Linea cellulare KG-1
Caratteristiche generali e origine della linea cellulare KG-1
L’origine e le caratteristiche generali di una linea cellulare aiutano il ricercatore a decidere come utilizzarla nel proprio lavoro. È consigliabile esaminare queste informazioni prima di iniziare a lavorarci. Questa sezione dell’articolo è interamente dedicata all’origine e alle caratteristiche dei macrofagi KG-1. Qui scoprirai: Cosa sono le cellule KG-1? Cos’è la linea cellulare KG-1a? Qual è l’origine della linea cellulare KG-1? Qual è la morfologia delle cellule KG-1?
- La KG-1 è una linea cellulare di tipo linfoblastico derivata dall’aspirato midollare di un uomo caucasico (59 anni) affetto da leucemia mieloide acuta. È stata isolata da Koeffler e Golde nel 1978. Queste cellule si trovano principalmente allo stadio di maturazione dei promielociti o dei mieloblasti [1].
- Le cellule KG-1 presentano una morfologia simile a quella dei linfoblasti.
- Il cariotipo della linea cellulare KG-1 presenta un numero modale di cromosomi pseudodiploide.
KG-1 e KG-1a
La KG-1a è una sottolinia delle cellule KG-1 parentali. È stata sviluppata dopo 35 passaggi della linea cellulare KG-1. È meno differenziata rispetto alla linea cellulare KG-1. Inoltre, questa sottolinia è meno matura dal punto di vista citochimico, morfologico e funzionale rispetto alla linea cellulare parentale (KG-1).
Informazioni sulla coltura della linea cellulare KG-1
Questa sezione dell’articolo tratterà tutte le informazioni fondamentali sulla coltura delle cellule KG-1 che potrebbero facilitare il vostro lavoro. Qui imparerete: qual è il tempo di raddoppio della linea cellulare KG-1? Quali sono le condizioni di coltura dei macrofagi KG-1? Come si coltivano le cellule KG-1?
Punti chiave per la coltura delle cellule KG-1
Tempo di raddoppio:
Il tempo di raddoppio delle cellule KG-1 è di circa 45 ore. Tuttavia, può variare a seconda delle condizioni di coltura.
Aderenzi o in sospensione:
Le cellule KG-1 crescono in sospensione.
Densità cellulare:
La densità cellulare ottimale per la linea cellulare KG-1 è compresa tra 1 e 3 x 10⁵ cellule/ml. Per la subcoltura, la sospensione cellulare viene trasferita in una provetta sterile e centrifugata. Alle cellule raccolte vengono quindi aggiunti terreni di coltura freschi e vengono accuratamente risospese. Successivamente, le cellule vengono distribuite in nuove fiasche e coltivate alla densità cellulare ottimale. Le cellule possono essere divise quando raggiungono una densità cellulare massima di 1 - 2 × 10⁶ cellule/ml.
Terreno di crescita:
IMDM (terreno di Iscove modificato di Dulbecco) contenente il 10% di FBS, 4,5 g/L di glucosio, 4 mM di L-glutammina, 1,0 mM di piruvato di sodio e 3,0 g/L di NaHCO₃. Il terreno va sostituito dopo tre giorni.
Condizioni di crescita:
La linea cellulare KG1 AML viene coltivata in un incubatore umidificato a una temperatura di 37 °C e con un'alimentazione di CO₂ al 5%.
Conservazione:
Le cellule congelate vengono conservate nella fase vapore dell’azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150 °C in un congelatore elettrico a bassissima temperatura per preservarne la vitalità.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Il CM-1 o il CM-ACF sono adatti per il congelamento delle cellule KG-1. Le cellule vengono congelate utilizzando un processo di congelamento lento per proteggerle da eventuali shock. Questo metodo consente un abbassamento graduale della temperatura di 1 °C al minuto.
