Cellule BEAS-2B - Le cellule BEAS-2B nella ricerca sulle malattie respiratorie: una guida completa
BEAS-2B è una linea cellulare epiteliale polmonare umana immortalizzata e non tumorigenica. Si tratta di un modello in vitro ampiamente utilizzato per studiare la risposta delle cellule polmonari a vari agenti cancerogeni e tossici. Inoltre, è un prezioso strumento di ricerca per lo studio di diverse infezioni e malattie respiratorie, come il COVID-19 e i carcinomi polmonari.
- Terreno di coltura
- Per la coltura della linea cellulare polmonare BEAS-2B si utilizza il terreno BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) contenente il 10% di siero fetale bovino. Il terreno deve essere sostituito ogni 2-3 giorni.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo di raddoppio della popolazione BEAS-2B è di circa 26 ore.
- Tipo di crescita
- BEAS-2B è una linea cellulare aderente di tipo epiteliale.
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina BEAS-2B
In questo articolo tratteremo quasi tutti gli aspetti della linea cellulare polmonare BEAS-2B, tra cui la sua origine, le informazioni sulla coltura cellulare, i vantaggi, gli svantaggi e le applicazioni nella ricerca. In particolare, esamineremo:
- Origine e caratteristiche generali delle cellule BEAS-2B
- Linea cellulare BEAS-2B: informazioni sulla coltura
- Vantaggi e svantaggi delle cellule BEAS-2B
- Applicazioni della linea cellulare BEAS-2B nella ricerca
- Cellule BEAS-2B: pubblicazioni di ricerca
- Protocolli di coltura cellulare
1. Origine e caratteristiche generali delle cellule BEAS-2B
La prima cosa da verificare in una linea cellulare è la sua origine e le sue caratteristiche generali. In questa sezione imparerete le caratteristiche salienti e l'origine delle cellule epiteliali bronchiali umane BEAS-2B. Studierete: Che cos'è la linea cellulare polmonare BEAS-2B? Che tipo di cellule sono le Beas 2B? Qual è l'origine delle cellule BEAS-2B?
- BEAS-2B, la linea cellulare dell'epitelio bronchiale, è stata sviluppata da un tessuto polmonare umano non canceroso nel 1988 dal gruppo di Curtis C. Harris [1].
- Le cellule BEAS-2B possiedono una morfologia di tipo epiteliale.
HBEpC vs BEAS-2B
Le HBEpC sono cellule primarie dell'epitelio bronchiale umano. Simili alle BEAS-2B, sono cellule epiteliali bronchiali umane normali. Tuttavia, hanno una durata di vita limitata rispetto alle BEAS-2B immortalizzate. Entrambe le linee cellulari possono essere utilizzate per studiare la biologia polmonare, la tossicologia e la modellizzazione delle malattie.
Linea cellulare BEAS-2B: informazioni sulla coltura
Le informazioni sulla coltura di una linea cellulare possono semplificare il vostro lavoro con essa. In questa sezione dell'articolo imparerete tutte le nozioni di base per la coltura della linea cellulare polmonare BEAS-2B. In particolare, scopriremo: qual è il tempo di raddoppio delle cellule BEAS-2B? Qual è il terreno di coltura per le cellule BEAS-2B? La linea cellulare BEAS-2B è aderente? Come si coltivano le cellule BEAS-2B?
Punti chiave per la coltura delle cellule BEAS-2B
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio della popolazione BEAS-2B è di circa 26 ore.
Aderenzi o in sospensione:
BEAS-2B è una linea cellulare aderente di tipo epiteliale.
Densità cellulare:
La densità cellulare raccomandata per la linea cellulare BEAS-2B è compresa tra 1 e 2 × 104 cellule/cm². Le cellule BEAS-2B aderenti vengono risciacquate con soluzione salina tamponata con fosfato e incubate con Accutase a temperatura ambiente per alcuni minuti. Dopo la dissociazione delle cellule, si aggiunge terreno fresco e le cellule vengono raccolte mediante centrifugazione. Le cellule raccolte vengono accuratamente risospese e trasferite in una nuova fiasca per la crescita.
