Cellule NCI-H460 - Esplorare la ricerca sul cancro al polmone grazie alle informazioni fornite dalla linea cellulare NCI-H460
Le cellule NCI-H460 sono cellule di carcinoma polmonare non a piccole cellule di origine umana comunemente utilizzate nella ricerca sul carcinoma polmonare e in tossicologia. Questa linea cellulare rappresenta uno strumento prezioso per lo studio di vari aspetti della biologia del cancro, tra cui lo sviluppo, la crescita e la resistenza ai farmaci dei tumori. Inoltre, le cellule NCI-H460 costituiscono un modello appropriato per lo sviluppo di agenti antitumorali.
- Terreno di coltura
- Come terreno di coltura per le NCI-H460 si utilizza l’RPMI 1640, integrato con siero fetale bovino al 10%, glutammina stabile a 2,1 mM e NaHCO₃ a 2,0 g/L. Il terreno va sostituito da 2 a 3 volte alla settimana.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo di raddoppio della linea cellulare NCI-H460 è di circa 33 ore.
- Tipo di crescita
- Le cellule tumorali polmonari NCI-H460 sono aderenti.
- Livello di biosicurezza
- BSL-4
- Disponibile presso
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Cellule NCI-H460: origine e caratteristiche generali
L’origine e le caratteristiche generali di una linea cellulare contribuiscono in modo determinante alle sue applicazioni di ricerca. Questa sezione dell’articolo vi aiuterà a conoscere l’origine e le caratteristiche salienti delle cellule di carcinoma polmonare NCI-H460. Imparerete: Cosa sono le cellule NCI-H460? Qual è il tipo di linea cellulare NCI-H460? Qual è la morfologia delle cellule NCI-H460?
- La linea cellulare NCI-H460 ha avuto origine dal versamento pleurico di un uomo europeo affetto da carcinoma polmonare a grandi cellule. È stata isolata nel 1982 da A.F. Gazdar e colleghi.
- Le cellule tumorali polmonari NCI-H460 presentano una morfologia epiteliale.
- La NCI-H460 è una linea cellulare tumorigenica con cariotipo ipotriploide. Il numero cromosomico modale per queste cellule è 57. Le cellule NCI-H460 presentano anche un numero cromosomico modale di 58 con frequenze comparabili.
- Queste cellule di carcinoma polmonare presentano numerose mutazioni tipiche dei tumori polmonari non a piccole cellule, come la mutazione KRAS, che sono coinvolte nella proliferazione, nella crescita, nell’invasione e nella metastasi delle cellule.
Informazioni sulla coltura delle cellule NCI-H460
È necessario conoscere i seguenti punti chiave per una corretta gestione e manutenzione della linea cellulare NCI-H460. Queste informazioni riguardano il tempo di raddoppio delle cellule NCI-H460, il terreno di coltura NCI-H460 e le procedure di base per la coltura delle cellule di carcinoma polmonare NCI-H460.
Punti chiave per la coltura delle cellule NCI-H460
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio delle cellule NCI-H460 è di circa 33 ore.
Aderenzi o in sospensione:
Le cellule tumorali polmonari NCI-H460 sono aderenti.
Rapporto di subcoltura:
Il rapporto di divisione raccomandato per la linea cellulare NCI-H460 è 1:2 e 1:4. Dopo aver rimosso il vecchio terreno di coltura, le cellule aderenti vengono risciacquate con soluzione salina tamponata con fosfato 1x. Successivamente, le cellule vengono incubate con la soluzione di passaggio Accutase per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Le cellule dissociate vengono risospese in un terreno di coltura e centrifugate. Le cellule raccolte vengono nuovamente risospese e trasferite in una nuova fiasca per la coltura.
Terreno di crescita:
Come terreno di coltura per le cellule NCI-H460 si utilizza l’RPMI 1640. Esso viene integrato con siero fetale bovino al 10%, glutammina stabile a 2,1 mM e NaHCO₃ a 2,0 g/L. Il terreno di coltura deve essere sostituito da 2 a 3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le colture di NCI-H460 vengono mantenute a una temperatura di 37 °C in un incubatore umidificato con un apporto continuo di CO₂ al 5%.
