Cellule AGS - Esplorazione dell'adenocarcinoma gastrico Cellule AGS negli studi sul cancro
Le celluleAGS costituiscono una linea cellulare di adenocarcinoma gastrico umano ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica. In particolare, vengono impiegate per studiare la biologia del cancro gastrico, tra cui la crescita, lo sviluppo, la progressione e gli interventi terapeutici. Inoltre, viene utilizzata per studiare le interazioni ospite-patogeno.
Questo articolo discuterà i fondamenti delle cellule epiteliali gastriche AGS. In particolare, tratterà di:
- Caratteristiche generali e origine delle cellule AGS
- Informazioni sulla coltura della linea cellulare AGS
- Linea cellulare AGS: Vantaggi e limiti
- Applicazioni delle cellule AGS
- Pubblicazioni di ricerca sulla linea cellulare AGS
- Risorse per la linea cellulare AGS: Protocolli, video e altro
1.caratteristiche generali e origine delle cellule AGS
Conoscere l'origine e le caratteristiche generali di una linea cellulare è necessario prima di iniziare a lavorare con essa. Questa sezione tratterà quanto segue: Cosa sono le cellule AGS? Qual è l'origine delle cellule AGS? Qual è la morfologia della linea cellulare AGS?
- La linea cellulare AGS è stata derivata dal tessuto dello stomaco di una donna caucasica di 54 anni affetta da adenocarcinoma gastrico. È stata isolata nel 1979 [1].
- Le cellule AGS hanno una morfologia simile a quella epiteliale.
- Le cellule epiteliali gastriche AGS sono iperdiploidi. Il numero modale di cromosomi per le cellule AGS è 49, presente in quasi il 60% delle cellule. La poliploidia è presente anche in circa il 3,6% delle cellule.
2.informazioni sulla coltura della linea cellulare AGS
Per una corretta manipolazione e gestione di una linea cellulare, è necessario conoscere i concetti di base della coltura. In particolare, è necessario apprendere Qual è il tempo di raddoppiamento delle cellule AGS? Qual è il terreno di coltura delle cellule AGS? Come si effettua la subcoltura delle cellule AGS? Quali sono i terreni di coltura utilizzati per le cellule epiteliali gastriche AGS?
Punti chiave per la coltura delle cellule AGS
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Tempo di raddoppiamento: |
Il tempo di raddoppiamento delle cellule AGS varia da 24 a 48 ore. |
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Aderenti o in sospensione: |
Le cellule AGS sono aderenti. Crescono in monostrati. |
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Densità di semina: |
Le cellule AGS vengono seminate a una densità cellulare di 1 x104 cellule/cm2. A questa densità, le cellule formano un monostrato confluente in 3-5 giorni. Dopo aver rimosso il vecchio terreno, le cellule sono state risciacquate con 1 x PBS e incubate con la soluzione di dissociazione Accutase. Le cellule staccate sono state risospese nel terreno di coltura e centrifugate. Il pellet cellulare è stato nuovamente risospeso e, dopo il conteggio delle cellule AGS, è stato distribuito nella nuova fiasca per la crescita. |
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Terreno di crescita: |
Per la coltura delle cellule AGS si utilizza un terreno DMEM contenente il 10% di FBS, 4 mM di L-Glutammina, 4,5 g/L di glucosio, 1,5 g/L di NaHCO3 e 1,0 mM di piruvato di sodio. Il terreno di coltura deve essere sostituito da 2 a 3 volte alla settimana. |
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Condizioni di crescita: |
Le cellule AGS sono mantenute in un incubatore umidificato (a 37°C) con un apporto di CO2 del 5%. |
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Conservazione: |
Le cellule AGS congelate sono conservate in congelatori elettrici a temperatura inferiore a -150°C o in fase vapore di azoto liquido per un periodo di tempo più lungo. |
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Processo e terreno di congelamento: |
Per congelare le cellule AGS si utilizza il terreno CM-1 o CM-ACF. Il congelamento delle cellule avviene attraverso un processo di congelamento lento che consente un calo di temperatura di solo 1°C al minuto e protegge la vitalità delle cellule. |
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Processo di scongelamento: |
Le cellule epiteliali gastriche congelate vengono agitate rapidamente in un bagno d'acqua a 37°C per 40-60 secondi. Le cellule scongelate vengono risospese in terreno di coltura fresco e versate in nuove fiasche per la crescita. Dopo 24 ore di incubazione, il terreno di coltura viene rinnovato per rimuovere i componenti del terreno congelato. Al contrario, le cellule scongelate vengono centrifugate e gli elementi del terreno di coltura vengono rimossi. Quindi le cellule raccolte vengono nuovamente risospese e distribuite nella fiasca contenente il terreno di coltura. |
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Livello di biosicurezza: |
I laboratori di livello di biosicurezza 2 sono essenziali per la coltura delle cellule AGS. |
3.linea cellulare AGS: Vantaggi e limiti
Questa sezione dell'articolo illustra alcuni dei principali vantaggi e limiti associati alle cellule AGS.
