Cellule NCI-H1299: ricerca e implicazioni cliniche delle cellule di carcinoma polmonare NCI-H1299
La NCI-H1299 è una linea cellulare immortalizzata di carcinoma polmonare non a piccole cellule di origine umana ampiamente utilizzata nella ricerca in campo di immuno-oncologia, oncologia e scoperta di nuovi farmaci. Inoltre, i ricercatori hanno utilizzato queste cellule per studiare la sensibilità ai farmaci, le vie di segnalazione sottostanti e i meccanismi molecolari correlati al carcinoma polmonare. Queste cellule vengono impiegate anche per lo studio di infezioni virali come quella da SARS-CoV-2.
- Terreno di coltura
- RPM1 1640 è il terreno di coltura ideale per le cellule NCI-H1299. È integrato con siero fetale bovino al 10%, 4500 mg/L di glucosio, 2,0 mM di L-glutammina, 1 mM di piruvato di sodio, 1500 mg/L di NaHCO₃ e 10 mM di HEPES. Il terreno va rinnovato da 2 a 3 volte alla settimana.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo di raddoppio delle cellule NCI-H1299 varia tra le 22 e le 30 ore.
- Tipo di crescita
- La linea cellulare NCI-H1299 è di tipo aderente.
- Livello di biosicurezza
- BSL-1
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina NCI-H1299
- Caratteristiche generali e origine delle cellule NCI-H1299
- Informazioni sulla coltura
- Acquista la linea cellulare NCI-H1299: strumenti di ricerca di alta qualità per lo studio della biologia del cancro al polmone
- Vantaggi e svantaggi delle cellule NCI-H1299
- Applicazioni di ricerca delle cellule NCI-H1299
- Pubblicazioni di ricerca che trattano le cellule NCI-H1299
- Risorse per la linea cellulare NCI-H1299: protocolli, video e altro
- Domande frequenti sulla linea cellulare NCI-H1299
- Riferimenti
- Domande frequenti
Caratteristiche generali e origine delle cellule NCI-H1299
La prima cosa da sapere su una linea cellulare è la sua origine e le sue caratteristiche generali, poiché queste informazioni aiutano a definirne l’utilizzo nella propria ricerca. Questa sezione dell’articolo vi aiuterà a conoscere alcune informazioni importanti sull’origine e sulle caratteristiche della linea NCI-H1299. Ad esempio: cosa sono le cellule di carcinoma polmonare NCI-H1299? Di che tipo di cellula si tratta? Qual è la dimensione delle cellule NCI-H1299? Qual è la differenza tra A549 e NCI-H1299?
- La linea cellulare NCI-H1299 ha avuto origine da una metastasi linfonodale del polmone di un paziente maschio caucasico di 43 anni affetto da cancro.
- Queste cellule presentano una delezione parziale omozigote del gene p53; pertanto, non esprimono la proteina p53. La mancanza di espressione della proteina p53 nelle cellule NCI-H1299 contribuisce alla tendenza proliferativa delle cellule tumorali polmonari H1299.
- Oltre al p53, è stato riportato che queste cellule immortalizzate presentano una mutazione del gene KRAS, responsabile delle loro proprietà di crescita, proliferazione, migrazione e invasione.
- Il cariotipo delle cellule NCI-H1299 è quasi diploide.
- Le cellule NCI-H1299 presentano una morfologia simile a quella delle cellule epiteliali.
- Queste cellule sono appiattite e hanno uno spessore inferiore a 5 µm.
NCI-H1299 e A549
NCI-H1299 e A549 sono linee cellulari di carcinoma polmonare non a piccole cellule. Le cellule NCI-H1299 sono più aggressive e sensibili rispetto alle A549. Entrambe presentano mutazioni relativamente simili, come quella del gene KRAS. Tuttavia, a differenza delle cellule NCI-H1299, le cellule A549 esprimono il gene P53.
Informazioni sulla coltura
Mantenere una coltura di linee cellulari non è facile finché non si conoscono tutte le informazioni fondamentali al riguardo, tra cui: qual è il tempo di raddoppio delle cellule NCI-H1299? Qual è la densità di semina delle cellule NCI-H1299? Qual è il terreno di coltura delle cellule NCI-H1299? Come si coltivano le linee cellulari NCI-H1299? Questa sezione vi aiuterà a trovare le risposte a tutte queste domande sulla coltura delle cellule NCI-H1299.
Punti chiave per la coltura delle cellule NCI-H1299
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio delle cellule NCI-H1299 varia tra le 22 e le 30 ore.
Aderenzi o in sospensione:
La linea cellulare NCI-H1299 è aderente.
Rapporto di subcoltura:
Le cellule NCI-H1299 vengono sottoposte a subcoltura con un rapporto raccomandato compreso tra 1:3 e 1:6. Per la semina, le cellule aderenti vengono lavate con PBS 1x e incubate con la soluzione di passaggio Accutase per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Le cellule distaccate vengono aggiunte a terreni di coltura freschi e centrifugate. Il pellet cellulare viene quindi risospeso e le cellule vengono trasferite in nuove fiasche contenenti terreno di crescita.
