Linea cellulare BeWo
BeWo è una linea cellulare derivata dal coriocarcinoma umano ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica. Funge da prezioso modello in vitro per lo studio del complesso processo di sviluppo placentare e di sincizializzazione dei trofoblasti umani. I ricercatori utilizzano queste cellule anche per studiare il comportamento delle cellule trofoblastiche, la produzione di ormoni e il trasporto di sostanze attraverso la placenta. Inoltre, le cellule BeWo trovano applicazione anche negli studi di tossicologia, infezioni e trasmissione di malattie.
Questo articolo comprende le conoscenze fondamentali sulle cellule BeWo che potrebbero aiutarti a gestirle nella tua ricerca. Comprenderà:
- Caratteristiche generali e origine delle cellule BeWo
- Linea cellulare BeWo: informazioni sulla coltura
- Vantaggi e svantaggi della linea cellulare BeWo
- Applicazioni di ricerca delle cellule BeWo
- Pubblicazioni di ricerca sulle cellule BeWo
- Risorse per la linea cellulare BeWo: protocolli, video e altro
Caratteristiche generali e origine delle cellule BeWo
Conoscere l'origine e le caratteristiche generali di una linea cellulare è fondamentale per poterla utilizzare nella propria ricerca. Questa parte dell'articolo esplora l'origine della linea cellulare BeWo, le sue caratteristiche e molto altro ancora. Qui scoprirai: Che cos'è la linea cellulare BeWo derivata dal coriocarcinoma? Che cos'è la sincizializzazione BeWo? Da dove provengono le cellule BeWo? Qual è la morfologia delle cellule BeWo? Qual è la ploidia delle cellule BeWo?
- La linea cellulare placentare BeWo ha avuto origine dal coriocarcinoma gestazionale maligno di una placenta fetale maschile nel 1968 [1]. Pertanto, funge da modello inestimabile per la ricerca sulla placenta.
- Le cellule BeWo presentano una morfologia di tipo epiteliale.
- Le cellule BeWo sono relativamente piccole, con dimensioni comprese tra 20 e 30 µm [2].
- Le cellule BeWo presentano un cariotipo stabile. Il loro numero di cromosomi è ipo-tetraploide. Il numero modale di cromosomi delle cellule BeWo è 86. Può variare da 71 a 178.
- Le cellule BeWo producono diversi ormoni, ovvero la somatomammotropina corionica umana, la gonadotropina corionica umana (hCG) e gli ormoni steroidei.
- Le cellule BeWo esprimono marcatori molecolari, tra cui CK 7, E-caderina e VE-caderina.
Sottolinea B30
La B30 è una sottolinia delle cellule BeWo. Viene utilizzata per studiare l'assorbimento e il trasporto dei nutrienti. Ciò è attribuito alla loro vigorosa crescita su membrane porose.
BeWo e JEG-3
Le linee cellulari BeWo e JEG-3 derivano da coriocarcinomi e sono utilizzate nella ricerca sulla placenta. Le cellule BeWo producono ormoni a livelli inferiori rispetto alle JEG-3, come la gonadotropina corionica umana (hCG) e l'estradiolo.
Linea cellulare BeWo: informazioni sulla coltura
Mantenere una coltura cellulare può risultare complesso se non si conoscono alcuni dettagli fondamentali. Ad esempio: qual è il tempo di raddoppio delle cellule BeWo? Qual è il terreno di coltura delle cellule BeWo? Come si coltiva la linea cellulare BeWo? E come si congelano le cellule BeWo?
Punti chiave per la coltura delle cellule BeWo
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio della popolazione delle cellule BeWo è di circa 30 ore.
Aderenzi o in sospensione:
BeWo è una linea cellulare aderente.
Densità di semina:
La densità di semina raccomandata per le cellule BeWo è di 1 x 10⁴ cellule/cm². Per la semina, il terreno di coltura vecchio viene rimosso dalle cellule, che vengono poi risciacquate con PBS 1x. Successivamente, si aggiunge Accutase (soluzione di passaggio) e le cellule vengono incubate per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Quindi, alle cellule distaccate si aggiunge il terreno di coltura e si procede alla centrifugazione. Le cellule raccolte vengono quindi risospese e trasferite in una nuova fiasca.
