Cellule DLD-1: Applicazioni e approfondimenti delle cellule DLD-1 nella ricerca sul cancro colorettale

LaDLD-1 è una linea cellulare di carcinoma colorettale umano comunemente utilizzata nella ricerca sul cancro. È uno strumento prezioso per studiare vari aspetti del cancro del colon, tra cui lo sviluppo del tumore, la progressione, i meccanismi molecolari sottostanti e la risposta agli agenti terapeutici. Pertanto, la DLD-1 è eccezionale per la comprensione della malattia e lo sviluppo di potenziali strategie terapeutiche.

Questo articolo fornisce informazioni importanti sulla linea cellulare DLD-1 che è necessario conoscere prima di lavorare con essa. Verranno trattate le seguenti informazioni:

Caratteristiche generali e origine delle cellule DLD-1
Informazioni sulla coltura della linea cellulare DLD-1
Linea cellulare DLD-1: Vantaggi e limiti
Applicazioni di ricerca della linea cellulare DLD-1
Pubblicazioni di ricerca sulle cellule DLD-1
Risorse per la linea cellulare DLD-1: Protocolli, video e altro

1. Caratteristiche generali e origine delle cellule DLD-1

Prima di lavorare su una linea cellulare, la prima considerazione di un ricercatore è la sua origine e le sue caratteristiche generali. Questa sezione dell'articolo costituisce un'introduzione dettagliata alla linea cellulare DLD-1. Verranno trattate le seguenti domande frequenti: Cosa sono le cellule DLD-1? Che cos'è una linea cellulare tumorale DLD-1? Quali sono le mutazioni della linea cellulare DLD-1? Quali sono le dimensioni di una cellula DLD-1? Qual è la morfologia delle cellule DLD-1?

La linea cellulare DLD-1, un tumore del colon, proviene dall'intestino crasso di un paziente maschio di 67 anni affetto da adenocarcinoma del colon-retto. È stata isolata da D.L. Dexter e colleghi nel 1977-1979. Questa linea cellulare condivide la stessa origine con le linee cellulari HCT-8, HCT-15 e HRT-18.
Come i tumori colorettali, le cellule DLD-1 possiedono un fenotipo di instabilità microsatellitare [1].
Le mutazioni di DLD-1 includono KRAS, P53, BRAF, BRCA1 e BRCA2. Grazie allo stato P53 delle DLD-1, alle mutazioni BRCA, BRCA2 e KRAS delle DLD-1, queste cellule sono considerate ideali per gli studi sul cancro.
Queste cellule possiedono una morfologia simile a quella epiteliale.
Le dimensioni della linea cellulare DLD-1 sono di circa 15 µm.
La linea cellulare di cancro colorettale umano DLD-1 possiede un cariotipo pseudodiploide. Circa l'86% delle cellule possiede un numero modale di cromosomi pari a 46. Tuttavia, la poliploidia può essere presente anche nel 17,1% della popolazione cellulare.

rendering 3D di una colonografia TC o di una scansione TC dell'intestino crasso visualizzata sullo schermo per la diagnosi del cancro dell'intestino crasso, del cancro del colon e del cancro colorettale.

2.informazioni sulla coltura della linea cellulare DLD-1

Prima di coltivare qualsiasi linea cellulare, è necessario conoscere i requisiti di base della coltura cellulare. Questa sezione mette in evidenza i punti importanti da conoscere prima di iniziare a lavorare sulla linea cellulare DLD-1. Tra questi vi sono: Che cos'è il tempo di raddoppiamento della DLD-1? Qual è il terreno di coltura della DLD-1? Qual è la densità di semina delle cellule DLD-1? Come si coltivano le cellule DLD-1?