Terreno di crescita:
RPM1 1640 è un terreno di coltura ideale per le cellule NCI-H1299. È integrato con siero fetale bovino al 10%, 4500 mg/L di glucosio, 2,0 mM di L-glutammina, 1 mM di piruvato di sodio, 1500 mg/L di NaHCO₃ e 10 mM di HEPES. Il terreno di coltura deve essere rinnovato da 2 a 3 volte alla settimana.
Condizioni di coltura:
Le colture di cellule di carcinoma polmonare NCI-H1299 vengono mantenute in un incubatore umidificato a 37 °C con un'alimentazione di CO₂ al 5%.
Conservazione:
La linea cellulare NCI-H1299 può essere conservata a lungo termine nella fase vapore dell’azoto liquido o in congelatori a temperatura ultra-bassa a temperature inferiori a -150 °C.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
CM-1 o CM-ACF sono i terreni di congelamento delle cellule NCI-H1299. Le cellule vengono congelate utilizzando un processo di congelamento lento che consente una diminuzione della temperatura di solo 1 grado al minuto per proteggere la vitalità cellulare.
Processo di scongelamento:
Le cellule NCI-H1299 congelate vengono agitate rapidamente in un bagno d’acqua preriscaldato a 37 gradi Celsius per 40-60 secondi, fino a quando rimane solo un piccolo pezzo di ghiaccio. Alle cellule scongelate viene aggiunto terreno fresco e possono essere coltivate direttamente in nuove fiasche oppure centrifugate. Nel primo caso, il terreno deve essere sostituito dopo 24 ore di incubazione. La centrifugazione aiuta a rimuovere i residui del terreno di congelamento. Successivamente, le cellule raccolte vengono risospese in terreno fresco e trasferite nella nuova fiasca per la coltura.
Livello di biosicurezza:
Per la manipolazione della coltura cellulare NCI-H1299 è necessario un laboratorio di livello di biosicurezza 1.
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Vantaggi e svantaggi delle cellule NCI-H1299
Come altre linee cellulari tumorali umane, anche la NCI-H1299 presenta alcune caratteristiche distintive associate a specifici vantaggi e svantaggi. Di seguito ne abbiamo riassunti alcuni tra i più significativi.
Vantaggi
I principali vantaggi della linea cellulare NCI-H1299 del carcinoma polmonare non a piccole cellule sono:
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Modello in vitro del carcinoma polmonare
Le linee cellulari NCI-H1299 sono state sviluppate a partire da metastasi linfonodali di carcinoma polmonare e presentano quindi proprietà relativamente simili. Pertanto, queste cellule possono fungere da modello in vitro per studiare la biologia del carcinoma polmonare, i meccanismi cellulari e molecolari, nonché per lo screening e la sperimentazione di potenziali terapie.
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Facile da coltivare
Le cellule NCI-H1299 sono facili da coltivare e mantenere in un laboratorio di ricerca. Non sono richiesti requisiti e procedure complesse per la coltura cellulare.
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Mutazioni P53 e KRAS nelle cellule NCI-H1299
Le cellule NCI-H1299 sono prive dell’espressione del gene p53, il che consente loro di proliferare vigorosamente. Inoltre, presentano una mutazione del gene KRAS che contribuisce alla crescita, alla proliferazione, all’invasività e alla migrazione cellulare. Alla luce di ciò, i ricercatori utilizzano le cellule H1299 per studiare i meccanismi molecolari correlati alle mutazioni di KRAS e p53.
Svantaggi
Gli svantaggi delle cellule NCI-H1299 sono:
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Specificità tissutale
Le cellule NCI-H1299 provengono dal tessuto polmonare. Pertanto, la loro applicabilità è per lo più limitata alla ricerca sul carcinoma polmonare. Potrebbero non rappresentare appieno l’eterogeneità e le caratteristiche generali di altri tipi di tumore.
Applicazioni di ricerca delle cellule NCI-H1299
La linea cellulare NCI-H1299 è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro al polmone. Di seguito vengono menzionate alcune applicazioni promettenti di questa linea cellulare.
