Cellule NCI-H460 - Navigazione nella ricerca sul cancro del polmone con le intuizioni sulle NCI-H460
LeNCI-H460 sono cellule di carcinoma polmonare non a piccole cellule di derivazione umana comunemente utilizzate nella ricerca sul carcinoma polmonare e sulla tossicologia. Questa linea cellulare è uno strumento prezioso per studiare vari aspetti della biologia del cancro che coinvolgono lo sviluppo, la crescita e la resistenza ai farmaci. Inoltre, le cellule NCI-H460 sono un modello appropriato per lo sviluppo di reagenti antitumorali.
Cellule NCI-H460: Origine e caratteristiche generali
L'origine e le caratteristiche generali di una linea cellulare contribuiscono in modo determinante alle sue applicazioni di ricerca. Questa sezione dell'articolo vi aiuterà a conoscere l'origine e le caratteristiche salienti delle cellule NCI-H460 per il cancro del polmone. Conoscerete: Cosa sono le cellule NCI-H460? Qual è il tipo di linea cellulare NCI-H460? Qual è la morfologia delle NCI-H460?
- La linea cellulare NCI-H460 è stata ricavata dal versamento pleurico di un uomo europeo affetto da carcinoma polmonare a grandi cellule. È stata creata nel 1982 da A.F. Gazdar e colleghi.
- Le cellule di cancro al polmone NCI-H460 hanno una morfologia epiteliale.
- NCI-H460 è una linea cellulare tumorigenica con cariotipo ipotriploide. Il numero modale di cromosomi per queste cellule è 57. Le cellule NCI-H460 possiedono anche un numero modale di cromosomi 58 a percentuali comparabili.
- Queste cellule tumorali polmonari presentano molte mutazioni NCI-NCI-H460 come i tumori polmonari non a piccole cellule, come la mutazione KRAS NCI-H460, che sono coinvolte nella proliferazione, nella crescita, nell'invasione e nelle metastasi delle cellule.
Informazioni sulla coltura delle cellule NCI-H460
È necessario conoscere i seguenti punti chiave per una corretta manipolazione e manutenzione della linea cellulare NCI-H460. Vi informerà sul tempo di raddoppiamento di NCI-H460, sul terreno di coltura di NCI-H460 e sulle procedure di coltura cellulare di base per le cellule di carcinoma polmonare NCI-H460.
Punti chiave per la coltura delle cellule NCI-H460
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Tempo di raddoppiamento: |
Il tempo di raddoppiamento delle cellule NCI-H460 è di circa 33 ore. |
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Aderenti o in sospensione: |
Le cellule di carcinoma polmonare NCI-H460 sono aderenti. |
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Rapporto di subcoltivazione: |
Il rapporto di divisione raccomandato per la linea cellulare NCI-H460 è di 1:2 e 1:4. Dopo aver rimosso il vecchio terreno di coltura, le cellule aderenti vengono risciacquate con tampone fosfato 1 x salino. Successivamente, le cellule vengono incubate con la soluzione di passaging Accutase per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Le cellule dissociate vengono risospese in un terreno di coltura e centrifugate. Le cellule raccolte vengono nuovamente risospese e versate nella nuova fiasca per la coltura. |
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Terreno di coltura: |
Come terreno di coltura per NCI-H460 si utilizza RPMI 1640. È integrato con il 10% di siero fetale bovino, 2,1 mM di glutammina stabile e 2,0 g/L di NaHCO3. Il terreno deve essere sostituito da 2 a 3 volte alla settimana. |
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Condizioni di crescita: |
Le colture di NCI-H460 sono mantenute a 37°C in un incubatore umidificato con un apporto continuo di CO2 al 5%. |
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Conservazione: |
Le cellule di carcinoma polmonare NCI-H460 possono essere conservate a lungo termine nella fase vapore dell'azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150°C in un congelatore elettrico a bassissima temperatura. |
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Processo e terreno di congelamento: |
Per congelare e conservare le cellule NCI-H460 si utilizza il terreno CM-1 o CM-ACF. Si raccomanda un metodo di congelamento lento per proteggere la massima vitalità cellulare. |
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Processo di scongelamento: |
Le cellule NCI-H460 congelate vengono scongelate in un bagno d'acqua preriscaldato (a 37°C) per 40-60 secondi finché non rimane un piccolo grumo di ghiaccio. Le cellule scongelate vengono aggiunte al terreno fresco e centrifugate per rimuovere i componenti del terreno congelato. Il pellet cellulare raccolto viene nuovamente risospeso e le cellule vengono distribuite in nuove fiasche contenenti il terreno di coltura. Le cellule NCI-H460 possono impiegare quasi 24 ore per attaccarsi alla superficie della fiasca. |
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Livello di biosicurezza: |
Le cellule di carcinoma polmonare NCI-H460 vengono manipolate e mantenute in laboratori di livello di biosicurezza 1. |
Vantaggi e svantaggi delle cellule NCI-H460
NCI-H460 è una linea cellulare ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro del polmone. Questa sezione illustra i vantaggi e gli svantaggi generali delle cellule NCI-H460 per il cancro del polmone.
