Cellule BEAS-2B - Cellule BEAS-2B nella ricerca sulle malattie respiratorie: Una guida completa
LaBEAS-2B è una linea cellulare epiteliale polmonare umana immortalizzata e non tumorale. È un modello in vitro ampiamente utilizzato per studiare la risposta delle cellule polmonari a vari agenti cancerogeni e tossici. Inoltre, è un valido strumento di ricerca per studiare diverse infezioni e malattie respiratorie, come la COVID-19 e il carcinoma polmonare.
In questo articolo discuteremo quasi tutti gli aspetti della linea cellulare polmonare BEAS-2B, compresa la sua origine, le informazioni sulla coltura cellulare, i vantaggi, gli svantaggi e le applicazioni nella ricerca. In particolare, esamineremo:
- Origine e caratteristiche generali delle cellule BEAS-2B
- Linea cellulare BEAS-2B: Informazioni sulla coltura
- Vantaggi e svantaggi delle cellule BEAS-2B
- Applicazioni della linea cellulare BEAS-2B nella ricerca
- Cellule BEAS-2B: Pubblicazioni di ricerca
- Protocolli di coltura cellulare
1. Origine e caratteristiche generali delle cellule BEAS-2B
La prima cosa che si cerca in una linea cellulare è la sua origine e le sue caratteristiche generali. Qui imparerete le caratteristiche salienti e l'origine delle cellule epiteliali bronchiali umane BEAS-2B. Studierete: Che cos'è la linea cellulare polmonare BEAS-2B? Che tipo di cellule è il Beas 2B? Qual è l'origine delle cellule BEAS-2B?
- La linea cellulare dell'epitelio bronchiale BEAS-2B è stata sviluppata da un tessuto polmonare umano non canceroso nel 1988 dal gruppo di Curtis C. Harris [1].
- Le cellule BEAS-2B possiedono una morfologia simile a quella epiteliale.
HBEpC vs BEAS-2B
Le HBEpC sono cellule epiteliali bronchiali umane primarie. Simili alle BEAS-2B, sono normali cellule epiteliali bronchiali umane. Tuttavia, hanno una vita limitata rispetto alle BEAS-2B immortalizzate. Entrambe le linee cellulari possono essere utilizzate per studiare la biologia polmonare, la tossicologia e la modellazione delle malattie.
2.linea cellulare BEAS-2B: Informazioni sulla coltura
Le informazioni sulla coltura di una linea cellulare possono facilitare il vostro lavoro con essa. In questa sezione dell'articolo, imparerete tutte le nozioni di base per la coltura della linea cellulare polmonare BEAS-2B. In particolare, conosceremo: Qual è il tempo di raddoppio di BEAS-2B? Che cos'è il terreno di coltura BEAS-2B? La linea cellulare BEAS-2B è aderente? Come si coltivano le cellule BEAS-2B?
