Cellule U87MG - Ricerca sul glioblastoma con l’utilizzo delle cellule U87MG e il suo impatto sugli studi sul cancro al cervello
La linea cellulare U-87 MG, derivata da un glioblastoma primario umano, è ampiamente utilizzata nella ricerca biologica. In particolare, queste cellule trovano impiego nei campi delle neuroscienze e dell’immuno-oncologia.
- Terreno di coltura
- La linea cellulare U-87 MG viene coltivata in EMEM (Eagle's minimal essential medium) arricchito con 1,0 g/L di L-glucosio, 2,0 mM di L-glutammina, 2,2 g/L di NaHCO₃, 1% di NEAA, 1 mM di piruvato di sodio e una soluzione al 10% di FBS. Il terreno va rinnovato ogni 2-3 giorni.
- Tempo di raddoppio
- Le cellule U 87 MG hanno un tempo di raddoppio della popolazione compreso tra 18 e 38 ore.
- Tipo di crescita
- La U 87 MG è una linea cellulare aderente. Le cellule presentano una forma allungata e crescono in monostrato.
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina U-87 MG
- Caratteristiche generali e origine della linea cellulare U-87 MG
- Informazioni sulla coltura delle cellule U-87 MG
- Vantaggi e svantaggi delle cellule U-87 MG
- Applicazioni di ricerca che utilizzano le cellule U-87 MG
- Ordina oggi stesso la tua linea cellulare di glioma U-87 MG
- Linea cellulare U-87 MG: pubblicazioni di ricerca
- Risorse per le cellule U-87 MG: protocolli, video e altro
- Approfondimenti sulla ricerca sul glioma U-87 MG: domande frequenti
- Riferimenti
- Domande frequenti
Caratteristiche generali e origine della linea cellulare U-87 MG
Questa sezione illustrerà l’origine e le caratteristiche generali della linea cellulare U87. Imparerete: Cosa sono le cellule U-87 MG? Da dove proviene la cellula U87? Qual è la forma completa di U-87 MG? Quanto sono grandi le cellule U87? Qual è la morfologia della linea cellulare U87?
- La linea cellulare U87 è una linea cellulare di glioblastoma, astrocitoma. È stata istituita nel 1966 presso l’Università di Uppsala. Le cellule sono state ottenute da un uomo caucasico di 44 anni affetto da glioblastoma. Questa linea cellulare è formalmente denominata U 87 MG, che sta per Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Le cellule U 87 MG presentano una morfologia simile a quella delle cellule epiteliali.
- Le dimensioni delle cellule U 87 MG variano da 12 a 14 µm di diametro.
- Questa linea cellulare di glioblastoma umano è ipodiploide e presenta un numero cromosomico modale di 44 in circa il 48% della popolazione cellulare. Tuttavia, nel 5,9% della popolazione cellulare sono presenti anche ploidi più elevati.
Informazioni sulla coltura delle cellule U-87 MG
Prima di lavorare con le cellule U 87 MG, è necessario conoscere i seguenti punti chiave relativi alla coltura di queste cellule di glioblastoma. In particolare, è necessario sapere: qual è il tempo di raddoppio della popolazione delle cellule U 87 MG? Quale terreno di coltura viene utilizzato per le cellule U87? Qual è la densità di semina della linea cellulare U-87 MG?
Punti chiave per la coltura delle cellule U-87 MG
Tempo di raddoppio della popolazione:
Le cellule U 87 MG hanno un tempo di raddoppio della popolazione compreso tra 18 e 38 ore.
Aderenzi o in sospensione:
La U 87 MG è una linea cellulare aderente. Le cellule hanno una forma allungata e crescono in monostrato.
Densità di semina:
Si raccomanda di seminare la linea cellulare di glioblastoma U 87 MG a una densità cellulare di 1 x 10⁴ cellule/cm². Le cellule U87 aderenti vengono lavate con PBS 1x e incubate con soluzione di Accutase. Successivamente, le cellule dissociate vengono centrifugate e recuperate. Le cellule vengono accuratamente risospese e aggiunte in nuove fiasche contenenti terreno di coltura.
