U87MG sejtek - Glioblasztóma-kutatás az U87MG felhasználásával és annak hatása az agydaganatok tanulmányozására
AzU-87 MG, a humán primer glioblasztóma sejtvonal széles körben használatos a biológiai kutatásokban. Különösen az idegtudományok és az immunonkológia területén alkalmazzák ezeket a sejteket.
Az U-87 MG sejtvonal általános jellemzői és eredete
Ez a szakasz az U87-es sejtvonal eredetét és általános jellemzőit veszi sorra. Megtudhatja, hogy mik azok az U-87 MG sejtek? Honnan származik az U87 sejt? Mi az U-87 MG teljes alakja? Milyen nagyok az U87 sejtek? Milyen az U87 sejtvonal morfológiája?
- Az U87 sejtvonal egy glioblasztóma, asztrocitóma sejtvonal. Ezt 1966-ban hozták létre az Uppsalai Egyetemen. A sejteket egy 44 éves kaukázusi férfitól nyerték, aki glioblasztóma betegségben szenvedett. Ezt a sejtvonalat hivatalosan U 87 MG-nek nevezik, ami az Uppsala 87 Malignant Glioma rövidítése.
- Az U 87 MG sejtek hámsejt-szerű morfológiát képviselnek.
- Az U 87 MG sejtek mérete 12 és 14 µm közötti átmérőjű.
- Ez a humán glioblasztóma sejtvonal hipodiploid és 44-es kromoszómaszámmal rendelkezik a sejtek körülbelül 48%-ában. Azonban 5,9%-os sejtpopulációban magasabb ploidia is előfordul.
U-87 MG sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
Mielőtt az U 87 MG sejtekkel dolgozna, meg kell ismernie a glioblasztóma sejtek tenyésztésével kapcsolatos következő kulcsfontosságú pontokat. Különösen a következőket kell tudnia: Mennyi az U 87 MG sejtek populációduplázódási ideje? Milyen táptalajt használnak az U87 sejtek tenyésztéséhez? Mekkora az U 87 MG sejtvonal vetési sűrűsége?
Az U-87 MG sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
A populáció megduplázódási ideje: |
Az U 87 MG sejtek populációduplázódási ideje 18-38 óra között van. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
Az U 87 MG egy adherens sejtvonal. A sejtek hosszúkás alakúak és monolayerként növekednek. |
|
Ültetési sűrűség: |
Az U 87 MG glioblasztóma sejtvonalat 1 x104 sejt/cm2-es sejtsűrűséggel ajánlott beültetni. Az adherens U87 sejteket 1 x PBS-szel mossuk és Accutase oldattal inkubáljuk. Ezt követően a disszociált sejteket centrifugáljuk és visszanyerjük. A sejteket óvatosan reszuszpendáljuk és új, növekedési tápfolyadékot tartalmazó lombikokba adagoljuk. |
|
Növesztőközeg: |
Az U 87 MG sejtvonalat EMEM-ben (Eagle's minimal essential medium) tenyésztjük, amelyet 1,0 g/L L-glükózzal, 2,0 mM L-glutaminnal, 2,2 g/L NaHCO3-mal, 1% NEAA-val, 1 mM nátrium-piruváttal és 10% FBS oldattal egészítettünk ki. A táptalajt 2-3 naponta meg kell újítani. |
|
Növekedési feltételek: |
Az U-87 MG sejtek optimális növekedéséhez 5%-os CO2-ellátást biztosító, párásított inkubátorban, 37°C-os hőmérsékleten kell tartani. |
|
Tárolás: |
Az U87 sejteket vagy folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150°C alatti hőmérsékleten tartjuk a glioblasztóma sejtek maximális életképességének megőrzése érdekében. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A CM-1 vagy CM-ACF fagyasztási közeg alkalmas az U 87 MG sejtek fagyasztására. A lassú fagyasztási folyamat ajánlott, mivel ez megakadályozza a sejtek sokkhatását és védi a sejtek életképességét. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott U-87 MG sejtvonal fioláit 37 °C-os vízfürdőben felolvasztjuk. A sejtekhez növekedési tápfolyadékot adunk, újraszuszpendáljuk, és új lombikokban tenyésztjük. Ezzel ellentétben az U87 sejtek centrifugálással eltávolíthatók a fagyasztási közegből, majd tenyésztésbe helyezhetők. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
Az U 87 MG sejtkultúrák kezeléséhez 1. biológiai biztonsági szint szükséges. |
Az U-87 MG cellák előnyei és hátrányai
Amikor egy sejtvonalra gondolunk, az első dolog, ami eszünkbe jut: Milyen előnyei vannak az U-87 MG sejtek használatának? Milyen hátrányai vannak az U87 sejteknek?