Punti chiave per la coltura delle cellule BEAS-2B
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Tempo di raddoppio: |
Il tempo di raddoppio della popolazione BEAS-2B è di circa 26 ore. |
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Aderenti o in sospensione: |
BEAS-2B è una linea cellulare aderente di tipo epiteliale. |
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Densità cellulare: |
La densità cellulare raccomandata per la linea cellulare BEAS-2B è da 1 a 2 ×104 cellule/cm2. Le cellule BEAS-2B aderenti vengono sciacquate con tampone fosfato salino e incubate con Accutase a temperatura ambiente per alcuni minuti. Dopo la dissociazione delle cellule, si aggiunge nuovo terreno di coltura e le cellule vengono raccolte mediante centrifugazione. Le cellule raccolte vengono accuratamente risospese e versate nella nuova fiasca per la crescita. |
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Terreno di crescita: |
Per la coltura della linea cellulare polmonare BEAS-2B si utilizza il terreno BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) contenente il 10% di siero fetale bovino. Il terreno deve essere sostituito ogni 2 o 3 giorni. |
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Condizioni di crescita: |
La coltura di BEAS-2B viene mantenuta a 37°C in un incubatore umidificato con un apporto continuo di CO2 al 5%. |
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Conservazione: |
Le fiale di cellule BEAS-2B congelate possono essere conservate nella fase vapore dell'azoto liquido o in un congelatore elettrico a una temperatura inferiore ai -150°C. |
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Processo e terreno di congelamento: |
Per congelare la linea di cellule polmonari BEAS-2B si utilizzano i terreni di congelamento CM-1 o CM-ACF. Le cellule vengono congelate consentendo una diminuzione della temperatura di solo 1°C al minuto per proteggere la vitalità cellulare. Questo tipo di metodo è chiamato congelamento lento. |
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Processo di scongelamento: |
Le colture BEAS-2B congelate o crioconservate vengono scongelate in un bagno d'acqua a 37°C contenente un agente antimicrobico per 40-60 secondi. Successivamente, le cellule vengono aggiunte al terreno di coltura e possono essere messe direttamente in coltura in nuove fiasche o centrifugate per rimuovere i componenti del terreno di coltura. Le cellule raccolte vengono quindi risospese e coltivate. Nel primo caso, il terreno di coltura viene rimosso dopo 24 ore. |
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Livello di biosicurezza: |
Per la manipolazione delle colture di BEAS-2B sono richiesti laboratori di livello di biosicurezza 1. |
3.vantaggi e svantaggi delle cellule BEAS-2B
Come altre linee cellulari, anche le cellule BEAS-2B presentano alcuni pro e contro. Alcuni di questi sono discussi di seguito.
Vantaggi
I vantaggi della linea cellulare BEAS-2B includono:
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Linea cellulare immortalata |
La linea cellulare epiteliale bronchiale umana BEAS-2B è stata immortalizzata. Pertanto, continua a crescere senza entrare in senescenza. Questa caratteristica delle cellule BEAS-2B elimina la necessità di ripetere l'estrazione di cellule epiteliali polmonari umane primarie con una vita più breve. |
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Facile da coltivare |
Le colture di BEAS-2B sono facilmente mantenibili. Le cellule crescono e si propagano senza sforzo in condizioni di coltura standard. Non ci sono requisiti di coltura delle cellule difficili o complicati. |
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Origine umana |
La linea cellulare BEAS-2B ha un'origine e una rilevanza umana. Pertanto, è un modello in vitro ideale per studiare le risposte, il comportamento e i processi delle cellule epiteliali delle vie aeree umane. |
Svantaggi
Gli svantaggi associati alla linea cellulare polmonare BEAS-2B sono:
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Cellule epiteliali polmonari umane trasformate |
Le cellule BEAS-2B sono trasformate con il virus Ad12-SV40 2B, che può modificare il loro comportamento e le loro risposte rispetto alle cellule epiteliali bronchiali originali derivate dal tessuto polmonare umano. |
4.applicazioni della linea cellulare BEAS-2B nella ricerca
La linea cellulare BEAS-2B offre diverse applicazioni nella ricerca biomedica. Alcune applicazioni comuni delle cellule BEAS-2B sono:
- Tossicologia: Le cellule BEAS-2B sono spesso utilizzate per studiare la genotossicità e la citotossicità di varie tossine, inquinanti ambientali e sostanze chimiche. I ricercatori impiegano questa linea cellulare epiteliale bronchiale per valutare gli effetti nocivi di queste sostanze sulla salute polmonare. Inoltre, studiano anche i meccanismi molecolari sottostanti. Ad esempio, uno studio condotto nel 2021 ha valutato la tossicità del cadmio metallico nella linea cellulare BEAS-2B. I risultati della ricerca hanno rivelato che il cadmio ha indotto la morte cellulare e il danno mitocondriale nella linea cellulare BEAS-2B attraverso la modulazione della via di segnalazione MAPK [2]. Un altro studio ha utilizzato la linea cellulare BEAS-2B per valutare la tossicità delle nanoparticelle di ossido di zinco in condizioni di stress ossidativo [3].