Terreno di crescita:
Per la coltura delle cellule BeWo si utilizza il terreno Ham's F12K contenente 10% di FBS, 2,0 mM di L-glutammina, 2,0 mM di piruvato di sodio e 2,5 g/L di NaHCO₃. Il terreno di coltura delle cellule BeWo deve essere sostituito da 2 a 3 volte alla settimana.
Condizioni di coltura:
Le cellule BeWo vengono mantenute in un incubatore umidificato impostato a una temperatura di 37 gradi Celsius e con un'alimentazione di CO₂ al 5%.
Conservazione:
Le cellule BeWo congelate vengono conservate a temperature inferiori a -150 °C in un congelatore elettrico a temperatura ultra-bassa o nella fase vapore dell’azoto liquido.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Si raccomanda di congelare le cellule BeWo nel mezzo di congelamento CM-1 o CM-ACF. Le cellule vengono congelate utilizzando un metodo di congelamento lento. Questo metodo consente un abbassamento della temperatura di solo 1 grado al minuto, evitando così qualsiasi shock alle cellule e proteggendone la vitalità.
Processo di scongelamento:
Le cellule congelate vengono scongelate immergendole in un bagno d’acqua a 37 °C per 40-60 secondi, fino a quando rimane solo un piccolo grumo di ghiaccio. Successivamente, si aggiunge un terreno di coltura fresco e le cellule vengono centrifugate per rimuovere i componenti del mezzo di congelamento. Il pellet cellulare raccolto viene risospeso e trasferito in una fiasca di coltura per la crescita.
Livello di biosicurezza:
Per la manipolazione e la conservazione delle colture cellulari BeWo è necessario un laboratorio di livello di biosicurezza 1.
Pubblicato: 2023 | Ultimo aggiornamento: maggio 2026
- Vantaggi e svantaggi della linea cellulare BeWo
- Applicazioni di ricerca delle cellule BeWo
- Linea cellulare BeWo: informazioni sulla coltura
- Caratteristiche generali e origine delle cellule BeWo
- 5. Pubblicazioni di ricerca sulle cellule BeWo
- Risorse per la linea cellulare BeWo: protocolli, video e altro
- Domande frequenti
Vantaggi e svantaggi della linea cellulare BeWo
Le cellule BeWo presentano caratteristiche uniche e comportano specifici pro e contro. In questa sezione ne esploreremo alcuni degni di nota.
Vantaggi
I principali vantaggi della linea cellulare di coriocarcinoma BeWo sono:
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Modello cellulare placentare in vitro
Le cellule BeWo forniscono un modello in vitro per lo studio del comportamento delle cellule trofoblastiche e della sincizializzazione placentare, replicando processi difficili da osservare in vivo.
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Produzione di ormoni
Le cellule BeWo secernono ormoni, come l'hCG e il lattogeno placentare, rendendole preziose per gli studi sulla regolazione ormonale e la ricerca in biologia riproduttiva.
Svantaggi
Gli svantaggi delle cellule trofoblastiche BeWo sono:
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Linea cellulare cancerosa
Le cellule BeWo derivano dal coriocarcinoma, un tumore placentare. Questa origine potrebbe non rappresentare appieno la normale funzione delle cellule placentari.
Applicazioni di ricerca delle cellule BeWo
La linea cellulare BeWo è ampiamente utilizzata nella ricerca sulla placenta. Di seguito sono riportate alcune applicazioni specifiche di questa linea cellulare:
- Ricerca sulla placenta e sulla gravidanza: le cellule BeWo sono fondamentali nella ricerca sulla placenta e sulla gravidanza. Ad esempio, i ricercatori utilizzano queste cellule per studiare il trasporto di sostanze, tra cui farmaci, nutrienti e tossine, attraverso la barriera placentare. Inoltre, studiano anche la produzione e la regolazione degli ormoni, tra cui la gonadotropina corionica umana (hCG), il lattogeno placentare e gli ormoni steroidei. Ciò è importante per comprendere i cambiamenti ormonali durante la gravidanza. Una ricerca condotta nel 2018 ha studiato l'effetto dei ritardanti di fiamma bromurati (BFR) sull'attività della solfotransferasi nella linea cellulare trofoblastica umana (BeWo). Questo enzima è coinvolto nella regolazione dei livelli intracellulari dell'ormone tiroideo [3].
