Cellule RBL-2H3 - Importanza delle RBL-2H3 nella risposta allergica e negli studi immunologici
La linea cellulare RBL-2H3 è una linea cellulare di leucemia basofila derivata da ratto utilizzata nella ricerca immunologica. Serve come sistema modello per studiare la fisiologia, il comportamento e le funzioni dei mastociti. Queste cellule sono utilizzate anche per studiare le reazioni allergiche, i processi immunologici e la sperimentazione e lo sviluppo di farmaci.
L'articolo fornisce informazioni sull'origine delle RBL-2H3, sulle caratteristiche generali, sui requisiti di coltura e sulle applicazioni di ricerca.
Cellule RBL-2H3: Origine e caratteristiche generali
Prima di utilizzare una linea cellulare di basofili nella vostra ricerca, dovreste conoscerne l'origine e le caratteristiche generali. Questa sezione dell'articolo vi informerà sulle basi delle cellule RBL-2H3. Ad esempio, cosa sono i mastociti RBL-2H3? Perché usare le cellule RBL-2H3? Cosa sono le cellule RBL-2H3 nella leucemia basofila del ratto? Qual è la morfologia delle RBL-2H3? Le cellule RBL-2H3 sono immortali?
- Le RBL-2H3 sono cellule di leucemia basofila derivate da cellule basofile di ratto Wistar nel 1978 presso il National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- Le cellule RBL-2H3 possiedono il recettore tirosin-chinasi c-kit e i recettori della mast cell protease II (RMCP-II), che le rendono un potenziale modello di mastocita. Per questo motivo, sono comunemente chiamate mastociti nonostante la loro origine dai basofili di ratto [1].
- All'attivazione rilasciano istamina e altri mediatori ed esprimono recettori IgE ad alta affinità.
- Le cellule RBL-2H3 presentano una morfologia simile a quella dei fibroblasti.
Cellule RBL-2H3: Informazioni sulla coltura
Questa sezione vi aiuterà a conoscere alcuni aspetti fondamentali per la coltura della linea cellulare RBL-2H3. Saprete che: Qual è il tempo di raddoppio delle cellule RBL-2H3? Qual è la densità di semina delle cellule RBL-2H3? Qual è il protocollo di coltura delle cellule RBL-2H3? Qual è il terreno di coltura della linea cellulare RBL-2H3?
Punti chiave per la coltura delle cellule RBL-2H3
|
Tempo di raddoppio della popolazione: |
Il tempo di raddoppio dei mastociti RBL-2H3 è di circa 50-60 ore. |
|
Aderenti o in sospensione: |
La RBL-2H3 è una linea cellulare aderente. |
|
Rapporto di subcoltivazione: |
Per le cellule RBL-2H3, il rapporto di suddivisione viene mantenuto tra 1:2 e 1:4. Le cellule aderenti vengono lavate con una soluzione 1 x PBS priva di magnesio e calcio. Si aggiunge la soluzione di passaging Accutase e le cellule vengono tenute a temperatura ambiente per 10 minuti per staccarsi dal fondo del recipiente di coltura. Si aggiunge nuovo terreno di coltura e le cellule vengono centrifugate. Le cellule raccolte vengono accuratamente risospese in terreno fresco e versate in nuove fiasche contenenti terreno di coltura. |
|
Terreno di crescita: |
Per la coltura delle cellule RBL-2H3 si utilizza un terreno EMEM contenente il 10% di FBS, 2 mM di L-Glutamina, 2,2 g/L di NaHCO3 e sale EBSS. Il terreno deve essere sostituito da 2 a 3 volte alla settimana. |
|
Condizioni di crescita: |
Le cellule RBL-2H3 sono coltivate in un incubatore umidificato a 37 °C e collegato a una fonte diCO2 al 5%. |
|
Conservazione: |
Le cellule vengono conservate nella fase vapore dell'azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150 °C in un congelatore elettrico per proteggere la vitalità delle cellule a lungo termine. |
|
Processo e terreno di congelamento: |
Il terreno di congelamento CM-1 o CM-ACF viene utilizzato per congelare le cellule RBL-2H3 utilizzando un processo di congelamento lento. In breve, questo metodo consente una diminuzione della temperatura di 1 °C al minuto e protegge le cellule dagli shock. |
|
Processo di scongelamento: |
Le cellule RBL-2H3 vengono scongelate in un bagno d'acqua preimpostato (37 °C) per circa 60 secondi. Successivamente, le cellule vengono aggiunte al terreno di coltura fresco e centrifugate. Questa fase è essenziale per rimuovere i componenti del terreno di coltura. Successivamente, il pellet cellulare viene risospeso in un terreno di coltura e le cellule vengono dispensate in una fiasca per la coltura. |
|
Livello di biosicurezza: |
Le cellule RBL-2H3 devono essere mantenute in laboratori con livello di biosicurezza 1. |
Vantaggi e limiti della linea di cellule basofile RBL-2H3
Le cellule RBL-2H3 sono comunemente utilizzate nella ricerca immunologica. Questa sezione ne illustra i principali vantaggi e limiti.