Conservazione:
Le cellule tumorali polmonari NCI-H460 possono essere conservate a lungo termine nella fase vapore dell’azoto liquido o a temperature inferiori a -150 °C in un congelatore elettrico a temperatura ultra-bassa.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Per congelare e conservare le cellule NCI-H460 si utilizza il terreno CM-1 o CM-ACF. Si raccomanda un metodo di congelamento lento per preservare al massimo la vitalità cellulare.
Processo di scongelamento:
Le cellule NCI-H460 congelate vengono scongelate in un bagno d’acqua preriscaldato (a una temperatura di 37 °C) per 40-60 secondi, fino a quando rimane solo un piccolo grumo di ghiaccio. Alle cellule scongelate viene aggiunto terreno di coltura fresco e vengono centrifugate per rimuovere i componenti del terreno di congelamento. Il pellet cellulare raccolto viene nuovamente risospeso e le cellule vengono trasferite in nuove fiasche contenenti terreno di coltura per la crescita. Le cellule NCI-H460 possono impiegare quasi 24 ore per aderire alla superficie della fiasca.
Livello di biosicurezza:
Le cellule di carcinoma polmonare NCI-H460 vengono manipolate e conservate in laboratori di livello di biosicurezza 1.
Pubblicato: 2023 | Ultima revisione: maggio 2026
Vantaggi e svantaggi delle cellule NCI-H460
La linea cellulare NCI-H460 è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro al polmone. Questa sezione tratterà i vantaggi e gli svantaggi generali relativi alle cellule tumorali polmonari NCI-H460.
Vantaggi
I vantaggi della linea cellulare NCI-H460 del carcinoma polmonare non a piccole cellule sono:
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Origine del tumore
La linea cellulare NCI-H460 è stata derivata da un paziente affetto da carcinoma polmonare a grandi cellule, rappresentando questo particolare tipo di tumore polmonare. Viene utilizzata come modello per studiare la biologia del cancro al polmone e sviluppare trattamenti nuovi ed efficaci. Le cellule NCI-H460 possiedono un potenziale tumorigenico e possono essere iniettate in topi immunodeficienti per creare modelli tumorali in vivo finalizzati allo studio della crescita e dello sviluppo del tumore, nonché dell’efficacia di potenziali farmaci.
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Elevati tassi di proliferazione
La linea NCI-H460 presenta tassi di crescita più elevati rispetto ad altre linee cellulari di carcinoma polmonare non a piccole cellule, come la linea A549. Questo vantaggio ne aumenta la disponibilità e aiuta i ricercatori a condurre esperimenti riproducibili e sensibili al fattore tempo.
Svantaggi
Gli svantaggi associati alle cellule tumorali polmonari NCI-H460 sono:
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Omogeneità
Le cellule NCI-H460 sono omogenee in quanto sono state ottenute da un tumore di un singolo paziente. Pertanto, in genere mancano della complessità e dell’eterogeneità osservate nei tumori dei pazienti.
Applicazioni di ricerca delle cellule NCI-H460
Le cellule tumorali polmonari NCI-H460 sono ampiamente utilizzate negli studi relativi al carcinoma polmonare. Ecco alcune delle principali applicazioni di ricerca delle cellule NCI-H460:
- Ricerca sul cancro al polmone: le cellule NCI-H460 costituiscono un modello inestimabile per lo studio dei meccanismi cellulari e molecolari coinvolti nello sviluppo, nella crescita e nelle metastasi del tumore. Inoltre, vengono utilizzate per studiare le vie di segnalazione fondamentali, i bersagli molecolari e le varie mutazioni genetiche associate alla progressione del cancro al polmone. Sono stati condotti diversi studi sulle cellule NCI-H460 per analizzare efficacemente questi fattori. Uno studio condotto nel 2019 ha ipotizzato che la sovraespressione del substrato nucleare ubiquitario delle chinasi dipendenti dalle cicline e dalla caseina (NUCKS) sia coinvolta nella crescita delle cellule tumorali attraverso la regolazione della via di segnalazione PI3K/AKT [1]. Analogamente, uno studio in vitro e in vivo ha impiegato le cellule NCI-H460 per studiare il ruolo del gene eIF4E. I risultati hanno rivelato che il gene eIF4E è coinvolto nella crescita del carcinoma polmonare e nell’angiogenesi e può essere preso di mira per sviluppare promettenti farmaci contro il cancro al polmone [2].