Terreno di coltura:
Per la coltura della linea cellulare polmonare BEAS-2B si utilizza il terreno BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) contenente il 10% di siero fetale bovino. Il terreno deve essere sostituito ogni 2-3 giorni.
Condizioni di crescita:
La coltura BEAS-2B viene mantenuta a 37 °C in un incubatore umidificato con un apporto continuo di CO2 al 5%.
Conservazione:
Le fiale di cellule BEAS-2B congelate possono essere conservate nella fase vapore dell'azoto liquido o in un congelatore elettrico a una temperatura inferiore a -150 °C.
Processo di congelamento e terreno:
Per il congelamento della linea cellulare polmonare BEAS-2B vengono utilizzati i terreni di congelamento CM-1 o CM-ACF. Le cellule vengono congelate consentendo un abbassamento della temperatura di solo 1 °C al minuto per proteggere la loro vitalità. Questo tipo di metodo è chiamato congelamento lento.
Processo di scongelamento:
Le colture BEAS-2B congelate o crioconservate vengono scongelate in un bagno d'acqua a 37 °C contenente un agente antimicrobico per 40-60 secondi. Successivamente, alle cellule vengono aggiunti i terreni di coltura e possono essere coltivate direttamente in nuove fiasche oppure centrifugate per rimuovere i componenti del terreno di congelamento. Le cellule raccolte vengono quindi risospese e coltivate. Nel primo caso, il terreno di congelamento viene rimosso dopo 24 ore.
Livello di biosicurezza:
Per la manipolazione delle colture BEAS-2B sono richiesti laboratori di livello di biosicurezza 1.
Vantaggi e svantaggi delle cellule BEAS-2B
Come altre linee cellulari, anche le cellule BEAS-2B presentano alcuni pro e contro. Alcuni di questi sono discussi di seguito.
Vantaggi
I vantaggi della linea cellulare BEAS-2B includono:
Linea cellulare immortalizzata
La linea cellulare epiteliale bronchiale umana BEAS-2B è stata immortalizzata. Pertanto, continua a crescere senza entrare in senescenza. Questa caratteristica delle cellule BEAS-2B elimina la necessità di estrarre ripetutamente cellule epiteliali polmonari umane primarie con una durata di vita più breve.
Facile da coltivare
Le colture BEAS-2B sono facili da mantenere. Le cellule crescono e si propagano senza difficoltà in condizioni di coltura standard. Non ci sono requisiti di coltura cellulare complicati o particolari.
Origine umana
La linea cellulare BEAS-2B è di origine umana e rilevante. Pertanto, è un modello in vitro ideale per studiare le risposte, il comportamento e i processi delle cellule epiteliali delle vie aeree umane.
Svantaggi
Gli svantaggi associati alla linea cellulare polmonare BEAS-2B sono:
Cellule epiteliali polmonari umane trasformate
Le cellule BEAS-2B sono trasformate con il virus Ad12-SV40 2B, il che può modificarne il comportamento e le risposte rispetto alle cellule epiteliali bronchiali originarie del tessuto polmonare umano.
Applicazioni della linea cellulare BEAS-2B nella ricerca
La linea cellulare BEAS-2B offre diverse applicazioni nella ricerca biomedica. Alcune applicazioni comuni delle cellule BEAS-2B sono:
- Tossicologia: le cellule BEAS-2B sono spesso utilizzate per studiare la genotossicità e la citotossicità di varie tossine, inquinanti ambientali e sostanze chimiche. I ricercatori utilizzano questa linea cellulare epiteliale bronchiale per valutare gli effetti nocivi di queste sostanze sulla salute polmonare. Inoltre, studiano anche i meccanismi molecolari sottostanti. Ad esempio, uno studio condotto nel 2021 ha valutato la tossicità del cadmio metallico nella linea cellulare BEAS-2B. I risultati della ricerca hanno rivelato che il cadmio ha indotto la morte cellulare e il danno mitocondriale nella linea cellulare polmonare BEAS-2B attraverso la modulazione della via di segnalazione MAPK [2]. Un altro studio ha utilizzato la linea cellulare BEAS-2B per valutare la tossicità delle nanoparticelle di ossido di zinco in condizioni di stress ossidativo [3].