Punti chiave per la coltura delle cellule DLD-1

Tempo di raddoppio:	Il tempo di raddoppiamento delle cellule DLD-1 è di circa 15 ore.
Aderenti o in sospensione:	La DLD-1 è una linea cellulare di cancro del colon umano aderente. Le cellule crescono in monostrato.
Densità di semina:	Le cellule DLD-1 vengono seminate a una densità compresa tra 1 e 2 x¹⁰⁴ ^cellule/cm2. Le cellule aderenti vengono lavate con 1x tampone fosfato salino (PBS) e incubate con la soluzione passante (Accutase) a temperatura ambiente. Dopo un'incubazione di 8-10 minuti, le cellule staccate vengono aggiunte al terreno di coltura e centrifugate. Il pellet cellulare viene quindi accuratamente risospeso e le cellule vengono versate in nuovi recipienti di coltura contenenti il terreno di crescita.
Terreno di coltura:	Per la coltura delle cellule DLD-1 si utilizza RPMI 1640 con supplementi di terreno, tra cui 10% di siero bovino fetale FBS, 2,1 mM di glutammina stabile e 2,0 g/L di NaHCO3. Il terreno deve essere sostituito 2-3 volte a settimana.
Condizioni di crescita:	Le colture di DLD-1 sono mantenute in un incubatore umidificato a 37°C con un apporto di CO2 del 5%.
Conservazione:	Le cellule DLD-1 sono conservate nella fase vapore dell'azoto liquido o in un congelatore elettrico a bassissima temperatura (a una temperatura inferiore a -150°C).
Processo e terreno di congelamento:	Per congelare le cellule DLD-1 si possono usare i terreni di congelamento CM-1 o CM-ACF. Si raccomanda sempre un processo di congelamento lento, che consenta una diminuzione graduale della temperatura di 1°C, evitando così lo shock delle cellule e proteggendone la vitalità.
Processo di scongelamento:	Le cellule congelate vengono scongelate in un bagno d'acqua preimpostato a 37 °C per 40-60 secondi, finché non rimane un piccolo grumo di ghiaccio. Successivamente, le cellule vengono aggiunte a un terreno fresco e centrifugate. Questa fase è necessaria per rimuovere i componenti del terreno di congelamento dalle cellule. Le cellule raccolte vengono risospese in un terreno di crescita e distribuite nella fiasca per la crescita.
Livello di biosicurezza:	La linea cellulare DLD-1 viene mantenuta nei laboratori di livello di biosicurezza 1.

Cellule DLD-1 osservate con ingrandimento 10x e 20x, che rivelano la loro caratteristica morfologia epiteliale.

3.linea cellulare DLD-1: Vantaggi e limiti

In questa sezione dell'articolo, esamineremo i vantaggi e i limiti della linea cellulare DLD-1 per il cancro del colon.

Vantaggi

I principali vantaggi della linea cellulare DLD-1 sono:

Modello di cancro colorettale	Le cellule DLD-1 possiedono mutazioni comunemente riscontrate nei pazienti affetti da cancro del colon-retto, come la mutazione KRAS, BRCA e BRCA2. Questa rilevanza le rende un modello cellulare clinicamente appropriato per lo studio di questa malattia.
Linea cellulare tumorigenica	Le cellule DLD-1 sono tumorigeniche. Possono causare tumori quando vengono iniettate in topi nudi. Pertanto, i ricercatori utilizzano queste cellule per sviluppare modelli tumorali xenotrapiantati che aiutano a studiare la formazione, lo sviluppo e la progressione del tumore in vivo.

Limitazioni

Le limitazioni associate alle cellule DLD-1 sono:

Eterogeneità

Le popolazioni di cellule di cancro del colon DLD-1 presentano eterogeneità genetica e fenotipica. Questo può influenzare la generalizzabilità dei risultati della ricerca.

4.applicazioni di ricerca della linea cellulare DLD-1

La linea cellulare DLD-1 offre una serie di applicazioni nella ricerca sul cancro. In questa sezione vengono discusse alcune applicazioni di rilievo.

Studio del cancro: Le cellule DLD-1 costituiscono un prezioso modello in vitro per la comprensione dei meccanismi molecolari alla base della crescita, dello sviluppo e della progressione del cancro del colon-retto. Inoltre, sono utilizzate per studiare l'espressione genica, le vie di segnalazione e l'influenza di specifiche mutazioni genetiche sul comportamento delle cellule tumorali. Una ricerca condotta nel 2022 ha osservato che la cascata di segnalazione PI3K/Akt/YAP regola la migrazione e l'invasione della linea cellulare di cancro colorettale DLD-1 [2].
Sviluppo di farmaci: I ricercatori utilizzano la linea cellulare DLD-1 per testare l'efficacia dei farmaci antitumorali e valutarne il potenziale per il trattamento del cancro del colon. Ciò contribuisce allo sviluppo di farmaci e alla lotta efficace contro la malattia. Uno studio condotto nel 2022 ha utilizzato la linea cellulare DLD-1 per esplorare l'attività antitumorale delle ftalocianine di silicio, composti sintetizzati chimicamente. I risultati dello studio hanno suggerito che questi composti sono potenti agenti antitumorali [3]. È interessante notare che un'altra ricerca ha rilevato il potenziale antitumorale di una proteina P8 derivata da un probiotico utilizzando cellule DLD-1 [4].

