Folyékony nitrogén biztonsági tippek a biztonságos cellatároláshoz

A sejttenyésztő laboratóriumokban a folyékony nitrogén elengedhetetlen az értékes sejtvonalak hosszú távú tárolásához és megőrzéséhez. A Cytionnál mind a sejtvonalaink minőségét, mind a kriogén anyagokat kezelő laboratóriumi személyzet biztonságát kiemelten kezeljük. Ez az átfogó útmutató a sejtek tárolására szolgáló alkalmazásokban a folyékony nitrogénnel való munkavégzéshez szükséges alapvető biztonsági intézkedéseket és legjobb gyakorlatokat ismerteti.

A folyékony nitrogén kezeléséhez szükséges alapvető egyéni védőfelszerelések (PPE)

Amikor folyékony nitrogénnel dolgozik az olyan sejtvonalak, mint a HeLa sejtek vagy az MCF-7 sejtek konzerválásához, a megfelelő egyéni védőfelszerelés nem képezi vita tárgyát. A szem és az arcszövetek súlyos károsodását okozó fröccsenések és gőzök elleni védelem érdekében kötelező a teljes arcot fedő védőszemüveg viselése. A hőszigetelt kriogén kesztyűknek jóval feljebb kell érniük az alkarig, mivel a hagyományos laboratóriumi kesztyűk nem nyújtanak megfelelő védelmet a rendkívüli hideg ellen. Külső védőrétegként laboratóriumi köpenyt kell viselni, amelyet ideális esetben egy fröccsenésálló műanyag kötény egészít ki, hogy további védelmet nyújtson a véletlen kiömlések ellen. Amikor a sejteket a CM-1 fagyasztási közegből a folyékony nitrogén tárolóba helyezzük át, győződjünk meg arról, hogy az egyéni védőeszközök jó állapotban vannak, és nem mutatnak kopás vagy sérülés jeleit. Ne feledje, hogy a folyékony nitrogénnel való érintkezés még kis mértékben is azonnali szövetkárosodást okozhat, ezért az LN2 tárolórendszerekkel való minden interakcióhoz elengedhetetlen az átfogó egyéni védőfelszerelés.

Szellőzési követelmények és oxigénmonitorozás

A megfelelő szellőzés kulcsfontosságú az olyan értékes kutatási anyagok, mint az U937 sejtek és a RAJI sejtek folyékony nitrogénben történő tárolásakor. Ahogy az LN2 elpárolog, gyorsan kitágul - egy liter folyékony nitrogénből körülbelül 700 liter nitrogéngáz keletkezik, amely gyorsan kiszoríthatja az oxigént a zárt térben. A folyékony nitrogén tárolására szolgáló területet fel kell szerelni mechanikus szellőztető rendszerrel és oxigénfigyelő készülékekkel. A több sejtvonalat és nagy mennyiségű CM-1 - 500 ml fagyasztási közeget tároló létesítmények számára állandó oxigénmonitorok telepítését javasoljuk, amelyek hangjelzéssel ellátott riasztókészülékei 18%-os oxigénkoncentrációnál lépnek működésbe. A tárolóhelyiségnek magas szintű szellőztetési pontokkal kell rendelkeznie, mivel a nitrogéngáz felmelegedve valamivel könnyebb, mint a levegő. Soha ne hagyatkozzon kizárólag a természetes szellőzésre - a mechanikus szellőztető rendszereket rendszeresen ellenőrizni kell, és a gyártó előírásai szerint kell karbantartani a következetes légcsereráták biztosítása érdekében.

A kétszemélyes biztonsági protokoll

Amikor érzékeny sejtvonalak, például HUVEC sejtek vagy humán mesenchymális őssejtek - csontvelő - krioprezerválásához folyékony nitrogént kezel, mindig párban dolgozzon. Ez a pajtásrendszer különösen kritikus az olyan kulcsfontosságú műveletek során, mint a minták átvitele a tárolóba, a kriogén edények újratöltése vagy a nagy mennyiségű Freeze Medium CM-1 kezelése. A második személy biztonsági megfigyelőként szolgál, és azonnal reagálni tud vészhelyzetekben, például kiömlés, oxigénhiány vagy személyi sérülés esetén. A személyt a laboratórium kijáratának közelében kell elhelyezni, látókapcsolatot tartva fenn, miközben távol marad a közvetlen munkaterülettől. Mindkét csapattagnak teljes körűen ki kell képzettnek lennie a vészhelyzeti eljárásokban, és ismernie kell a biztonsági berendezések helyét. A folyékony nitrogén kezelését a szokásos munkaidőre ütemezze, amikor a támogató személyzet jelen van, és soha ne próbálkozzon kriogén műveletekkel munkaidőn kívüli vagy hétvégi időszakokban.

Kötelező képzési követelmények az LN2 kezelésére vonatkozóan

Az olyan értékes mintákat, mint a HeLa sejtek, tartalmazó folyékony nitrogén tároló rendszerek kezelése vagy a CM-ACF fagyasztási közeggel való működés előtt a szérummentes, átfogó képzés kötelező. Ennek a képzésnek ki kell terjednie a megfelelő kezelési technikákra, a kriogén veszélyek megértésére és a vészhelyzeti reagálási eljárásokra. A sejtvonalainkkal dolgozó munkatársaknak bizonyítaniuk kell a biztonságos töltési eljárások, az egyéni védőeszközök megfelelő használata és az oxigénhiányos kockázatok megértése terén szerzett jártasságukat. A képzésnek magában kell foglalnia a kisebb mennyiségek felügyelet mellett történő gyakorlati gyakorlását, mielőtt nagyobb mennyiségeket kezelnének. A képzés elvégzéséről dokumentációt kell vezetni, és rendszeres továbbképzéseket kell tervezni. Az új munkatársaknak legalább három teljes LN2-kezelési eljárás során a tapasztalt személyzetet kell követniük, mielőtt önállóan, csapatban dolgoznának. Ne feledje, hogy még a tapasztalt személyzetnek is szüksége van rendszeres átképzésre, hogy a biztonsági protokollok frissek és aktuálisak maradjanak.

Oxigénfigyelő és riasztórendszerek

A kritikus kutatási anyagok, például az emberi mesenchymális őssejtek - zsírszövet és az emberi mesenchymális őssejtek - Whartons zselé folyékony nitrogénben történő tárolásakor a megbízható oxigénfelügyeleti rendszerek nem képezik vita tárgyát. Fix oxigénmonitorokat kell telepíteni, amelyek riasztása 18%-os oxigénkoncentráció (v/v) esetén lép működésbe. Ezek a rendszerek stratégiai elhelyezést igényelnek: a padlószint közelében, ahol a levegőnél nehezebb gázok kezdetben összegyűlnek, a munkamagasságban és az LN2 tárolóedények közelében. A minták CM-ACF - szérummentes - 500 ml-es fagyasztási közegben történő tartósításakor gondoskodjon arról, hogy a tárolóhelyek hallható és látható riasztóberendezésekkel legyenek felszerelve, amelyek a laboratóriumi háttérzajok felett is felismerhetők. Vezessen be havi ellenőrzési ütemtervet minden oxigénmonitorozó rendszerre, vezessen kalibrációs nyilvántartást, és dolgozzon ki egyértelmű evakuálási eljárásokat a riasztások beindulása esetén. A személyzet soha nem próbálhatja meg felülírni vagy hatástalanítani ezeket a biztonsági rendszereket, függetlenül a folyékony nitrogénnel tervezett munka időtartamától.