- Modellizzazione delle malattie respiratorie: La linea cellulare BEAS-2B è un ottimo strumento di ricerca e un modello in vitro per studiare le malattie respiratorie come la broncopneumopatia cronica ostruttiva (BPCO), l'asma, il cancro ai polmoni e le infezioni virali come la SARS-CoV-2. I ricercatori tendono a indurre la malattia. I ricercatori tendono a indurre condizioni correlate alla malattia nella linea cellulare BEAS-2B e a studiare i meccanismi cellulari e molecolari sottostanti. Questo aiuta a identificare potenziali bersagli farmacologici e a sviluppare terapie personalizzate. Una ricerca condotta nel 2022 ha utilizzato la linea cellulare BEAS-2B e ha studiato il ruolo degli estrogeni e dei loro recettori nell'infezione da SARS-CoV-2. I risultati hanno rivelato che una maggiore espressione del recettore estrogenico GPER1 riduce la carica virale del SARS-CoV-2 di BEAS-2B. Pertanto, può essere coinvolto nell'infezione o nella replicazione virale della SARS-CoV-2 [4].
5.cellule BEAS-2B: Pubblicazioni di ricerca
Di seguito sono riportati alcuni studi di ricerca interessanti e più citati che riguardano le cellule BEAS-2B.
Tossicità del grafene in cellule polmonari umane normali (BEAS-2B)
Questo studio è stato pubblicato nel 2011 sul Journal of Biomedical Nanotechnology. La ricerca proponeva che l'ossido di grafite inducesse apoptosi e citotossicità nella linea cellulare epiteliale bronchiale normale (BEAS-2B).
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato sul Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Questo studio ha esplorato il potenziale terapeutico della naringenina, un flavonoide, nella linea cellulare BEAS-2B. I risultati suggeriscono che la naringenina protegge le cellule polmonari BEAS-2B dalla tossicità indotta dal paraquat o dal danno ossidativo.
Questo studio è stato pubblicato su Inhalation Toxicology (2011). I ricercatori hanno valutato l'effetto tossico delle nanoparticelle magnetiche con rivestimenti di silice amorfa sulla linea cellulare BEAS-2B in vitro.
L'articolo pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) propone che l'acido ursodesossicolico possa ostacolare la migrazione anomala delle cellule epiteliali delle vie aeree e prevenire i danni causati dall'interazione tra la proteina spike SARS-CoV-2 e l'ACE-2. Pertanto, può contribuire a ripristinare lo strato basale dell'epitelio.
Questo studio è stato pubblicato nel 2019 sul Journal of Toxicology and Environmental Health. I risultati della ricerca affermano che l'esposizione cronica al radon può promuovere la carcinogenesi nelle cellule epiteliali bronchiali umane (BEAS-2B) attivando il microRNA-34a.
6.protocolli di coltura cellulare
Il protocollo di coltura cellulare per le cellule BEAS-2B è indicato qui.
- Sottocoltura di BEAS-2B: Questo documento vi aiuterà a conoscere i terreni di coltura e le procedure di subcoltura di BEAS-2B.
- Linea cellulare BEAS-2B: Questo sito web contiene tutte le informazioni di base necessarie per iniziare a lavorare con la linea cellulare BEAS-2B, compresi i suoi terreni e i protocolli per la gestione delle colture in proliferazione e in crioconservazione.
Riferimenti
- Han, X., et al., Le cellule epiteliali polmonari umane BEAS-2B presentano caratteristiche delle cellule staminali mesenchimali. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., Il cadmio induce l'apoptosi delle cellule BEAS-2B e il danno ai mitocondri attraverso la via di segnalazione MAPK. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., La tossicità delle nanoparticelle di ossido di zinco (ZnO) sulle cellule epiteliali bronchiali umane (BEAS-2B) è accentuata dallo stress ossidativo. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., La sovraespressione del recettore estrogenico GPER1 e il trattamento G1 riducono l'infezione da SARS-CoV-2 nelle cellule bronchiali BEAS-2B. Endocrinologia molecolare e cellulare, 2022. 558: p. 111775.