- Modellizzazione delle malattie respiratorie: la linea cellulare BEAS-2B è un ottimo strumento di ricerca e un modello in vitro per lo studio di malattie respiratorie quali la broncopneumopatia cronica ostruttiva (BPCO), l'asma, il cancro ai polmoni e le infezioni virali come la SARS-CoV-2. I ricercatori tendono a indurre condizioni correlate alla malattia nella linea cellulare BEAS-2B e a studiare i meccanismi cellulari e molecolari sottostanti. Ciò aiuta a identificare potenziali bersagli farmacologici e a sviluppare terapie personalizzate. Una ricerca condotta nel 2022 ha utilizzato la linea cellulare BEAS-2B e ha studiato il ruolo degli estrogeni e dei loro recettori nell'infezione da SARS-CoV-2. I risultati hanno rivelato che una maggiore espressione del recettore degli estrogeni GPER1 riduce la carica virale del SARS-CoV-2 nelle cellule BEAS-2B. Pertanto, esso può essere coinvolto nell'infezione o nella replicazione del virus SARS-CoV-2 [4].
5. Cellule BEAS-2B: Pubblicazioni scientifiche
Di seguito sono riportati alcuni studi di ricerca interessanti e tra i più citati che hanno come oggetto le cellule BEAS-2B.
Tossicità del grafene nelle cellule polmonari umane normali (BEAS-2B)
Questo studio è stato pubblicato nel 2011 sul Journal of Biomedical Nanotechnology. La ricerca ha suggerito che l'ossido di grafite induca l'apoptosi e la citotossicità nella linea cellulare epiteliale bronchiale normale (BEAS-2B).
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato sul Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Questo studio ha esplorato il potenziale terapeutico della naringenina, un flavonoide, nella linea cellulare BEAS-2B. I risultati hanno suggerito che la naringenina protegge le cellule polmonari BEAS-2B dalla tossicità indotta dal paraquat o dal danno ossidativo.
Questo studio è stato pubblicato su Inhalation Toxicology (2011). In esso, i ricercatori hanno valutato l'effetto tossico delle nanoparticelle magnetiche con rivestimenti di silice amorfa nella linea cellulare BEAS-2B in vitro.
Questo articolo pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) ha suggerito che l'acido ursodesossicolico possa ostacolare la migrazione anomala delle cellule epiteliali delle vie aeree e prevenire i danni causati dall'interazione tra la proteina spike del SARS-CoV-2 e l'ACE-2. Pertanto, potrebbe aiutare a ripristinare lo strato basale epiteliale.
Effetti del radon sull'apoptosi indotta da miR-34a nelle cellule epiteliali bronchiali umane BEAS-2B
Questo studio è stato pubblicato nel 2019 sul Journal of Toxicology and Environmental Health. I risultati della ricerca indicano che l'esposizione cronica al radon può favorire la carcinogenesi nelle cellule epiteliali bronchiali umane (BEAS-2B) attraverso l'attivazione del microRNA-34a.
Protocolli di coltura cellulare
Qui viene menzionato il protocollo di coltura cellulare per le cellule BEAS-2B.
- Subcoltura di BEAS-2B: questo documento vi aiuterà a conoscere i terreni di coltura BEAS-2B e le procedure di subcoltura.
- Linea cellulare BEAS-2B: questo sito web contiene tutte le informazioni di base necessarie per iniziare a lavorare con la linea cellulare BEAS-2B, compresi i terreni di coltura e i protocolli per la gestione delle colture in proliferazione e crioconservate.
Riferimenti
- Han, X., et al., Le cellule epiteliali polmonari umane BEAS-2B presentano caratteristiche delle cellule staminali mesenchimali. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., Il cadmio induce l'apoptosi delle cellule BEAS-2B e il danno mitocondriale attraverso la via di segnalazione MAPK. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., La tossicità delle nanoparticelle di ossido di zinco (ZnO) sulle cellule epiteliali bronchiali umane (BEAS-2B) è accentuata dallo stress ossidativo. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., La sovraespressione del recettore degli estrogeni GPER1 e il trattamento con G1 riducono l'infezione da SARS-CoV-2 nelle cellule bronchiali BEAS-2B. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.