Vantaggi
I principali vantaggi delle cellule epiteliali gastriche AGS sono:
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Facilità di coltura |
La linea cellulare di carcinoma gastrico AGS è facilmente mantenibile nei laboratori di coltura cellulare. Non presenta requisiti di coltura cellulare complicati e complessi. Inoltre, presenta buone caratteristiche di crescita, che la rendono una scelta ideale per lo studio della biologia del cancro gastrico. |
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Rilevanza per il cancro gastrico |
Le cellule AGS sono state derivate dall'adenocarcinoma gastrico umano e sono quindi ampiamente utilizzate per studiare la biologia del carcinoma gastrico e gli interventi terapeutici. |
Limitazioni
Le limitazioni associate alla linea cellulare AGS sono:
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Modello cellulare in vitro |
Le cellule AGS sono coltivate in laboratori di ricerca biomedica in condizioni artificiali. Pertanto, potrebbero non replicare completamente il microambiente del cancro gastrico in vivo e altre interazioni cellulari e molecolari. |
4.applicazioni delle cellule AGS
Le cellule AGS sono utilizzate specificamente per studiare la biologia del cancro gastrico. Hanno molte altre applicazioni promettenti in campo biomedico. Alcune delle interessanti applicazioni di ricerca delle cellule AGS sono:
- Studio del cancro gastrico: Le cellule AGS sono un eccellente strumento di ricerca per studiare i meccanismi cellulari e molecolari alla base della crescita, delle metastasi e dell'invasione del cancro gastrico. I ricercatori utilizzano anche cellule epiteliali gastriche AGS per studiare diversi processi cellulari, mutazioni genetiche e vie di segnalazione nello sviluppo del cancro gastrico. Uno studio di Oncology Reports (2019) ha rilevato che il microRNA-183-5p.1 favorisce la proliferazione, la migrazione e l'invasione delle cellule tumorali, inibendo la cascata di segnalazione Bcl 2/P53. Inoltre, per esercitare questi effetti, il microRNA riduce anche il gene TPM1. Pertanto, sia il microRNA che il TPM1 sono suggeriti come efficaci bersagli molecolari per lo sviluppo di terapie mirate contro il cancro gastrico [2].
- Screening dei farmaci: Le cellule AGS sono state comunemente utilizzate per lo screening di nuovi ed efficaci farmaci anti-cancro gastrico. I ricercatori valutano la citotossicità e l'efficacia di potenziali farmaci utilizzando la linea cellulare AGS. Sono stati condotti anche studi sull'identificazione di nuovi bersagli molecolari e sullo sviluppo di nuove terapie mirate per combattere il carcinoma gastrico. Una ricerca condotta nel 2021 ha utilizzato cellule di carcinoma gastrico AGS e ha studiato l'effetto terapeutico del farmaco paclitaxel. I risultati hanno rivelato che il paclitaxel induce una catastrofe mitotica, un meccanismo integrale di apoptosi o morte cellulare nelle cellule AGS. Inoltre, ha anche promosso l'autofagia nelle cellule di cancro gastrico [3].