Vantaggi
I vantaggi della linea cellulare NCI-H460 per il carcinoma polmonare non a piccole cellule sono:
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Origine del tumore
La linea cellulare NCI-H460 è stata derivata da un paziente con carcinoma polmonare a grandi cellule, che rappresenta questo particolare tipo di tumore polmonare. Sono utilizzate come modello per studiare la biologia del tumore al polmone e sviluppare nuovi trattamenti efficaci. Le cellule NCI-H460 hanno un potenziale tumorigenico e possono essere iniettate in topi immunodeficienti per creare modelli tumorali in vivo per studiare la crescita, lo sviluppo e l'efficacia di potenziali farmaci.
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Alti tassi di proliferazione
L'NCI-H460 presenta tassi di crescita più elevati rispetto ad altre linee cellulari di carcinoma polmonare non a piccole cellule, come l'A549. Questo vantaggio ne aumenta la disponibilità e aiuta i ricercatori a condurre esperimenti riproducibili e sensibili ai tempi.
Svantaggi
Gli svantaggi associati alle cellule di carcinoma polmonare NCI-H460 sono:
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Omogeneità
Le cellule NCI-H460 sono omogenee in quanto ottenute da un singolo tumore di un paziente. Pertanto, in genere mancano della complessità e dell'eterogeneità osservate nei tumori dei pazienti.
Applicazioni di ricerca delle cellule NCI-H460
Le cellule NCI-H460 sono ampiamente utilizzate negli studi sul carcinoma polmonare. Ecco alcune importanti applicazioni di ricerca delle cellule NCI-H460:
- Ricerca sul cancro del polmone: Le cellule NCI-H460 sono un modello prezioso per studiare i meccanismi cellulari e molecolari coinvolti nello sviluppo, nella crescita e nelle metastasi dei tumori. Inoltre, vengono utilizzate per studiare le vie di segnalazione imperative, i bersagli molecolari e le varie mutazioni genetiche associate alla progressione del cancro al polmone. Sono stati condotti diversi studi su cellule NCI-H460 per studiare efficacemente questi fattori. Uno studio condotto nel 2019 ha proposto che la caseina ubiquitaria nucleare sovraespressa e il substrato delle chinasi ciclina-dipendenti (NUCKS) sono coinvolti nella crescita delle cellule tumorali attraverso la regolazione della via di segnalazione PI3K/AKT [1]. Analogamente, uno studio in vitro e in vivo ha utilizzato cellule NCI-H460 per studiare il ruolo del gene eIF4E. I risultati hanno rivelato che il gene eIF4E è coinvolto nella crescita e nell'angiogenesi del carcinoma polmonare e può essere preso di mira per sviluppare promettenti farmaci anti-cancro [2].
- Scoperta e sviluppo di farmaci: La NCI-H460, una linea cellulare di carcinoma polmonare umano, è ampiamente utilizzata negli studi di scoperta e sviluppo di farmaci. I ricercatori utilizzano queste cellule per studiare la tossicità e l'efficacia di nuovi candidati farmaci, terapie mirate e trattamenti rivolti principalmente alle mutazioni KRAS di NCI-H460. Uno studio condotto da Haoyue Hu e colleghi nel 2023 ha impiegato cellule NCI-H460 per studiare gli effetti antitumorali del farmaco anlotinib. I risultati hanno mostrato che l'anlotinib ha parzialmente influenzato la crescita delle cellule di cancro al polmone mutanti KRAS inibendo la cascata di segnalazione MEK/ERK [3]. Allo stesso modo, un composto fenolico, l'acido carnosico, è stato analizzato per le attività antiproliferative e proapoptotiche utilizzando cellule NCI-H460 [4].