- Ricerca su infezioni e malattie: le cellule BeWo vengono impiegate anche per esaminare l'interazione tra agenti patogeni e cellule placentari. Questa ricerca è preziosa per comprendere le malattie che possono essere trasmesse dalla madre al feto e per sviluppare strategie volte a proteggere la salute fetale. Inoltre, questa linea cellulare aiuta i ricercatori a studiare le complicanze che insorgono durante la gravidanza, come la preeclampsia. Ad esempio, uno studio condotto da Michalina Bralewska nel 2023 ha utilizzato il modello cellulare trofoblastico BeWo e ha scoperto che sia la cromogranina A (CgA) e il peptide da essa derivato, la catestatina (CST), possano avere un ruolo nel complesso processo di patogenesi della preeclampsia (PE) [4]. In seguito, un altro studio ha esplorato il potenziale antitumorale della tricosantina utilizzando la linea cellulare di coriocarcinoma BeWo. La ricerca ha inoltre compiuto uno sforzo supplementare per individuare biomarcatori, effettuando un'analisi proteomica comparativa prima e dopo l'esperimento [5].
5. Pubblicazioni scientifiche sulle cellule BeWo
Di seguito sono riportate alcune importanti pubblicazioni di ricerca sulle cellule trofoblastiche BeWo.
Questo studio pubblicato su Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) ha ipotizzato che la segnalazione AMPK attivi la mitofagia nelle cellule trofoblastiche BeWo attraverso i percorsi di mitofagia facilitati da FUNDC1 e PRKN. Di conseguenza, la mitofagia aiuta a mantenere la produzione di ATP e il potenziale di membrana mitocondriale.
Questo articolo è stato pubblicato su Animal Cells and Systems (2020). Lo studio ha ipotizzato che l'etilparaben media l'apoptosi delle cellule BeWo attraverso la regolazione della via della caspasi 3.
Questo studio, pubblicato su Drug Metabolism and Disposition (2023), ha utilizzato linee cellulari placentari, tra cui BeWo, JAR, JEG-3 e HTR-8/SVneo, per indagare il deposito di xenobiotici e steroidi nelle cellule.
Questo articolo di ricerca pubblicato su International Journal of Molecular Medicine (2020) ha ipotizzato che l'apelina, il ligando del recettore APJ, promuova la proliferazione delle cellule BeWo attraverso la segnalazione APJ ed ERK1/2, stat3 e AMPK. Pertanto, potrebbe essere un'adipochina essenziale che regola lo sviluppo della placenta.
Questo studio pubblicato su Epilepsia (2021) ha esplorato gli effetti dei nutrienti fetali e dei farmaci antiepilettici sui trasportatori di colina nella linea cellulare trofoblastica di origine umana BeWo.
Risorse per la linea cellulare BeWo: protocolli, video e altro
Ecco alcune risorse online disponibili sulle cellule BeWo:
- Trasfezione in vitro: questo video vi aiuterà a imparare il protocollo di trasfezione del DNA plasmidico in vitro per le cellule aderenti.
Il seguente link contiene informazioni sulla coltura cellulare delle cellule BeWo:
- Cellule BeWo: questo sito web contiene informazioni essenziali sulla coltura cellulare della linea cellulare BeWo. Ciò include informazioni relative ai terreni di coltura e alle condizioni di coltura. Presenta inoltre protocolli per la subcoltura e la gestione di colture crioconservate e proliferative.
Riferimenti
- Weber, M., et al., Citogenomica di sei linee cellulari trofoblastiche umane. Placenta, 2021. 103: pagg. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Caratteristiche dei trofoblasti in coltura a lungo termine. Bollettino di Biologia Sperimentale e Medicina, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt e H.M. Stapleton, Interruzione dell'attività della sulfotransferasi degli ormoni tiroidei da parte di sostanze chimiche ritardanti di fiamma bromurate nella linea cellulare di placenta di coriocarcinoma umano, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: pp. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha e A. Sakowicz, Riduzione del livello della proteina CST derivata dalla CgA nelle linee cellulari trofoblastiche HTR-8/SVneo e BeWo causata dall'ambiente preeclamptico. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al., Analisi proteomica comparativa dell'aggiunta del farmaco tricosantina alla linea cellulare BeWo. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.