Cellule AGS - Analisi delle cellule AGS dell'adenocarcinoma gastrico negli studi sul cancro
Le cellule AGS costituiscono una linea cellulare di adenocarcinoma gastrico umano ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica. In particolare, vengono impiegate per studiare la biologia del cancro gastrico, tra cui la crescita, lo sviluppo e la progressione del tumore, nonché gli interventi terapeutici. Inoltre, vengono utilizzate per indagare le interazioni ospite-patogeno.
- Terreno di coltura
- Per la coltura delle cellule AGS si utilizza un terreno DMEM contenente 10% di FBS, 4 mM di L-glutammina, 4,5 g/L di glucosio, 1,5 g/L di NaHCO3 e 1,0 mM di piruvato di sodio. Il terreno deve essere sostituito 2-3 volte alla settimana.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo di raddoppio delle cellule AGS varia da 24 a 48 ore.
- Tipo di crescita
- Le cellule AGS sono aderenti. Crescono in monostrati.
- Livello di biosicurezza
- BSL-2
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina AGS
- Caratteristiche generali e origine delle cellule AGS
- Informazioni sulla coltura della linea cellulare AGS
- Linea cellulare AGS: vantaggi e limiti
- Applicazioni delle cellule AGS
- 5. Pubblicazioni di ricerca sulla linea cellulare AGS
- Risorse per la linea cellulare AGS: protocolli, video e altro
- Domande frequenti
Caratteristiche generali e origine delle cellule AGS
Prima di iniziare a lavorare con una linea cellulare, è necessario conoscerne l'origine e le caratteristiche generali. Questa sezione tratterà i seguenti argomenti: Cosa sono le cellule AGS? Qual è l'origine delle cellule AGS? Qual è la morfologia della linea cellulare tumorale AGS?
- La linea cellulare AGS è stata derivata dal tessuto gastrico di una donna caucasica di 54 anni affetta da adenocarcinoma gastrico. È stata isolata nel 1979 [1].
- Le cellule AGS hanno una morfologia di tipo epiteliale.
- Le cellule AGS epiteliali gastriche sono iperdiploidi. Il numero cromosomico modale per le cellule AGS è 49, che si riscontra in quasi il 60% delle cellule. La poliploidia si verifica anche in circa il 3,6% delle cellule.
Informazioni sulla coltura della linea cellulare AGS
Per una corretta manipolazione e gestione di una linea cellulare, è necessario conoscerne i concetti di base relativi alla coltura. In particolare, è necessario apprendere: qual è il tempo di raddoppio delle cellule AGS? Qual è il terreno di coltura delle cellule AGS? Come si effettuano le subcolture delle cellule AGS? Quali terreni di congelamento vengono utilizzati per le cellule epiteliali gastriche AGS?
Punti chiave per la coltura delle cellule AGS
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio delle cellule AGS varia da 24 a 48 ore.
Aderenzi o in sospensione:
Le cellule AGS sono aderenti. Crescono in monostrati.
Densità di semina:
Le cellule AGS vengono seminate a una densità cellulare di 1 x 104 cellule/cm2. A questa densità, le cellule formano un monostrato confluente in 3-5 giorni. Dopo aver rimosso il vecchio terreno di coltura, le cellule vengono risciacquate con 1 x PBS e incubate con la soluzione di dissociazione Accutase. Le cellule distaccate sono state risospese in terreno di coltura e centrifugate. Il pellet cellulare è stato nuovamente risospeso e, dopo il conteggio delle cellule AGS, queste sono state trasferite in una nuova fiasca per la crescita.
Terreno di crescita:
Per la coltura delle cellule AGS si utilizza un terreno DMEM contenente 10% di FBS, 4 mM di L-glutammina, 4,5 g/L di glucosio, 1,5 g/L di NaHCO3 e 1,0 mM di piruvato di sodio. Il terreno deve essere sostituito 2-3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le cellule AGS vengono conservate in un incubatore umidificato (a una temperatura di 37 °C) con un apporto di CO2 al 5%.
