Linea cellulare BxPC-3
BxPC-3 è una linea cellulare derivata dal cancro al pancreas umano. È ampiamente utilizzata negli studi sul cancro. I ricercatori impiegano queste cellule principalmente per studiare la biologia del cancro al pancreas, identificare bersagli terapeutici e sviluppare farmaci antitumorali.
- Terreno di coltura
- Per la coltura della linea cellulare BxPC-3 si utilizza il terreno RPMI 1640. Esso viene integrato con siero fetale bovino al 10%, glutammina stabile a 2,1 mM e NaHCO3 a 2,0 g/L per ottenere una crescita cellulare ideale. Il terreno di coltura deve essere sostituito 2 o 3 volte alla settimana.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo di raddoppio delle cellule BxPC-3 varia tra le 48 e le 60 ore.
- Tipo di crescita
- La BxPC-3 è una linea cellulare aderente.
- Livello di biosicurezza
- BSL-3
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina BxPC-3
Questo articolo contiene informazioni fondamentali sulla linea cellulare BxPC-3 che possono aiutarti in modo significativo a lavorarci. In particolare, tratterà:
- Informazioni generali e origine della linea cellulare BxPC-3
- Coltura delle cellule BxPC-3
- Linea cellulare BxPC-3: vantaggi e limiti
- Applicazioni delle cellule BxPC-3 nella ricerca
- Pubblicazioni di ricerca sulle cellule BxPC-3
- Risorse per la linea cellulare BxPC-3: protocolli, video e altro
- Informazioni generali e origine della linea cellulare BxPC-3
- Coltura delle cellule BxPC-3
- Linea cellulare BxPC-3: vantaggi e limiti
- Applicazioni delle cellule BxPC-3 nella ricerca
- 5. Pubblicazioni di ricerca sulle cellule BxPC-3
- Risorse per la linea cellulare BxPC-3: protocolli, video e altro
- Domande frequenti
Informazioni generali e origine della linea cellulare BxPC-3
Conoscere l'origine di una linea cellulare è fondamentale per la sua applicabilità nella ricerca. La familiarità con le sue caratteristiche, tra cui morfologia, dimensione cellulare e ploidia, ne rende l'uso più semplice e pratico. In questa sezione scoprirai l'origine e le caratteristiche generali delle cellule BxPC-3: Cosa sono le cellule BxPC-3? Cos'è la linea cellulare BxPC-3? Qual è l'origine della linea cellulare BxPC-3? Qual è la morfologia delle cellule BxPC-3?
- Le cellule BxPC-3, cellule di carcinoma pancreatico umano, sono state isolate nel 1986 da una donna europea di 61 anni affetta da adenocarcinoma pancreatico. Queste cellule si sono dimostrate tumorigeniche anche dopo che la paziente si era sottoposta a diverse sedute di radioterapia e chemioterapia. Pertanto, la linea cellulare stabilizzata è un modello inestimabile per lo studio dello sviluppo e della progressione del cancro.
- Le cellule BxPC-3 presentano una morfologia simile a quella delle cellule epiteliali.
- Il numero cromosomico modale per BxPC-3 è 59. Queste cellule presentano una delezione omozigote sul cromosoma 18q, che codifica per la proteina SMAD4/DPC4. Inoltre, la linea cellulare è priva della mutazione BxPC-3 kras comune nei tumori pancreatici. In queste cellule tumorali pancreatiche si riscontra anche una delezione del gene BRAF.
Qual è la differenza tra BxPC3 e PANC-1?
Le cellule BxPC-3 PADC (adenocarcinoma duttale pancreatico) e PANC-1 sono linee cellulari primarie di cancro al pancreas con morfologia epiteliale. In questo contesto, le prime cellule possiedono proprietà più simili a quelle epiteliali, mentre le seconde mostrano caratteristiche più mesenchimali [1].
Coltura delle cellule BxPC-3
La linea cellulare BxPC-3 è ampiamente utilizzata nei laboratori di ricerca sul cancro. È necessario conoscere i seguenti punti chiave per una coltura efficiente di questa linea cellulare del cancro al pancreas. Imparerete: Qual è il tempo di raddoppio delle cellule BxPC-3? Come si coltiva la linea cellulare BxPC-3?
Punti chiave per la coltura delle cellule BxPC-3
Tempo di raddoppio della popolazione:
Il tempo di raddoppio delle cellule BxPC-3 varia tra le 48 e le 60 ore.