Terreno di coltura:
La linea cellulare U 87 MG viene coltivata in EMEM (Eagle's minimal essential medium) arricchito con 1,0 g/L di L-glucosio, 2,0 mM di L-glutammina, 2,2 g/L di NaHCO₃, 1% di NEAA, 1 mM di piruvato di sodio e una soluzione al 10% di FBS. Il terreno va rinnovato ogni 2-3 giorni.
Condizioni di crescita:
Per una crescita ottimale, le cellule U-87 MG richiedono un incubatore umidificato con un'alimentazione di CO₂ al 5% e una temperatura di 37 °C.
Conservazione:
Le cellule U87 vengono conservate nella fase vapore dell’azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150 °C per mantenere la massima vitalità delle cellule di glioblastoma.
Processo di congelamento e terreno:
I terreni di congelamento CM-1 o CM-ACF sono adatti al congelamento delle cellule U 87 MG. Si raccomanda un processo di congelamento lento, poiché previene lo shock termico delle cellule e ne protegge la vitalità.
Processo di scongelamento:
Le fiale congelate della linea cellulare U-87 MG vengono scongelate in un bagno d’acqua a 37 °C. Alle cellule vengono aggiunti i terreni di coltura, vengono risospese e trasferite in nuove fiasche per la coltura. In alternativa, le cellule U87 possono essere centrifugate per rimuovere il mezzo di congelamento e quindi coltivate.
Livello di biosicurezza:
Per la manipolazione delle colture cellulari U-87 MG è richiesto il livello di biosicurezza 1.
Vantaggi e svantaggi delle cellule U-87 MG
Quando pensiamo a una linea cellulare, la prima cosa che ci viene in mente è: quali sono i vantaggi dell’utilizzo delle cellule U-87 MG? Quali sono gli svantaggi delle cellule U-87?
Vantaggi
Le linee cellulari U-87 MG sono ampiamente utilizzate nella ricerca. Alcuni dei vantaggi associati a questa linea cellulare sono:
Vantaggi
- Facili da coltivare: le cellule U-87 MG sono facili da mantenere in coltura. Non richiedono condizioni di coltura particolarmente complesse o esigenti.
- Omogeneità: la U-87 MG è una linea cellulare omogenea. La maggior parte delle cellule di una popolazione possiede lo stesso corredo genetico e condivide quindi caratteristiche simili. Queste cellule vengono utilizzate per lo studio dei processi cellulari, lo screening farmacologico e i test.
- Ben caratterizzata: questa linea cellulare di glioblastoma è ben caratterizzata in termini di caratteristiche di crescita, morfologia ed espressione genica, il che la rende un prezioso strumento di ricerca.
Svantaggi
- Applicabilità limitata: la U-87 MG è una linea cellulare di glioblastoma, pertanto le sue applicazioni sono limitate principalmente allo studio dei glioblastomi e dei meccanismi molecolari sottostanti. Potrebbe non essere adatta allo studio di altri tipi di tumore.
Applicazioni di ricerca con le cellule U-87 MG
La linea cellulare di glioblastoma U87MG è ampiamente utilizzata negli studi sul cancro, in particolare nella ricerca sul glioblastoma. Alcune delle applicazioni di ricerca delle cellule U 87 MG sono:
- Ricerca sulla biologia del cancro: la linea cellulare U87 viene utilizzata per studiare la crescita e lo sviluppo del cancro, i meccanismi molecolari sottostanti, le vie di segnalazione e il microambiente tumorale. Uno studio pubblicato nel 2020 ha utilizzato un modello in vitro di glioblastoma, la linea cellulare U-87 MG, per studiare il gene BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) come bersaglio terapeutico. I risultati hanno dimostrato che il gene BMAL1 inibisce la proliferazione, la migrazione e l’invasione delle cellule del glioblastoma sopprimendo l’espressione genica della ciclina B1, della metalloproteinasi-9 e della fosfo-AKT [1]. Un’altra ricerca condotta nel 2019 ha utilizzato la linea cellulare U87 e ha dimostrato che la sottoregolazione dell’espressione del fattore di trascrizione LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor) può aumentare la radiosensibilità delle cellule di glioma attraverso la sovraregolazione della via FOXO-1. Il LITAF è noto anche come gene 7 indotto da p53 (PIG7) [2].
