Cellule PANC1: alla scoperta del loro ruolo cruciale nella ricerca sul cancro al pancreas
PANC1 è una linea cellulare tumorale epitelioide umana comunemente utilizzata nella ricerca sul cancro. Viene impiegata come modello in vitro per studiare la biologia del cancro al pancreas, la carcinogenesi e i meccanismi cellulari e molecolari sottostanti, nonché per valutare potenziali terapie antitumorali.
- Terreno di coltura
- Per la coltura delle cellule PANC1 si utilizza DMEM con siero fetale bovino (FBS) al 10%, 4,5 g/L di glucosio, 4 mM di L-glutammina, 1,5 g/L di NaHCO₃ e 1,0 mM di piruvato di sodio. Il terreno di coltura delle cellule PANC1 deve essere sostituito 2-3 volte alla settimana.
- Tempo di raddoppio
- La linea cellulare pancreatica PANC 1 presenta tassi di proliferazione moderati con un tempo di raddoppio di 25,83 ± 2,03 ore.
- Tipo di crescita
- PANC1 è una linea cellulare epiteliale aderente.
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
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Caratteristiche generali e origine della linea cellulare PANC1
Questa sezione dell'articolo fornirà le nozioni di base sulla linea cellulare PANC1. Ad esempio: cosa significa PANC-1? Cosa sono le cellule PANC-1? Qual è l'origine di PANC1? Qual è la morfologia di PANC 1? Qual è la dimensione delle cellule PANC 1?
- La linea cellulare PANC1, derivata da un tumore al pancreas, è stata ottenuta da un uomo caucasico di 56 anni affetto da carcinoma del dotto pancreatico. Questa linea cellulare tumorale continua è stata istituita da Michael Lieber e colleghi nel 1975 [1].
- Le cellule PANC1 presentano scarse capacità di differenziazione, ma sono potenzialmente in grado di metastatizzare.
- Queste cellule tumorali pancreatiche umane presentano una morfologia simile a quella delle cellule epiteliali.
- La linea PANC 1 presenta un cariotipo ipertriploide. Il numero modale di cromosomi riportato per la linea cellulare PANC 1 è 63. Il genoma presenta un piccolo cromosoma ad anello e tre cromosomi marcatori distinti.
Informazioni sulla coltura cellulare PANC1
Questa sezione è interamente dedicata alle informazioni sulla coltura cellulare delle cellule PANC1. Conoscere le condizioni di coltura di una linea cellulare può semplificarne la gestione. Tratteremo i seguenti argomenti: qual è il tempo di raddoppio delle cellule PANC-1? Come si coltivano le cellule PANC1? Le cellule PANC-1 sono aderenti? Qual è il terreno di coltura delle cellule PANC-1?
Punti chiave per la coltura delle cellule PANC1
Tempo di raddoppio:
La linea cellulare pancreatica PANC-1 presenta tassi di proliferazione moderati con un tempo di raddoppio di 25,83 ± 2,03 ore.
Aderenzi o in sospensione:
PANC-1 è una linea cellulare epiteliale aderente.
Densità di semina:
Le cellule PANC1 vengono seminate a una densità di 1 x 10⁴ cellule/cm². Per la semina, le cellule vengono lavate con PBS (soluzione salina tamponata con fosfato) e incubate con una soluzione di dissociazione, ovvero Accutase, per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Le cellule distaccate vengono risospese in terreno fresco e centrifugate. Il pellet cellulare viene accuratamente risospeso nel terreno di coltura e le cellule vengono trasferite in nuove fiasche per la crescita.
Terreno di crescita:
Per la coltura delle cellule PANC1 si utilizza DMEM con siero fetale bovino (FBS) al 10%, 4,5 g/L di glucosio, 4 mM di L-glutammina, 1,5 g/L di NaHCO₃ e 1,0 mM di piruvato di sodio.
Il terreno di coltura delle cellule PANC1 deve essere sostituito 2-3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le cellule PANC1 vengono coltivate in un incubatore umidificato a una temperatura di 37 °C e con una concentrazione di CO₂ del 5%.