Aderenzi o in sospensione:
La BxPC-3 è una linea cellulare aderente.
Rapporto di divisione:
Le cellule BxPC-3 vengono sottoposte a subcoltura con un rapporto compreso tra 1:2 e 1:4. Le cellule vengono lavate con 1 x PBS e incubate con una soluzione di passaggio denominata Accutase. Dopo 8-10 minuti, alle cellule viene aggiunto terreno fresco e le cellule vengono centrifugate. Il pellet viene nuovamente risospeso nel terreno di coltura e le cellule vengono trasferite in un nuovo recipiente di coltura per la crescita.
Terreno di crescita:
Per la coltura della linea cellulare BxPC-3 si utilizza il terreno RPMI 1640. Esso viene integrato con siero fetale bovino al 10%, glutammina stabile a 2,1 mM e NaHCO3 a 2,0 g/L per ottenere una crescita cellulare ideale. Il terreno di coltura deve essere sostituito 2 o 3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le colture cellulari BxPC-3 vengono mantenute in un incubatore umidificato a 37 °C collegato a una fonte di CO2 al 5%.
Conservazione:
Le cellule congelate vengono generalmente conservate a una temperatura inferiore a -150 °C o nella fase vapore dell'azoto liquido per proteggere la vitalità delle cellule.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Per congelare le colture cellulari BxPC-3 si possono utilizzare CM-1 o CM-ACF. Si segue un processo di congelamento lento che consente solo un abbassamento della temperatura di 1 °C per evitare qualsiasi shock alle cellule.
Processo di scongelamento:
Le cellule BxPC-3 congelate vengono scongelate in un bagno d'acqua a 37 °C per 40-60 secondi. Dopo che è rimasto un piccolo grumo di ghiaccio, alle cellule vengono aggiunti terreni di coltura freschi e vengono centrifugate per rimuovere gli elementi del terreno di congelamento. Quindi, il pellet cellulare viene risospeso e le cellule vengono dispensate nel pallone per la crescita.
Livello di biosicurezza:
Le colture cellulari BxPC-3 sono mantenute in laboratori di livello di biosicurezza 1.
Linea cellulare BxPC-3: vantaggi e limiti
La BxPC-3 è una nota linea cellulare di adenocarcinoma pancreatico che presenta diversi vantaggi e limiti. Di seguito sono elencati i principali vantaggi e svantaggi della linea cellulare.
Vantaggi
I principali vantaggi delle cellule BxPC-3 sono:
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Modello in vitro del cancro al pancreas
Le cellule BxPC-3, derivate da pazienti affetti da adenocarcinoma pancreatico, presentano caratteristiche rilevanti che le rendono un modello adatto allo studio del comportamento del cancro al pancreas in vitro.
-
Linea cellulare tumorigenica
Le cellule BxPC-3 possiedono proprietà tumorigeniche e possono formare tumori quando vengono iniettate in topi nudi o immunocompromessi. Questi tumori assomigliano molto ai tumori primari di adenocarcinoma pancreatico, rendendo il modello di xenotrapianto BxPC-3 ideale per lo studio della crescita e della progressione del cancro.
Limiti
I limiti associati alla linea cellulare BxPC-3 sono:
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Contaminazione incrociata
La linea cellulare BxPC-3, come qualsiasi altra, comporta un rischio di contaminazione incrociata. I ricercatori devono prestare attenzione e attenersi a rigorosi protocolli di prevenzione della contaminazione durante la manipolazione di queste cellule.
-
Tasso di crescita lento
Le cellule BxPC-3 presentano un tasso di proliferazione relativamente lento, con un tempo di raddoppio compreso tra 48 e 60 ore. Questa caratteristica può richiedere periodi di incubazione più lunghi per esperimenti specifici, causando potenzialmente ritardi nell'avanzamento della ricerca.
Applicazioni delle cellule BxPC-3 nella ricerca
Le cellule BxPC-3 offrono numerose applicazioni nella ricerca sul cancro. Le applicazioni più comuni sono:
- Ricerca sul cancro al pancreas: le cellule BxPC-3 imitano l'adenocarcinoma pancreatico e vengono quindi utilizzate per esplorare i meccanismi genetici e molecolari alla base dello sviluppo e della crescita del tumore. Inoltre, i ricercatori scoprono nuovi biomarcatori e bersagli terapeutici utilizzando queste cellule. Inoltre, le cellule BxPC-3 esprimono in modo significativo fattori angiogenici, ovvero l'interleuchina-8 (IL-8), la prostaglandina E2 (PGE2) e il fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF), che le rendono adatte allo studio dell'angiogenesi. In questo contesto, l'angiogenesi è un processo cruciale associato alla crescita del cancro e alle metastasi. Uno studio pubblicato nel 2022 ha dimostrato che la sovraespressione di laminina-5 gamma-2 (LAMC2) nel PDAC (adenocarcinoma duttale pancreatico) BxPC3 ne potenzia la tumorigenesi attraverso la regolazione della via di segnalazione EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR [2].