Conservazione:
Le cellule AGS congelate vengono conservate in congelatori elettrici a una temperatura inferiore a -150 °C o nella fase vapore dell'azoto liquido per un periodo più lungo.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Per congelare le cellule AGS si usa il terreno CM-1 o CM-ACF. Il congelamento delle cellule avviene tramite un processo di congelamento lento che permette un calo di temperatura di solo 1 °C al minuto e protegge la vitalità delle cellule.
Processo di scongelamento:
Le cellule epiteliali gastriche congelate vengono agitate rapidamente in un bagno d'acqua a 37 °C per 40-60 secondi. Le cellule scongelate vengono risospese in terreni di coltura freschi e trasferite in nuove fiasche per la crescita. Dopo 24 ore di incubazione, il terreno di coltura viene rinnovato per rimuovere i componenti del terreno di congelamento. Al contrario, le cellule scongelate vengono centrifugate e gli elementi del terreno di congelamento vengono rimossi. Quindi le cellule raccolte vengono nuovamente risospese e distribuite nella fiasca contenente il terreno di coltura.
Livello di biosicurezza:
Per la coltura delle cellule AGS sono indispensabili laboratori con livello di biosicurezza 2.
Linea cellulare AGS: vantaggi e limiti
Questa sezione dell'articolo illustrerà alcuni dei principali vantaggi e limiti associati alle cellule AGS.
Vantaggi
I principali vantaggi delle cellule epiteliali gastriche AGS sono:
Facile da coltivare
La linea cellulare AGS del carcinoma gastrico è facilmente mantenibile nei laboratori di coltura cellulare. Non presenta requisiti di coltura cellulare complicati e particolari. Inoltre, mostra buone caratteristiche di crescita, rendendola una scelta ideale per lo studio della biologia del cancro gastrico.
Rilevanza per il cancro gastrico
Le cellule AGS derivano da un adenocarcinoma gastrico umano, il che le rende ampiamente utilizzate per lo studio della biologia del carcinoma gastrico e degli interventi terapeutici.
Limiti
I limiti associati alla linea cellulare AGS sono:
Modello cellulare in vitro
Le cellule AGS vengono coltivate in laboratori di ricerca biomedica in condizioni artificiali. Pertanto, potrebbero non replicare completamente il microambiente del cancro gastrico in vivo e altre interazioni cellulari e molecolari.
Applicazioni delle cellule AGS
Le cellule AGS sono utilizzate specificamente per studiare la biologia del cancro gastrico. Hanno molte altre applicazioni promettenti nel campo biomedico. Alcune delle interessanti applicazioni di ricerca delle cellule AGS sono:
- Studio del cancro gastrico: le cellule AGS sono un eccellente strumento di ricerca per indagare i meccanismi cellulari e molecolari alla base della crescita, della metastasi e dell'invasione del cancro gastrico. I ricercatori utilizzano anche le cellule epiteliali gastriche AGS per studiare diversi processi cellulari, mutazioni genetiche e vie di segnalazione nello sviluppo del cancro gastrico. Uno studio pubblicato su Oncology Reports (2019) ha scoperto che il microRNA-183-5p.1 favorisce la proliferazione, la migrazione e l'invasione delle cellule tumorali inibendo la cascata di segnalazione Bcl 2/P53. Inoltre, per esercitare questi effetti, esso sottoregola anche il gene TPM1. Pertanto, sia il microRNA che il TPM1 sono indicati come efficaci bersagli molecolari per lo sviluppo di terapie mirate contro il cancro gastrico [2].
- Screening farmacologico: le cellule AGS sono state comunemente utilizzate per lo screening di nuovi ed efficaci farmaci anti-carcinoma gastrico. I ricercatori valutano la citotossicità e l'efficacia di potenziali farmaci utilizzando la linea cellulare AGS. Sono stati inoltre condotti studi sull'identificazione di nuovi bersagli molecolari e sullo sviluppo di nuove terapie mirate per combattere i carcinomi gastrici. Una ricerca condotta nel 2021 ha utilizzato cellule tumorali gastriche AGS e ha studiato l'effetto terapeutico del farmaco paclitaxel. I risultati hanno rivelato che il paclitaxel induce una catastrofe mitotica, un meccanismo fondamentale dell'apoptosi o morte cellulare nelle cellule AGS. Inoltre, ha anche promosso l'autofagia nelle cellule tumorali gastriche [3].