- Scoperta e sviluppo di farmaci: le cellule U-87 MG possono essere utilizzate per lo screening e la sperimentazione di farmaci, consentendo ai ricercatori di identificare nuovi potenziali farmaci antitumorali e di valutarne l’efficacia e la tossicità. Una ricerca ha utilizzato la linea cellulare di glioblastoma U-87 MG per valutare il potenziale antitumorale e antiossidante dell’estratto di Inula helenium (L.) [3]. Analogamente, un’altra pubblicazione ha menzionato l’uso della linea cellulare U-87 per testare l’effetto citotossico e apoptotico di estratti vegetali [4]. Inoltre, una ricerca pubblicata nel 2018 ha studiato l’effetto citotossico degli alcaloidi sesquiterpenici estratti dalle piante del genere Nuphar sulle linee cellulari U-87 MG sensibili e resistenti ai farmaci [5].
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Linea cellulare U-87 MG: Pubblicazioni scientifiche
Di seguito sono riportate alcune importanti pubblicazioni di ricerca che trattano della linea cellulare U87 MG.
Questo articolo, pubblicato su Neuroreport nel 2018, ha ipotizzato che l’ipossia possa aumentare la migrazione e l’invasività delle cellule del glioblastoma umano regolando la via di segnalazione PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Questo studio è stato pubblicato su *Frontiers in Pharmacology* nel 2020. I risultati della ricerca indicano che un flavonoide, l’eriodictiolo, esercita effetti antitumorali sulla linea cellulare U87 e inibisce la proliferazione cellulare e le metastasi. Il composto esercita le sue proprietà antitumorali modulando la via PI3K/Akt/NF-κB.
Questa ricerca, pubblicata su *Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine* (2018), suggerisce che una formula a base di erbe cinesi denominata pillola Xihuang sia in grado di indurre l’apoptosi nelle cellule U87 agendo sulla cascata Akt/mTOR/FOXO1 attivata dai ROS.
LITAF aumenta la radiosensibilità delle cellule di glioma umano attraverso la via FoxO1
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato sulla rivista *Cellular and Molecular Neurobiology* nel 2019. Lo studio ha ipotizzato che un fattore di trascrizione, LITAF, riduca l’espressione genica e aumenti la radiosensibilità delle cellule di glioma regolando la via di segnalazione FOXO-1.
Questo articolo è stato pubblicato su *Biointerface Research in Applied Chemistry* (2019). I ricercatori hanno utilizzato cellule U87MG per studiare l’effetto citotossico delle nanoparticelle di PLGA caricate con curcumina.
Risorse per le cellule U-87 MG: protocolli, video e altro
La linea cellulare di glioblastoma U87MG è utilizzata in molti laboratori di ricerca sul cancro. Alcune risorse relative a questa linea cellulare sono:
- Trasfezione della linea cellulare U87: questo documento illustra un protocollo di trasfezione per le cellule U87MG.
- Trasfezione della linea cellulare U 87 MG: questo video è un tutorial che spiega passo dopo passo il protocollo di trasfezione delle cellule U87.
Di seguito è riportata la risorsa relativa al protocollo di coltura cellulare delle cellule U87:
- Cellule U87 MG: questo link contiene informazioni di base sulla linea cellulare U87 MG. Include brevi protocolli per la divisione, il congelamento e lo scongelamento delle cellule.