Processo di scongelamento:
Le cellule vengono scongelate in un bagno d’acqua preriscaldato a 37 °C fino a quando rimane solo un piccolo grumo di ghiaccio. Alle cellule scongelate viene aggiunto il terreno fresco e vengono centrifugate per rimuovere i componenti del terreno di congelamento. Il pellet cellulare viene accuratamente risospeso e versato in nuove fiasche contenenti terreno di coltura.
Livello di biosicurezza:
Per la mantenimento delle colture cellulari KG-1 è indispensabile un laboratorio di biosicurezza di livello 1.
Pubblicato: 2023 | Ultima revisione: maggio 2026
- Linea cellulare KG-1: vantaggi e limiti
- Applicazioni delle cellule KG-1 nella ricerca
- Pubblicazioni sulle cellule KG-1
- Informazioni sulla coltura della linea cellulare KG-1
- Caratteristiche generali e origine della linea cellulare KG-1
- 6. Risorse per la linea cellulare KG-1: protocolli, video e altro
- Domande frequenti
Linea cellulare KG-1: vantaggi e limiti
Come altre linee cellulari, anche la linea cellulare KG-1 della leucemia mieloide presenta numerosi vantaggi e limiti. In questa sezione ne esamineremo alcuni particolarmente rilevanti, che potrebbero rivelarsi determinanti nella scelta del suo impiego nella vostra ricerca.
Vantaggi
I principali vantaggi delle cellule KG-1 sono:
-
Facilità di coltura
Le cellule KG-1 si coltivano facilmente nei laboratori di ricerca, grazie a requisiti di coltura cellulare semplici. La facilità di mantenimento e le condizioni di crescita consentono l’accesso a un ampio spettro di ricercatori dotati di strutture di base per la coltura cellulare.
-
Modello di leucemia mieloide acuta (LMA)
Derivata da un paziente di sesso maschile affetto da leucemia mieloide acuta (LMA), la linea cellulare KG-1 LMA costituisce uno strumento prezioso per lo studio della biologia della LMA e per la ricerca su potenziali terapie, fornendo approfondimenti sui meccanismi alla base di questa malattia e sulle strategie terapeutiche.
Limiti
I limiti associati alla linea cellulare KG1 sono:
-
Modello in vitro
Le cellule KG-1 costituiscono un prezioso modello in vitro per la ricerca sull’AML; tuttavia, è importante notare che potrebbero non replicare appieno la complessità della malattia in vivo, fungendo da modello cellulare semplificato che potrebbe non comprendere tutti gli aspetti della biologia dell’AML.
Applicazioni delle cellule KG-1 nella ricerca
Le cellule KG-1 offrono diverse applicazioni promettenti nella ricerca biomedica. Tra le ricerche più importanti che utilizzano i macrofagi KG-1 figurano:
- Ricerca sul cancro: le cellule KG-1 sono state ottenute da un paziente affetto da leucemia mieloide acuta e sono quindi considerate un prezioso strumento di ricerca per lo studio della biologia della LMA. I ricercatori utilizzano queste cellule per studiare i meccanismi cellulari e molecolari che determinano lo sviluppo, la crescita e la resistenza ai farmaci della LMA. Ciò comporta anche l’identificazione e la scoperta di nuovi biomarcatori, mutazioni genetiche e vie di segnalazione associate alla LMA. Ad esempio, uno studio condotto nel 2019 ha dimostrato che l’RNA lungo non codificante linc00239 favorisce la resistenza alla doxorubicina e il comportamento maligno nelle cellule di leucemia mieloide acuta KG-1. Ulteriori studi hanno rivelato che l’lncRNA attiva la via di segnalazione PI3K/Akt/mTOR per esercitare questi effetti nelle cellule della LMA [2].