Conservazione:
Le cellule PANC vengono conservate nella fase vapore dell’azoto liquido o in un congelatore elettrico ultra-basso (a una temperatura inferiore a -150 °C) per preservarne la vitalità.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Le cellule PANC1 vengono congelate nei terreni di coltura CM-1 o CM-ACF. Per il congelamento delle cellule PANC1 viene utilizzato un metodo di congelamento lento che consente un abbassamento della temperatura di solo 1 °C al minuto.
Processo di scongelamento:
Le cellule vengono scongelate in un bagno d’acqua a 37 °C fino a quando rimane solo un piccolo grumo di ghiaccio. Le cellule scongelate vengono risospese nel terreno di coltura e centrifugate per rimuovere i residui del terreno di congelamento. Il pellet cellulare viene accuratamente risospeso e le cellule vengono distribuite a una densità di 5 x 10⁴ cellule/cm² in nuove fiasche per la coltura. Le cellule PANC1 impiegano circa 48 ore per aderire.
Livello di biosicurezza:
Per la coltura delle cellule PANC1 si raccomanda il livello di biosicurezza 1.
Vantaggi delle cellule PANC1
Ogni linea cellulare presenta determinati pro e contro che la distinguono dalle altre. Questa sezione illustrerà i vantaggi e gli svantaggi associati alla linea cellulare PANC1.
Vantaggi
I principali vantaggi delle cellule PANC1 sono:
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Modello in vitro del cancro al pancreas
La linea PANC1 riproduce le caratteristiche dell’adenocarcinoma del dotto pancreatico umano. Pertanto, viene utilizzata come modello in vitro per studiare lo sviluppo e la crescita del tumore pancreatico, nonché i relativi meccanismi molecolari.
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Mutazioni genetiche
Le cellule PANC1 presentano numerose mutazioni riscontrate nei tumori pancreatici, il che le rende preziose per lo studio dei percorsi molecolari correlati alla malattia. Tra queste mutazioni figurano principalmente PANC1 KRAS e PANC1 P53.
PANC1
La linea cellulare tumorale umana PANC1 viene spesso utilizzata nella ricerca sul cancro al pancreas. Di seguito sono riportati alcuni ambiti di ricerca comuni.
- Biologia del cancro: le cellule PANC1 vengono utilizzate per studiare lo sviluppo e la crescita del cancro al pancreas, nonché molti altri processi cellulari, tra cui la proliferazione, l’invasione, la migrazione e la morte cellulare. Inoltre, vengono studiati anche diversi percorsi di segnalazione cellulare, mutazioni genetiche e meccanismi molecolari coinvolti nella carcinogenesi pancreatica. Uno studio condotto nel 2018 ha utilizzato le cellule PANC1 e ha scoperto che l’omeprazolo inibisce l’invasione delle cellule tumorali pancreatiche attraverso l’induzione di JNK mediata dal recettore degli idrocarburi arilici. L’attivazione di JNK, a sua volta, modula altri geni cellulari e provoca l’inibizione dei fattori pro-oncogenici [3]. Analogamente, un altro studio ha rivelato che le vie di segnalazione AKT ed ERK sono coinvolte nella proliferazione, nell’invasione e nella migrazione delle cellule PANC1 del cancro al pancreas umano [4].
- Screening farmacologico: la linea cellulare PANC1 costituisce uno strumento prezioso per lo screening di potenziali farmaci o terapie antitumorali. I ricercatori solitamente analizzano la resistenza ai farmaci e studiano i meccanismi d’azione dei potenziali candidati farmacologici. Una ricerca condotta da Samira Alipour e colleghi nel 2022 ha suggerito che l’estratto di Portulaca oleracea eserciti effetti apoptotici e citotossici sulle cellule PANC1 e possa quindi rappresentare un potenziale trattamento per il cancro al pancreas. La pianta esercita questi effetti antitumorali regolando i geni CDK1 e P53 [5].
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Pubblicazioni sulle cellule PANC1
In questa sezione vengono citate alcune pubblicazioni di ricerca interessanti e spesso citate che trattano delle cellule PANC1.