- Ricerca e sviluppo di farmaci: la linea cellulare NCI-H460, derivata dal carcinoma polmonare umano, è ampiamente utilizzata negli studi di ricerca e sviluppo di farmaci. I ricercatori utilizzano queste cellule per valutare la tossicità e l’efficacia di nuovi candidati farmaci, terapie mirate e trattamenti che prendono di mira principalmente le mutazioni del gene KRAS presenti nelle cellule NCI-H460. Uno studio condotto da Haoyue Hu e colleghi nel 2023 ha impiegato le cellule NCI-H460 per studiare gli effetti antitumorali del farmaco anlotinib. I risultati hanno dimostrato che l’anlotinib ha influenzato in parte la crescita delle cellule tumorali polmonari con mutazione del gene KRAS inibendo la cascata di segnalazione MEK/ERK [3]. Analogamente, un composto fenolico, l’acido carnosico, è stato sottoposto a screening per le attività antiproliferative e proapoptotiche utilizzando le cellule NCI-H460 [4].
- Resistenza ai farmaci: la linea cellulare NCI-H460 è ideale per lo studio dei meccanismi di resistenza ai farmaci del carcinoma polmonare. I ricercatori utilizzano queste cellule per sviluppare modelli di resistenza ai farmaci al fine di identificare i geni, i fattori molecolari e le vie di segnalazione sottostanti. Ad esempio, in uno studio sono state sviluppate cellule NCI-H460 resistenti al pemetrexed, un agente antifolato multibersaglio, per studiare i meccanismi molecolari alla base della resistenza al pemetrexed nelle cellule del carcinoma polmonare non a piccole cellule [5].
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Pubblicazioni scientifiche relative alle cellule NCI-H460
Di seguito sono riportate alcune interessanti pubblicazioni di ricerca relative alla linea cellulare NCI-H460 derivata dal carcinoma polmonare.
Questo studio pubblicato su *Molecules* (2023) ha suggerito che un α-1,6-glucano naturale, il BBWPW, estratto dai fagioli neri inibisca la proliferazione delle cellule NCI-H460 attraverso la regolazione della via PI3K/AKT/MAPK.
Questo articolo pubblicato su *Phytomedicine* (2019) ha dimostrato che il dioscin-6′-O-acetato, un nuovo composto naturale, esercita un effetto antiproliferativo sulle cellule tumorali polmonari NCI-H460.
Una ricerca pubblicata su BMC Pulmonary Medicine (2020) afferma che il microRNA-425-5p favorisce la tumorigenesi del carcinoma polmonare attraverso la via PTEN/PI3K/AKT.
Questo articolo pubblicato su *Molecular Medicine Reports* (2017) ha illustrato il potenziale antitumorale e i meccanismi alla base dell’azione del composto quinalizarin nelle cellule NCI-H460 e in altre cellule tumorali polmonari.
Questa ricerca pubblicata su Food and Function (2019) evidenzia il potenziale effetto antitumorale dell’estratto di Eucalyptus globulus Labill. utilizzando le cellule NCI-H460. I risultati hanno dimostrato che l’estratto vegetale ha esercitato tali effetti aumentando l’espressione di p53 nelle cellule NCI-H460 e modulando il profilo del ciclo cellulare.
Risorse sulla linea cellulare NCI-H460: protocolli, video e altro
Ecco alcune risorse online dedicate alle cellule di carcinoma polmonare NCI-H460.
- Trasfezione delle cellule NCI-H460: questo video tutorial è una guida passo passo per la trasfezione delle cellule NCI-H460 con DNA plasmidico.