- Tossicologia: La linea cellulare KG1 è ampiamente utilizzata nella ricerca tossicologica. I ricercatori testano la tossicità e l’efficacia di potenziali agenti terapeutici, inclusi farmaci chemioterapici e terapie mirate, sulle cellule di leucemia mieloide KG1, al fine di identificare candidati farmacologici promettenti per future valutazioni precliniche e cliniche. Una ricerca condotta nel 2018 ha analizzato la tossicità dei nano-niosomi contenenti doxorubicina sulla linea cellulare KG1 di LMA. Lo studio ha suggerito che il nano-niosoma sia un vettore idoneo per la somministrazione di farmaci, poiché ne potenzia l’efficacia [3]. In un’altra indagine, i ricercatori hanno esplorato gli effetti terapeutici del tè all’ortica preparato con le foglie della pianta Urtica dioica. Lo studio ha rivelato che questo estratto acquoso di foglie della pianta esercita effetti antitumorali sulle cellule della leucemia mieloide acuta KG-1 e U937 [4].
Pubblicazioni sulle cellule KG-1
Questa sezione dell’articolo elenca alcune interessanti pubblicazioni di ricerca sulle cellule KG-1.
Questo articolo è stato pubblicato sul *Journal of Cellular Physiology* (2019). Lo studio ha ipotizzato che la quercetina sensibilizzi la linea cellulare KG-1 della leucemia mieloide acuta (LMA) nei confronti del ligando induttore di apoptosi correlato al TNF (TRAIL) e possa potenziare l’effetto della citotossicità indotta dal TRAIL nelle cellule.
Questo articolo, pubblicato sul *Tropical Journal of Pharmaceutical Research* (2022), ha ipotizzato che la sottoregolazione del fattore di trascrizione 8 simile a Krüppel (KLF8) sopprima la proliferazione e la glicolisi delle cellule di LMA, favorendo l’apoptosi attraverso la regolazione della via di segnalazione AKT/mTOR.
Questo studio pubblicato su *Cell Journal* (Yakhteh) (2020) ha esplorato i potenziali effetti del triossido di arsenico e del sorafenib sulle cellule U937 e KG-1.
Questo studio, pubblicato su Medical Oncology (2020), ha valutato l’OXPHOS e la glicolisi come bersagli terapeutici nella linea cellulare KG-1 della leucemia mieloide acuta (LMA).
Questa pubblicazione del 2020 su *Drug Design, Development, and Therapy* ha suggerito che i composti a base di curcumina e talidomide esercitino in modo sinergico effetti apoptotici nelle cellule KG-1 attraverso la riduzione dell’espressione di STAT3 e Bcl-xL.
6. Risorse relative alla linea cellulare KG-1: protocolli, video e altro ancora
Di seguito sono riportate alcune risorse online disponibili sulle cellule KG-1.
- Subcoltura di cellule in sospensione: questo video illustra il protocollo per la subcoltura di colture cellulari in sospensione come le KG-1.
Il seguente link contiene il protocollo di coltura cellulare KG-1:
- Linea cellulare KG-1: questo sito web offre numerose informazioni di base sulla coltura cellulare della linea KG-1. Include informazioni sui terreni di coltura della linea cellulare e sui protocolli per la subcoltura e la gestione delle colture crioconservate e proliferative.
Riferimenti
- Pelliccia, F., V. Ubertini e N. Bosco, L’importanza dell’analisi citogenetica molecolare prima dell’utilizzo delle linee cellulari nella ricerca: il caso della linea cellulare leucemica KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): pagg. 237-240.
- Yang, Y., et al., L’RNA non codificante lungo linc00239 promuove comportamenti maligni e la chemioresistenza alla doxorubicina, in parte attraverso l’attivazione della via PI3K/Akt/mTOR nelle cellule di leucemia mieloide acuta. Oncology Reports, 2019. 41(4): pp. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Preparazione e studio di nano-niosomi contenenti doxorubicina e valutazione della loro tossicità sulla linea cellulare KG-1 della leucemia mieloblastica acuta. Payavard Salamat, 2018. 12(4): pp. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Il tè all’ortica inibisce la crescita delle cellule della leucemia mieloide acuta in vitro favorendo l’apoptosi. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.