- Interazioni ospite-patogeno: La linea cellulare tumorale AGS studia anche le interazioni ospite-patogeno. Ciò aiuta i ricercatori a comprendere i meccanismi cellulari e le risposte coinvolte in un'infezione. Ad esempio, uno studio condotto nel 2020 ha osservato che piccoli RNA non codificanti presenti nelle vescicole della membrana esterna dell'Helicobacter pylori riducono la secrezione di interleuchina 8 nelle cellule AGS umane [4].
5. Pubblicazioni scientifiche sulla linea cellulare AGS
Questa sezione dell'articolo tratterà alcune pubblicazioni di ricerca interessanti e tra le più citate che riguardano le cellule AGS.
Questo studio pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) ha ipotizzato che il salidroside, un composto naturale, induca l'autofagia protettiva e la morte cellulare nelle cellule epiteliali gastriche AGS attraverso la modulazione della via di segnalazione PI3K/AKT/mTOR.
Questo studio è stato pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Ha esplorato gli effetti antitumorali sinergici del polisaccaride di astragalo e del farmaco apatinib nelle cellule AGS. I risultati dello studio hanno rivelato che l'astragalo potenzia gli effetti antitumorali dell'apatinib attraverso la soppressione della segnalazione AKT.
Questa ricerca, pubblicata sul Journal of Ethnopharmacology (2018), ha suggerito che la curcuzedoalide, un composto naturale della pianta Curcuma zedoaria Roscoe, contribuisce al suo potenziale citotossico contro le cellule AGS.
Questa pubblicazione su Gene (2018) ha suggerito che la sovraregolazione di FOXA1 sopprime la proliferazione delle cellule di adenocarcinoma gastrico AGS, la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) e l'invasione.
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato sull'International Journal of Medical Microbiology nel 2020. In questo studio, le cellule AGS sono state impiegate per studiare le interazioni ospite-patogeno. I risultati hanno rivelato che l'Helicobacter pylori contiene alcuni RNA non codificanti nelle sue vescicole della membrana esterna che influenzano i livelli di IL-8 nelle cellule AGS.
Risorse per la linea cellulare AGS: protocolli, video e altro
Di seguito sono riportate alcune risorse relative alle cellule AGS.
- Protocollo di trasfezione delle cellule AGS: questo video è una guida passo passo per imparare il protocollo di trasfezione delle cellule epiteliali gastriche AGS.
Il link seguente contiene il protocollo di coltura delle cellule AGS.
- Protocollo di coltura delle cellule AGS: questo sito web contiene informazioni utili sui terreni di coltura delle cellule AGS e sui protocolli di coltura cellulare. In breve, fornisce un protocollo per la subcoltura delle cellule epiteliali gastriche AGS e la gestione delle colture AGS proliferanti e crioconservate.
- Subcoltura delle cellule AGS: questo sito spiega in dettaglio la procedura di subcoltura per le cellule AGS.
Riferimenti
- Phuc, B.H., et al., Genomica comparativa di due ceppi vietnamiti di Helicobacter pylori, CHC155 proveniente da un paziente affetto da cancro gastrico non cardiaco e VN1291 proveniente da un paziente affetto da ulcera duodenale. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J., et al., miRNA‑183‑5p. 1 promuove la migrazione e l'invasione delle cellule AGS del cancro gastrico prendendo di mira TPM1. Correzione in /10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., L'effetto del paclitaxel sull'apoptosi, l'autofagia e la catastrofe mitotica nelle cellule AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
- Zhang, H., et al., Gli sncRNA incapsulati nelle vescicole della membrana esterna dell'Helicobacter pylori attenuano la secrezione di IL-8 nelle cellule umane. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.