Vantaggi
- Facile da coltivare: Le cellule RBL-2H3 possono essere facilmente coltivate e mantenute in laboratorio. Ciò facilita la sperimentazione economica e riproducibile, rendendole una scelta popolare per gli studi iniziali in immunologia.
Limitazioni
- Origine non umana: Originate da basofili di ratto, le cellule RBL-2H3 potrebbero non imitare accuratamente i processi biologici umani, il che può limitare la loro applicabilità in studi di ricerca specifici sull'uomo. Ciò richiede una cauta interpretazione dei dati quando si estrapolano i risultati ai sistemi umani.
- Modello semplificato di mastocita: Sebbene queste cellule forniscano un modello di base per lo studio delle funzioni dei mastociti, non rappresentano pienamente la natura complessa delle interazioni dei mastociti all'interno del sistema immunitario umano. Di conseguenza, potrebbero non modellare adeguatamente i molteplici ruoli dei mastociti nelle risposte immunitarie o nelle condizioni patologiche in vivo.
Linea cellulare RBL-2H3: Una pietra miliare nella ricerca immunologica
Ricerca sui basofili e sui mastociti con la linea cellulare RBL-2H3
La linea cellulare RBL-2H3, derivata da Rattus norvegicus, è un modello fondamentale per lo studio della biologia dei basofili e dei mastociti. Questi mastociti di ratto forniscono informazioni essenziali sul rilascio di mediatori da parte dei mastociti, fondamentali per la comprensione di condizioni allergiche come la rinite allergica. Attraverso queste cellule, i ricercatori esplorano le dinamiche dei recettori cellulari e la creazione di sinapsi immunologiche, che sono centrali nella risposta del sistema immunitario agli allergeni. Un interessante studio pubblicato nel 2019 ha utilizzato la linea cellulare RBL-2H3 e ha studiato i meccanismi alla base delle reazioni pseudoallergiche prodotte dall'iniezione di Qingkailing. Lo studio ha rilevato che la cascata di segnalazione PI3K-RAC1 elicita parzialmente questa risposta allergica nelle cellule [2]
Dinamiche delle sinapsi immunologiche nella ricerca sulle allergie
Utilizzate ampiamente nella ricerca immunologica, le cellule RBL-2H3 sono particolarmente efficaci per studiare le dinamiche delle sinapsi immunologiche. Ciò contribuisce a chiarire i processi di comunicazione del sistema immunitario, con applicazioni nello studio dei mastociti del sangue periferico e del peritoneo. Questa ricerca è fondamentale per una comprensione completa della risposta immunitaria in contesti sia sistemici che localizzati
Screening di farmaci e test di tossicità
Nello screening e nella sperimentazione di farmaci, viene sfruttata la reattività delle cellule RBL a vari stimoli, compreso lo studio di come l 'H2O2 inibisca le risposte IgE-mediate. Queste cellule giocano un ruolo essenziale nello sviluppo di trattamenti per malattie come le infezioni streptococciche, in cui il gruppo degli streptococchi mitis inibisce l' attivazione dei mastociti. Oltre a questo, i ricercatori valutano gli effetti tossici di varie sostanze, tra cui prodotti chimici, farmaci e nanoparticelle, utilizzando questo modello RBL 2H3 mc. Ad esempio, uno studio recente (2022) ha valutato la citotossicità delle microplastiche di polistirene sulle cellule RBL-2H3. È emerso che le microplastiche danneggiano gli organelli delle cellule RBL-2H3 e promuovono la morte cellulare [3]. Un altro studio del 2021 ha valutato il potenziale antiallergico e antinfiammatorio di un prodotto naturale, la neferina, utilizzando il modello RBL 2H3 mc. Lo studio ha rivelato le buone proprietà antiallergiche e antinfiammatorie del composto [4]
Metodologie avanzate di misurazione immunologica
Il rilascio consistente e misurabile di mediatori da parte delle cellule RBL-2H3 le rende ideali per una comoda fluorimetria, facilitando misurazioni precise e accurate cruciali per lo studio delle malattie e la valutazione degli agenti terapeutici.