I seguenti link contengono informazioni fondamentali sulla coltura cellulare delle cellule H460.
- Cellule NCI-H460: questo sito web fornisce informazioni importanti sui terreni di coltura delle cellule NCI-H460 e sulle procedure di subcoltura, congelamento e scongelamento.
- Passaggio delle cellule NCI-H460: questo documento vi guiderà nel passaggio e nella subcoltura della linea cellulare NCI-H460. Inoltre, vi aiuterà anche a imparare il protocollo di trasfezione per le cellule NCI-H460.
Approfondimento sulla linea cellulare NCI-H460: domande frequenti e approfondimenti
La linea cellulare NCI-H460 proviene da un paziente con carcinoma polmonare a grandi cellule, il che la rende un modello prezioso per lo studio di questo tipo di cancro al polmone.
Le cellule NCI-H460 sono utilizzate per studiare la biologia del cancro del polmone, sviluppare nuovi trattamenti e valutare l'efficacia di potenziali farmaci. Possono anche essere iniettate in topi immunodeficienti per creare modelli tumorali in vivo per studiare la crescita e lo sviluppo del tumore.
Entrambe le linee cellulari NCI-H460 e A549 derivano da carcinomi polmonari, ma NCI-H460 rappresenta un carcinoma a grandi cellule, mentre A549 rappresenta un adenocarcinoma. Questa differenza di sottotipo istologico influenza le loro caratteristiche e il loro comportamento.
Sì, le cellule NCI-H460 hanno un potenziale tumorigenico e possono essere impiantate in topi immunodeficienti per creare modelli di xenotrapianto, facilitando lo studio del carcinoma polmonare a grandi cellule in vivo.
La combinazione di paclitaxel con altri composti può potenziare i suoi effetti citotossici sulle cellule NCI-H460, migliorando potenzialmente i risultati del trattamento nel cancro del polmone.
Sì, le cellule NCI-H460 esprimono l'ipoxantina guanina fosforibosiltransferasi, essenziale per il metabolismo dei nucleotidi e la proliferazione cellulare.
Le cellule NCI-H460 sono comunemente utilizzate nella ricerca oncologica e tossicologica per studiare la crescita tumorale, valutare gli effetti citotossici dei composti e studiare i meccanismi di resistenza ai farmaci.
Le cellule NCI-H460 esprimono tipicamente le proteine triplette del neurofilamento, che sono coinvolte nel mantenimento della struttura citoscheletrica e possono svolgere un ruolo nella migrazione e nell'invasione delle cellule tumorali.
La via κB, tra le altre, è implicata nella regolazione della proliferazione e della sopravvivenza delle cellule NCI-H460, offrendo potenziali bersagli per l'intervento terapeutico nel cancro del polmone.
Sì, le cellule NCI-H460 sono comunemente utilizzate come modello in vitro per valutare gli effetti citotossici degli agenti chemioterapici, tra cui paclitaxel e carboplatino, contribuendo allo sviluppo di trattamenti antitumorali efficaci.
Riferimenti
- Hu, C., et al., NUCKS promuove la proliferazione, la migrazione e l'invasione delle cellule tumorali polmonari attraverso la via di segnalazione Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): pagg. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, un nuovo inibitore dell’interazione eIF4E/eIF4G, inibisce la crescita delle cellule tumorali polmonari e l’angiogenesi attraverso la via di segnalazione Ras/MNK/ERK/eIF4E. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., L’anlotinib esercita effetti antitumorali sulle cellule tumorali polmonari con mutazione del gene KRAS sopprimendo la via di segnalazione MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: pp. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., L’acido carnosico mostra effetti antiproliferativi e proapoptotici nelle cellule polmonari tumorali NCI-H460 e non tumorali IMR-90. Journal of Toxicology and Environmental Health, Parte A, 2020. 83(10): pagg. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Creazione e caratterizzazione di cellule NCI-H460/PMT resistenti al pemetrexed. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (precedentemente Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): pp. 731-739.