- Interazioni ospite-patogeno: La linea cellulare AGS studia anche le interazioni ospite-patogeno. Ciò aiuta i ricercatori a comprendere i meccanismi e le risposte cellulari coinvolti in un'infezione. Ad esempio, uno studio condotto nel 2020 ha osservato che i piccoli RNA non codificanti presenti nelle vescicole della membrana esterna dell'Helicobacter pylori diminuiscono la secrezione di interleuchina 8 nelle cellule AGS umane [4].
5.pubblicazioni di ricerca sulla linea cellulare AGS
In questa sezione dell'articolo vengono presentate alcune pubblicazioni di ricerca interessanti e più citate che riguardano le cellule AGS.
Questo studio pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) propone che il salidroside, un composto naturale, induca l'autofagia protettiva e la morte cellulare nelle cellule epiteliali gastriche AGS attraverso la modulazione della via di segnalazione PI3K/AKT/mTOR.
Questo studio è stato pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Ha esplorato gli effetti antitumorali sinergici del polisaccaride di astragalo e del farmaco apatinib nelle cellule AGS. I risultati dello studio hanno rivelato che l'astragalo potenzia gli effetti antitumorali dell'apatinib attraverso la soppressione della segnalazione di AKT.
Questa ricerca pubblicata sul Journal of Ethnopharmacology (2018) propone che il curcuzedoalide, un composto naturale della pianta Curcuma zedoaria Roscoe, contribuisca al suo potenziale citotossico contro le cellule AGS.
Questa pubblicazione su Gene (2018) propone che l'upregulation di FOXA1 sopprima la proliferazione delle cellule di adenocarcinoma gastrico AGS e la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) e l'invasione.
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato sull'International Journal of Medical Microbiology nel 2020. In questo studio sono state impiegate cellule AGS per studiare le interazioni ospite-patogeno. I risultati hanno rivelato che l'Helicobacter pylori contiene alcuni RNA non codificanti nelle sue vescicole della membrana esterna che influenzano i livelli di IL-8 nelle cellule AGS.
6.risorse per la linea cellulare AGS: Protocolli, video e altro
Di seguito sono riportate alcune risorse relative alle cellule AGS.
- Protocollo di trasfezione delle cellule AGS: Questo video è una guida graduale all'apprendimento del protocollo di trasfezione delle cellule AGS epiteliali gastriche.
Il seguente link contiene il protocollo di coltura delle cellule AGS.
- Protocollo di coltura delle cellule AGS: Questo sito web contiene informazioni utili sui terreni cellulari AGS e sui protocolli di coltura cellulare. In breve, fornisce un protocollo per la subcoltura delle cellule epiteliali gastriche AGS e per la gestione delle colture AGS proliferanti e crioconservate.
- Subcoltura delle cellule AGS: Questo sito spiega in dettaglio la procedura di subcoltura delle cellule AGS.
Riferimenti
- Phuc, B.H., et al., Genomica comparativa di due ceppi vietnamiti di Helicobacter pylori, CHC155 da un paziente con cancro gastrico non cardiologico e VN1291 da un paziente con ulcera duodenale. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J., et al., Il miRNA-183-5p. 1 promuove la migrazione e l'invasione delle cellule AGS di cancro gastrico prendendo di mira TPM1 Rettifica in/10.3892/or. 2020.7902. Rapporti di oncologia, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., L'effetto del paclitaxel su apoptosi, autofagia e catastrofe mitotica nelle cellule AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
- Zhang, H., et al., Gli sncRNA impacchettati dalle vescicole della membrana esterna dell'Helicobacter pylori attenuano la secrezione di IL-8 nelle cellule umane. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.