Approfondimenti sulla ricerca sul glioma U87 MG: Domande frequenti
Le linee cellulari di glioma, come le cellule di glioblastoma U87, sono cellule coltivate derivate da gliomi umani utilizzate ampiamente nella ricerca sul cancro per studiare la biologia del tumore, la genetica e la risposta ai farmaci. Servono come modelli per comprendere il comportamento del tumore e testare le strategie terapeutiche.
Una linea cellulare isogenica si riferisce a cellule derivate da una singola cellula, garantendo l'uniformità genetica. Nella ricerca sul glioma, le linee isogeniche forniscono un modello coerente per lo studio dei cambiamenti genetici e del loro impatto sulla crescita del tumore e sulla risposta ai trattamenti.
Il profilo del DNA delle linee cellulari di glioma è fondamentale per identificare le alterazioni genetiche, comprendere l'evoluzione del tumore e sviluppare terapie mirate. Aiuta a classificare i tumori in base a marcatori genetici come le mutazioni IDH1.
Il siero nei terreni di coltura cellulare fornisce fattori di crescita, ormoni e nutrienti essenziali alle cellule di glioma. Tuttavia, la sua composizione può influire sulla riproducibilità sperimentale, motivo per cui si ricorre sempre più spesso a condizioni di assenza di siero o di siero definito.
La citotossicità cellulare nelle linee cellulari di glioma viene valutata utilizzando saggi come la citometria a flusso, che misura la salute, la vitalità e la morte delle cellule dopo il trattamento con farmaci o cellule immunitarie come le cellule natural killer (NK).
La citotossicità delle cellule NK svolge un ruolo fondamentale nella ricerca sul trattamento del glioma, poiché le cellule NK possono riconoscere e uccidere le cellule tumorali senza una precedente sensibilizzazione. Lo studio delle interazioni delle cellule NK con le cellule di glioma aiuta a sviluppare strategie per migliorare l'eliminazione del tumore mediata dalle cellule NK.
Il tumore di origine fornisce un contesto sull'ambiente biologico originale e sulle caratteristiche del tumore. La comprensione di questo aspetto aiuta a correlare i risultati degli studi sulle linee cellulari con il comportamento effettivo del tumore e la prognosi del paziente.
La microscopia elettronica offre una visualizzazione dettagliata delle strutture cellulari e subcellulari nelle linee cellulari di glioma, fondamentale per esaminare la morfologia cellulare, lo stato di salute degli organelli e i cambiamenti in seguito ai trattamenti.
Il ligando NKG2D è espresso sulle cellule tumorali e si lega al recettore NKG2D delle cellule NK, innescando una risposta citotossica. Lo studio di questa interazione aiuta a comprendere e potenzialmente a potenziare le risposte immunitarie contro il glioma.
i modelli di coltura cellulare in 3D imitano più accuratamente il microambiente tumorale, fornendo una migliore comprensione della crescita, della migrazione e della resistenza ai farmaci del glioma. Questa tecnica è fondamentale per studi di oncologia traslazionale più rilevanti.
Riferimenti
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 inibisce la proliferazione, la migrazione e l'invasione delle cellule U87MG attraverso la downregolazione della ciclina B1, della fosfo-AKT e della metalloproteinasi-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF aumenta la radiosensibilità delle cellule di glioma umano attraverso la via FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): pagg. 871-882.
- Koc, K., et al., Attività antiossidanti e antitumorali dell’estratto di Inula helenium (L.) nella linea cellulare umana di glioblastoma U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): pp. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh e A. Ghasempour, Citotossicità e induzione dell’apoptosi nelle cellule di carcinoma mammario, carcinoma cutaneo e glioblastoma mediante estratti vegetali. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): pp. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Citotossicità degli alcaloidi sesquiterpenici delle piante del genere Nuphar nei confronti di linee cellulari sensibili e resistenti ai farmaci. Food Funct, 2018. 9(12): pp. 6279-6286.