- Ricerca e sviluppo di farmaci: la linea cellulare BxPC-3 funge da prezioso modello di test per i farmaci antitumorali. I ricercatori esaminano gli effetti citotossici, antimetastatici e apoptotici dei potenziali farmaci sul PDAC BxPC3. Uno studio condotto da Alexandria Turner e colleghi nel 2020 ha esplorato le proprietà apoptotiche degli estratti di frutto di Elaeocarpus reticulatus nelle cellule tumorali pancreatiche BxPC-3 [3]. Analogamente, nel 2020 è stata condotta una ricerca che ha determinato il potenziale antitumorale di un estratto metanolico di una pianta chiamata Oxialis obtriangulata nelle cellule BxPC-3. Inoltre, i ricercatori hanno studiato anche il percorso meccanicistico cellulare attraverso il quale l'estratto vegetale esercitava effetti terapeutici [4].
5. Pubblicazioni scientifiche sulle cellule BxPC-3
Questa sezione elenca alcune delle pubblicazioni più citate e interessanti relative alla linea cellulare BxPC-3.
Questa pubblicazione su Chemico-Biological Interactions (2020) ha esplorato gli effetti apoptotici di un prodotto naturale, il licocumarone, sulle cellule tumorali pancreatiche BxPC-3.
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato su Anticancer Research (2022). Lo studio ha ipotizzato che l'idrossiclorochina causi la morte delle cellule BxPC3 inibendo il gene BCL-XL.
Questa ricerca è stata pubblicata nel 2020 sul Journal of Cellular Biochemistry. Lo studio afferma che un composto naturale, il salidroside, mostra attività antitumorali nelle cellule BxPC-3 regolando la cascata di segnalazione dell'HIF-1α (fattore inducibile dall'ipossia) e del LOXL2.
Questo articolo pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy suggerisce che l'ibrutinib possa essere utilizzato come un ottimo radiosensibilizzante nei pazienti affetti da cancro al pancreas. In vitro, uno studio condotto sulle cellule BxPC-3 indica che esso riduce la fosforilazione dell'EGFR nelle cellule BxPC-3 e l'espressione di pAKT e dei geni a valle sovraregolati dalla radioterapia.
Questo studio pubblicato su Integrative Cancer Therapies ha suggerito che un prodotto naturale, la chelidonina, esercita un'attività apoptotica nelle cellule pancreatiche umane BxPC-3 attraverso la regolazione della segnalazione di p53 e GADD45a in BxPC3.
Risorse per la linea cellulare BxPC-3: protocolli, video e altro
La linea cellulare BxPC-3 presenta numerosi vantaggi che la rendono adatta all'uso nella ricerca. Molte risorse online sulla linea cellulare BxPC-3 menzionano i suoi protocolli di manipolazione, mantenimento e trasfezione.
- Trasfezione BxPC3: questo video è una guida passo passo per imparare il protocollo di trasfezione per le cellule BxPC-3.
Questa sezione dell'articolo comprende alcuni link che spiegano i protocolli di coltura cellulare BxPC3.
- Coltura cellulare BxPC-3: questo sito web vi aiuterà ad apprendere i protocolli per la subcoltura e la manipolazione di colture BxPC-3 crioconservate e proliferative.
Riferimenti
- Kim, Y., et al., Profilo proteomico comparativo delle linee cellulari di adenocarcinoma duttale pancreatico. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., La sovraespressione della laminina-5 gamma-2 promuove la tumorigenesi dell'adenocarcinoma duttale pancreatico attraverso la cascata EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Gli estratti di frutto di Elaeocarpus reticulatus riducono la vitalità e inducono l'apoptosi nelle cellule tumorali del pancreas in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: pp. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Potenziale antitumorale dell'Oxialis obtriangulata nelle cellule tumorali del pancreas attraverso la regolazione della via mediata da ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.