La linea cellulare RBL-2H3, che ha origine nel Rattus norvegicus, è una risorsa preziosa per la ricerca fondamentale e applicata nel campo dell'immunologia. Offre profonde opportunità per far progredire la nostra conoscenza e il trattamento delle malattie immunologiche
Linea cellulare RBL-2H3 per la ricerca immunologica avanzata
Cellule RBL-2H3: Pubblicazioni di ricerca
Di seguito sono riportate alcune interessanti pubblicazioni di ricerca sui mastociti RBL-2H3:
Attività inibitoria della narirutina sulla degranulazione delle cellule RBL-2H3
Questo lavoro di ricerca è stato pubblicato nella rivista Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Lo studio propone che la narirutina, un composto naturale, eserciti effetti inibitori sulla degranulazione delle cellule RBL 2H3 attraverso la regolazione delle vie di segnalazione NF-κB, MAPK e tirosin-chinasi.
Questa ricerca pubblicata sull'International Journal of Molecular Sciences (2020) ha proposto che il composto di apigenina sopprime in modo significativo le risposte allergiche e infiammatorie delle cellule RBL-2H3 e RAW264.7. Pertanto, può servire come potenziale agente per combattere le malattie legate al sistema immunitario.
Questa ricerca pubblicata sull'International Journal of Molecular Sciences (2021) ha valutato gli effetti antiallergici e antinfiammatori di un prodotto naturale, la saponarina, utilizzando diverse linee cellulari, tra cui le RBL-2H3.
Questo studio di Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) ha rilevato che gli estratti di Benchalokawichian e alcuni costituenti attivi esercitano potenziali effetti inibitori sul rilascio di ß-esosaminidasi da parte delle cellule RBL 2H3.
Questo lavoro è stato pubblicato nel 2018 sull'International Journal of Biological Macromolecules. Lo studio afferma che la spirulina maxima, un prodotto naturale, inibisce la degranulazione delle RBL 2H3 prevenendo la fosforilazione di MAPKs e AKT.
Risorse per la linea cellulare RBL-2H3: Protocolli, video e altro
RBL-2H3 è una linea di mastociti ampiamente utilizzata. Qui sono citate le risorse disponibili che coprono i protocolli di coltura e trasfezione di RBL-2H3:
- Modello MC RBL 2H3: Questo articolo di ricerca comprende i protocolli per il mantenimento delle colture di RBL-2H3 e per la trasfezione di RBL-2H3.
Ecco alcune risorse che spiegano il protocollo di coltura delle cellule RBL-2H3:
- Cellule RBL-2H3: Questo sito web è utile per imparare i protocolli di coltura cellulare per la linea cellulare RBL-2H3. Inoltre, contiene informazioni sui terreni di coltura e sulle condizioni di coltura delle cellule RBL-2H3.
Linea cellulare RBL-2H3: FAQ essenziali per i ricercatori
Riferimenti
- Passante, E. e N. Frankish, La linea cellulare RBL-2H3: la sua provenienza e la sua idoneità come modello per il mastocita. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Reazione pseudoallergica causata dall'iniezione di Qingkailing parzialmente attraverso la via di segnalazione PI3K-Rac1 nelle cellule RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Le micro (nano) plastiche di polistirene danneggiano gli organelli delle cellule RBL-2H3 e promuovono MOAP-1 per indurre l'apoptosi. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Effetti antiallergici e antinfiammatori della neferina sulle cellule RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.