Questa ricerca è stata pubblicata nel 2019 su una rivista internazionale intitolata “Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology”. Lo studio ha suggerito che le nanoparticelle d’oro ottenute tramite sintesi verde dalla pianta Scutellaria barbata esercitino effetti antitumorali contro la linea cellulare del cancro al pancreas PANC1.
Questa pubblicazione apparsa su *Toxicology and Environmental Health Sciences* (2020) ha esplorato il potenziale antitumorale dell’estratto di *Delonix regia* e delle nanoparticelle d’argento su due linee cellulari tumorali umane, ovvero PANC1 e MCF7.
Sintesi di nanoparticelle d’oro a partire dalle foglie di Panax notoginseng e loro attività antitumorale sulle linee cellulari PANC-1 del cancro al pancreas
Questo articolo è stato pubblicato nel 2019 sulla rivista internazionale *Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology*. Lo studio ha esaminato gli effetti terapeutici delle nanoparticelle d’oro sintetizzate dall’estratto delle foglie della pianta *Panax notoginseng* contro la linea cellulare PANC1 del cancro al pancreas.
Questo studio è stato pubblicato su *Nature Scientific Reports* (2020). In questo lavoro, i ricercatori hanno generato un peptide, il KS-58, che inibisce selettivamente la mutazione KRAS G12D delle cellule PANC-1 in vitro.
Questa ricerca è stata pubblicata sulla rivista *Biomedicine & Pharmacotherapy* nel 2018. Lo studio ha dimostrato che l’isoramnetina, un flavonoide, inibisce la proliferazione delle cellule PANC-1 tramite l’arresto della fase S del ciclo cellulare.
Questo studio, pubblicato sulla rivista Oncoscience (2014), ha suggerito che un nuovo inibitore di LIMK2 sopprime la crescita tumorale in un modello murino di xenotrapianto PANC-1.
Risorse per la linea cellulare PANC-1: protocolli, video e altro
Di seguito sono elencate alcune risorse disponibili sulle cellule PANC 1.
- Trasfezione di PANC-1: questo video è un tutorial per imparare il protocollo di trasfezione di PANC-1.
- Subcoltura di una linea cellulare: questo video illustra un protocollo generale per la subcoltura di linee cellulari aderenti.
I seguenti link contengono il protocollo di coltura cellulare per le cellule PANC 1.
- Cellule PANC 1: questo link contiene il protocollo per lo scongelamento e la subcoltura della linea cellulare PANC1.
- Coltura cellulare PANC 1: questo sito web può aiutarti a conoscere tutte le informazioni chiave sulla coltura cellulare PANC 1, inclusi i terreni di coltura per le cellule PANC 1, lo scongelamento delle cellule, il congelamento delle cellule e il protocollo di subcoltura.
Domande frequenti: Informazioni sulle cellule PANC-1 e sulle loro applicazioni
Bibliografia
- Lieber, M., et al., Creazione di una linea cellulare tumorale continua (PANC-1) da un carcinoma umano del pancreas esocrino. International journal of cancer, 1975. 15(5): pagg. 741-747.
- Kim, Y., et al., Profilo proteomico comparativo delle linee cellulari di adenocarcinoma duttale pancreatico. Mol Cells, 2014. 37(12): pp. 888-98.
- Jin, U.-H., et al., L’inibizione della migrazione delle cellule Panc1 del cancro al pancreas da parte dell’omeprazolo dipende dall’attivazione della JNK da parte del recettore degli idrocarburi arilici. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2018. 501(3): pp. 751-757.
- Yuetong, L., et al., Il salidroside inibisce la proliferazione, la migrazione e l’invasione delle cellule PANC1 e SW1990 del cancro al pancreas umano attraverso le vie di segnalazione AKT ed ERK. Die Pharmazie – Rivista internazionale di scienze farmaceutiche, 2020. 75(8): pp. 385-388.
- Alipour, S., L. Pishkar e V. Chaleshi, «Effetto citotossico dell’estratto di Portulaca oleracea sulla regolazione dell’espressione genica di CDK1 e P53 in una linea cellulare di carcinoma pancreatico». Nutrition and Cancer, 2022. 74(5): pp. 1792-1801.