- Resistenza ai farmaci: La linea cellulare NCI-H460 è ideale per studiare il meccanismo di resistenza ai farmaci del carcinoma polmonare. I ricercatori utilizzano queste cellule per sviluppare modelli di resistenza ai farmaci e identificare i geni, i fattori molecolari e le vie di segnalazione sottostanti. Ad esempio, uno studio ha sviluppato cellule NCI-H460 resistenti al pemetrexed, un agente antifolato multitarget, per studiare i meccanismi molecolari di resistenza al pemetrexed nelle cellule di carcinoma polmonare non a piccole cellule [5].
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Pubblicazioni di ricerca sulle cellule NCI-H460
Ecco alcune interessanti pubblicazioni di ricerca sulla linea cellulare di carcinoma polmonare NCI-H460.
Questo studio pubblicato su Molecules (2023) propone che un α-1,6-glucano naturale, BBWPW, ricavato dal fagiolo nero inibisca la proliferazione delle cellule NCI-H460 attraverso la regolazione della via PI3K/AKT/MAPK.
Questo articolo di Phytomedicine (2019) ha studiato che il dioscin-6′-O-acetato, un nuovo composto naturale, esercita un effetto antiproliferativo sulle cellule di cancro al polmone NCI-H460.
Una ricerca di BMC Pulmonary Medicine (2020) afferma che il microRNA-425-5p aumenta la tumorigenesi del carcinoma polmonare attraverso la via PTEN/PI3K/AKT.
Questo articolo di Molecular Medicine Reports (2017) ha proposto il potenziale antitumorale e i meccanismi sottostanti del composto quinalizarina nelle cellule NCI-H460 e in altre cellule di cancro al polmone.
Questa ricerca pubblicata su Food and Function (2019) evidenzia il potenziale effetto antitumorale dell'estratto di Eucalyptus globulus labill. utilizzando cellule NCI-H460. I risultati hanno dimostrato che l'estratto della pianta ha mostrato questi effetti aumentando l'espressione di p53 delle cellule NCI-H460 e modulando il profilo del ciclo cellulare.
Risorse per la linea cellulare NCI-H460: Protocolli, video e altro
Ecco alcune risorse online relative alle cellule di cancro del polmone NCI-H460.
- Trasfezione delle cellule NCI-H460: Questo video tutorial è una guida passo-passo per la trasfezione di cellule NCI-H460 con DNA plasmidico.
I seguenti link contengono informazioni imperative sulla coltura cellulare delle cellule H460.
- Cellule NCI-H460: Questo sito web fornisce informazioni importanti sui terreni di coltura delle cellule NCI-H460, sulle procedure di subcultura, congelamento e scongelamento.
- Passaggio di cellule NCI-H460: Questo documento vi guiderà nel passaggio e nella subcultura della linea cellulare NCI-H460. Inoltre, vi aiuterà a conoscere il protocollo di trasfezione per le cellule NCI-H460.
Esplorazione della linea cellulare NCI-H460: Domande frequenti e approfondimenti
Riferimenti
- Hu, C., et al., NUCKS promuove la proliferazione, la migrazione e l'invasione delle cellule tumorali del polmone attraverso la via di segnalazione Pi3k/Akt. Medicina clinica e investigativa, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, un nuovo inibitore dell'interazione eIF4E/eIF4G, inibisce la crescita delle cellule di cancro al polmone e l'angiogenesi attraverso la via di segnalazione Ras/MNK/ERK/eIF4E. Interazioni chimico-biologiche, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib esercita effetti antitumorali sulle cellule di cancro al polmone mutate in KRAS attraverso la soppressione della via MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., L'acido carnosico mostra effetti antiproliferativi e proapoptotici nelle cellule polmonari tumorali NCI-H460 e non tumorali IMR-90. Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Stabilimento e caratterizzazione di cellule NCI-H460/PMT resistenti al pemetrexed. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (precedentemente Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.