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5.pubblicazioni di ricerca sulle cellule DLD-1

Questa sezione evidenzia alcune pubblicazioni interessanti e frequentemente citate che riguardano la linea cellulare di carcinoma del colon DLD-1.

Il glicoside flavonoide diosmina induce apoptosi e arresto del ciclo cellulare nella linea cellulare di cancro del colon umano DLD-1

Questa pubblicazione è stata pubblicata sul Journal of Biologically Active Products di Nature (2022). Lo studio ha rilevato che la diosmina, un flavonoide, induce la morte cellulare nelle cellule DLD-1 e provoca anche l'arresto del ciclo cellulare; può quindi essere un potenziale agente antitumorale.

La bromelina sopprime efficacemente il cancro colorettale mutante Kras stimolando la ferroptosi

Questo studio pubblicato su Animal Cells and Systems (2018) propone che la bromelina, un enzima, reprima la mutazione KRAS di DLD-1 ed eserciti potenti effetti citotossici.

Il bergapten induce l'arresto G1 e la cascata pro-apoptotica nelle cellule di cancro del colon-retto associandosi all'asse p53/p21/PTEN

Questo articolo di ricerca è stato pubblicato nel 2019 sulla rivista "Environmental Toxicology". Lo studio ha esplorato gli effetti antitumorali di un composto naturale, il Bergapten, utilizzando una linea cellulare corettale DLD-1.

Fabbricazione ecologica di un composto di nanocurcumina/nano ossido di ferro: Potenziamento dell'attività antitumorale in vitro contro le linee cellulari DLD-1

Questo studio pubblicato sul Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) ha rilevato che i nanocompositi di curcumina e ossido di ferro sono altamente efficaci contro le cellule di cancro colorettale DLD-1.

L'epibrassinolide attiva AKT per innescare l'autofagia con il metabolismo delle poliammine nelle linee cellulari di cancro al colon SW480 e DLD-1

Questo articolo di ricerca è stato pubblicato nel 2020 sul Turkish Journal of Biology. Lo studio propone che un prodotto naturale, l'attivazione mediata da epibrassinolide di AKT nelle cellule DLD-1, stimoli l'autofagia legata alle poliammine.

6.risorse per la linea cellulare DLD-1: Protocolli, video e altro

Di seguito sono riportate alcune risorse sulle cellule DLD-1:

Trasfezione di DLD-1: Questo video tutorial è una guida completa sul protocollo di trasfezione in vitro della DLD-1.
Cellule DLD-1: Questo documento di ricerca descrive brevemente i requisiti di coltura delle cellule DLD-1, compresi i terreni e le condizioni di coltura. Inoltre, può aiutare ad apprendere il protocollo di trasfezione utilizzato per le cellule DLD-1.

I seguenti link contengono il protocollo per la coltura delle cellule DLD-1, derivate dal cancro del colon umano.

Linea cellulare DLD-1: Questo sito web fornisce le informazioni di base sulla linea cellulare DLD-1. Vi aiuterà a conoscere i diversi protocolli di coltura delle cellule DLD-1, compresa la subcultura e la manipolazione delle colture crioconservate e proliferanti.

Riferimenti

Gavrilas, L.I., et al., I geni pro-apoptotici come nuovi bersagli per trattamenti singoli e combinatori con resveratrolo e curcumina nel cancro del colon-retto. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T., et al., La segnalazione PI3K/Akt/YAP promuove la migrazione e l'invasione dellecellule di cancro colorettale DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
Farajzadeh, N., et al., Attività antitumorale di nuove ftalocianine di silicio contro la linea cellulare di adenocarcinoma colorettale (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C., et al., Ruoli antitumorali della proteina P8 derivata dai probiotici nella linea cellulare di cancro colorettale DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.