifugate per rimuovere il terreno di coltura e quindi coltivate. |
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Livello di biosicurezza: |
Il livello di biosicurezza 1 è richiesto per la manipolazione delle colture di cellule U 87 MG. |
Vantaggi e svantaggi delle cellule U-87 MG
Quando pensiamo a una linea cellulare, la prima cosa che ci viene in mente è: quali sono i vantaggi di utilizzare le cellule U-87 MG? Quali sono gli svantaggi delle cellule U87?
Vantaggi
Le linee cellulari U 87 MG sono ampiamente utilizzate nella ricerca. Alcuni vantaggi associati a questa linea cellulare sono:
Vantaggi
- Facile da coltivare: Le cellule U 87 MG sono facili da mantenere in coltura. Non richiedono requisiti di coltura cellulare difficili o complicati
- Omogeneità: U-87 MG è una linea cellulare omogenea. La maggior parte delle cellule di una popolazione possiede lo stesso patrimonio genetico e condivide quindi caratteristiche simili. Queste cellule sono utilizzate per lo studio dei processi cellulari, lo screening dei farmaci e i test
- Ben caratterizzata: Questa linea cellulare di glioblastoma è ben caratterizzata da caratteristiche di crescita, morfologia ed espressione genica, il che la rende un valido strumento di ricerca
Svantaggi
- Applicabilità limitata: La U 87 MG è una linea cellulare di glioblastoma, quindi le sue applicazioni sono principalmente limitate allo studio dei glioblastomi e dei meccanismi molecolari sottostanti. Potrebbe non essere adatta per lo studio di altri tipi di cancro.
Applicazioni di ricerca con cellule U-87 MG
La linea cellulare di glioblastoma U87MG è ampiamente utilizzata negli studi sul cancro, in particolare nella ricerca sul glioblastoma. Alcune delle applicazioni di ricerca delle cellule U 87 MG sono:
- Ricerca sulla biologia del cancro: La linea cellulare U87 viene utilizzata per studiare la crescita e lo sviluppo del cancro, i meccanismi molecolari sottostanti, le vie di segnalazione e il microambiente tumorale. Uno studio pubblicato nel 2020 ha utilizzato un modello di glioblastoma in vitro, la linea cellulare U-87 MG, per studiare il gene BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) come bersaglio terapeutico. I risultati hanno mostrato che il gene BMAL1 inibisce la proliferazione, la migrazione e l'invasione delle cellule di glioblastoma sopprimendo l'espressione genica della ciclina B1, della metalloproteinasi-9 e della fosfo-AKT [1]. Un'altra ricerca condotta nel 2019 ha utilizzato la linea cellulare U87 e ha studiato che la downregulation dell'espressione del fattore di trascrizione LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor) può aumentare la radiosensibilità delle cellule di glioma attraverso l'upregolazione del percorso FOXO-1. LITAF è anche noto come gene 7 indotto da p53 (PIG7) [2].
- Scoperta e sviluppo di farmaci: Le cellule U-87 MG possono essere utilizzate per lo screening e la sperimentazione di farmaci, consentendo ai ricercatori di identificare nuovi potenziali farmaci antitumorali e di valutarne l'efficacia e la tossicità. Una ricerca ha utilizzato la linea cellulare di glioblastoma U 87 MG per valutare il potenziale antitumorale e antiossidante dell'estratto di Inula helenium (L.) [3]. Analogamente, un'altra pubblicazione ha menzionato l'utilizzo della linea cellulare U87 per testare l'effetto citotossico e apoptotico degli estratti vegetali [4]. Inoltre, una ricerca pubblicata nel 2018 ha studiato l'effetto citotossico degli alcaloidi sesquiterpenici estratti dalle piante di Nuphar su linee cellulari U 87 MG sensibili e resistenti ai farmaci [5].
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Linea cellulare U-87 MG: Pubblicazioni di ricerca
Ecco alcune importanti pubblicazioni di ricerca che riguardano la linea cellulare U 87 MG.
Questo articolo pubblicato su Neuroreport 2018 propone che l'ipossia possa aumentare la migrazione e l'invasione delle cellule di glioblastoma umano regolando la via di segnalazione PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Questo studio è stato pubblicato su Frontiers in Pharmacology nel 2020. I risultati della ricerca affermano che un flavonoide, l'Eriodictyol, esercita effetti antitumorali sulla linea cellulare U87 e sopprime la proliferazione cellulare e le metastasi. Il composto media le sue proprietà antitumorali modulando la via PI3K/Akt/NF-κB.
Questa ricerca in Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) suggerisce che una formula a base di erbe cinesi chiamata pillola Xihuang può indurre l'apoptosi nelle cellule U87 prendendo di mira la cascata Akt/mTOR/FOXO1 attivata dai ROS.
LITAF aumenta la radiosensibilità delle cellule di glioma umano attraverso la via FoxO1
Questo documento di ricerca è stato pubblicato nel 2019 sulla rivista Cellular and Molecular Neurobiology. Lo studio proponeva che un fattore di trascrizione, LITAF, downregola e migliora la radiosensibilità delle cellule di glioma regolando la via di segnalazione FOXO-1.
Questo articolo è stato pubblicato su Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). I ricercatori hanno utilizzato cellule U 87 MG per studiare l'effetto citotossico delle nanoparticelle PLGA caricate con curcumina.
Risorse per le cellule U-87 MG: Protocolli, video e altro
La linea cellulare di glioblastoma U87MG è utilizzata in molti laboratori di ricerca sul cancro. Alcune risorse relative a questa linea cellulare sono:
- Trasfezione della linea cellulare U87: Questo documento descrive un protocollo di trasfezione per le cellule U 87 MG.
- Trasfezione della linea cellulare U 87 MG: Questo video è un tutorial che spiega passo dopo passo il protocollo di trasfezione delle cellule U87.
Le risorse per il protocollo di coltura cellulare delle cellule U87 sono elencate di seguito:
- Cellule U87 MG: Questo link contiene informazioni di base sulla linea cellulare U 87 MG. Include brevi protocolli di divisione, congelamento e scongelamento delle cellule.
Approfondimenti sulla ricerca sul glioma U87 MG: Domande frequenti
Riferimenti
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 sopprime la proliferazione, la migrazione e l'invasione delle cellule U87MG attraverso la downregolazione della ciclina B1, della fosfo-AKT e della metalloproteinasi-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF aumenta la radiosensibilità delle cellule di glioma umano attraverso la via FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., Attività antiossidanti e antitumorali dell'estratto di Inula helenium (L.) nella linea cellulare di glioblastoma umano U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Citotossicità degli alcaloidi sesquiterpenici delle piante di Nuphar verso linee cellulari sensibili e resistenti ai farmaci. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.