- Biologia del cancro: le cellule NCI-H1299 costituiscono un ottimo strumento di ricerca per studiare lo sviluppo e la progressione del cancro, nonché i relativi meccanismi cellulari e molecolari. Queste cellule presentano determinate mutazioni, consentendo ai ricercatori di esplorare i comportamenti delle cellule tumorali, le vie di segnalazione e i profili di espressione genica correlati. Diversi studi hanno utilizzato la linea cellulare NCI-H1299, derivata da un carcinoma polmonare non a piccole cellule, per studiare la biologia del cancro al polmone. Ad esempio, uno studio condotto nel 2018 ha analizzato la via di segnalazione coinvolta nell’apoptosi delle cellule tumorali polmonari utilizzando le cellule NCI-H1299. I ricercatori hanno scoperto che la via PI3K/AKT contribuisce alla proliferazione cellulare e che la sua inibizione può causare la morte delle cellule tumorali [1]. Analogamente, un’altra ricerca ha indagato i meccanismi coinvolti nella transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) delle cellule NCI-H1299. Questo studio ha ipotizzato che una proteina extracellulare, la SPARC (proteina secreta acida e ricca di cisteina), contribuisca alla EMT e alla migrazione delle cellule NCI-H1299, promuovendo così la tumorigenesi: la proteina SPARC agisce infatti come mediatore della segnalazione del TGF-β1 [2].
- Ricerca e screening farmacologico: la linea cellulare NCI-H1299, derivata dal carcinoma polmonare umano, è ampiamente impiegata per valutare la tossicità e l’efficacia di potenziali farmaci. Inoltre, viene utilizzata dai ricercatori per studiare il meccanismo d’azione dei farmaci antitumorali. Alcuni studi hanno inoltre utilizzato queste cellule per identificare possibili bersagli farmacologici e meccanismi di resistenza. Ad esempio, una ricerca condotta da Xiao-Yun Shen e colleghi ha studiato il potenziale antitumorale del composto naturale bruceina D (BD). I risultati hanno rivelato che la BD ostacola in modo significativo la proliferazione, l’invasione e la migrazione delle cellule NCI-H1299. Pertanto, può essere considerata una potenziale terapia adiuvante per il trattamento del carcinoma polmonare non a piccole cellule [3]. Analogamente, uno studio ha valutato gli effetti citotossici dello xantohumolo, da solo e in combinazione con il farmaco chemioterapico cisplatino, sulle cellule tumorali polmonari NCI-H1299 [4].
Pubblicazioni scientifiche relative alle cellule NCI-H1299
Di seguito sono riportate alcune pubblicazioni scientifiche significative e tra le più citate relative alla linea cellulare di carcinoma polmonare NCI-H1299.
Questo articolo è stato pubblicato sulla rivista *Human and Experimental Toxicology* (2021). Lo studio ha ipotizzato che l’indolo-3-carbinolo induca l’apoptosi nelle cellule H1299 attraverso l’aumento dei livelli di specie reattive dell’ossigeno (ROS).
Questa ricerca è stata pubblicata nel 2018 sulla rivista *Cellular Physiology and Biochemistry*. I risultati della ricerca hanno rivelato che la combinazione di acido caffeico e paclitaxel esercita un effetto antitumorale sinergico sulla linea cellulare del carcinoma polmonare non a piccole cellule NCI-H1299.
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato su *Molecular Medicine Reports* (2018). Lo studio ha valutato l’effetto antitumorale del tubeimoside-1, una saponina triterpenoide, e i meccanismi sottostanti nella linea cellulare NCI-H1299.
Questo articolo, pubblicato su *Journal of Cancer* (2020), ha suggerito che la pristimerin, un composto naturale, sopprima la proliferazione e la migrazione delle cellule NCI-H1299.
Meccanismo di regolazione del gene VIPR1 nelle cellule di adenocarcinoma polmonare umano H1299
Questo studio pubblicato su Medical Oncology (2019) ha esplorato i potenziali effetti della sovraespressione del gene VIPR1 sulla linea cellulare di adenocarcinoma NCI-H1299.
Risorse per la linea cellulare NCI-H1299: protocolli, video e altro
Di seguito sono riportate alcune risorse online relative alle cellule NCI-H1299.
- Trasfezione delle cellule NCI-H1299: questo video illustra il protocollo di trasfezione transitoria per le linee cellulari NCI-H1299.
- Subcoltura di una linea cellulare aderente: questo video vi aiuterà ad apprendere una procedura generale di subcoltura per una linea cellulare aderente.
Il seguente link contiene informazioni sulla coltura cellulare delle cellule NCI-H1299.
- Linea cellulare NCI-H1299: questo link può aiutarti a conoscere il protocollo di passaggio e trasfezione delle cellule NCI-H1299.
Domande frequenti sulla linea cellulare NCI-H1299
Riferimenti
- Gu, J., et al., Studio sull'apoptosi indotta dall'EGCG nelle cellule tumorali polmonari mediante l'inibizione della via di segnalazione PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): pagg. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC agisce come mediatore del TGF-β1 nel favorire la transizione epiteliale-mesenchimale nelle cellule tumorali polmonari A549 e H1299. Biofactors, 2018. 44(5): pp. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Uno studio sul meccanismo d’azione della bruceina D nel trattamento delle cellule H1299 del carcinoma polmonare non a piccole cellule. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): p. 500.
- Long, B., et al., Effetti citotossici dello xantohumolo e della sua combinazione con il cisplatino sulle cellule H1299 del carcinoma polmonare metastatico umano. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): pp. 1-15.