Előnyök
Az U 87 MG sejtvonalakat széles körben használják a kutatásban. Néhány, ezzel a sejtvonallal kapcsolatos előny:
Előnyök
- Könnyen tenyészthető: Az U 87 MG sejtek könnyen fenntarthatók a kultúrában. Nem igényelnek kényes vagy bonyolult sejttenyésztési követelményeket
- Homogenitás: Az U-87 MG egy homogén sejtvonal. A populációban lévő sejtek többsége azonos genetikai felépítéssel rendelkezik, és így hasonló tulajdonságokkal rendelkezik. Ezeket a sejteket sejtfolyamatok tanulmányozására, gyógyszerek szűrésére és tesztelésére használják
- Jól jellemzett: Ez a glioblasztóma-sejtvonal jól jellemezhető a növekedési jellemzők, a morfológia és a génexpresszió alapján, ami értékes kutatási eszközzé teszi
Hátrányok
- Korlátozott alkalmazhatóság: Az U 87 MG egy glioblasztóma-sejtvonal, így alkalmazásai elsősorban a glioblasztómák és a mögöttes molekuláris mechanizmusok tanulmányozására korlátozódnak. Nem biztos, hogy alkalmas más ráktípusok vizsgálatára.
Az U-87 MG sejteket tartalmazó kutatási alkalmazások
Az U87MG glioblasztóma sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban, különösen a glioblasztóma kutatásában. Az U 87 MG sejtek néhány kutatási alkalmazása a következő:
- Rákbiológiai kutatások: Az U87 sejtvonalat a rák növekedésének és fejlődésének, a mögöttes molekuláris mechanizmusoknak, a jelátviteli útvonalaknak és a tumoros mikrokörnyezetnek a tanulmányozására használják. Egy 2020-ban közzétett tanulmány egy glioblasztóma in vitro modellt, az U87 MG sejtvonalat használta a BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) gén mint terápiás célpont vizsgálatára. Az eredmények azt mutatták, hogy a BMAL1 gén a ciklin B1, a metalloproteináz-9 és a foszfo-AKT gének expressziójának elnyomása révén gátolja a glioblasztóma sejtek proliferációját, migrációját és invázióját [1]. Egy másik, 2019-ben végzett kutatás az U87-sejtvonalat használta fel, és azt vizsgálta, hogy a Lipopoliszacharid-indukált tumor nekrózis faktor-alfa (LITAF) transzkripciós faktor lefelé szabályozott expressziója a FOXO-1 útvonal felszabályozásán keresztül fokozhatja a glióma sejtek sugárérzékenységét. A LITAF a p53-indukált 7-es gén (PIG7) néven is ismert [2].
- Gyógyszerkutatás és fejlesztés: Az U-87 MG sejtek felhasználhatók gyógyszerszűrési és tesztelési célokra, lehetővé téve a kutatók számára új potenciális rákellenes gyógyszerek azonosítását, valamint hatékonyságuk és toxicitásuk értékelését. Kutatásként az U 87 MG glioblasztóma sejtvonalat használták az Inula helenium (L.) kivonat antioxidáns és rákellenes hatásának értékelésére [3]. Hasonlóképpen egy másik publikáció is említette az U87 sejtvonal használatát a növényi kivonatok citotoxikus és apoptotikus hatásának vizsgálatára [4]. Továbbá egy 2018-ban publikált kutatás a Nuphar növényekből kivont szeszkviterpén alkaloidok citotoxikus hatását vizsgálta érzékeny és gyógyszerrezisztens U 87 MG sejtvonalakon [5].
Rendelje meg az U87 MG glioma sejtvonalat még ma
U-87 MG sejtvonal: Kutatási publikációk
Íme néhány kiemelkedő kutatási publikáció az U 87 MG sejtvonallal kapcsolatban.
Ez a Neuroreport 2018-ban megjelent cikk azt javasolta, hogy a hipoxia a PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α jelátviteli útvonal szabályozásán keresztül fokozhatja a humán glioblasztóma sejtek migrációját és invázióját.
Ez a tanulmány a Frontiers in Pharmacology 2020 című folyóiratban jelent meg. A kutatási eredmények szerint egy flavonoid, az Eriodictyol rákellenes hatást fejt ki az U87 sejtvonalra, és elnyomja a sejtek proliferációját és metasztázisát. A vegyület tumorellenes tulajdonságait a PI3K/Akt/NF-κB útvonal modulálásával közvetíti.
Az Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) című szaklapban megjelent kutatás szerint a Xihuang tabletta nevű kínai gyógynövény formula a ROS által aktivált Akt/mTOR/FOXO1 kaszkádot megcélozva képes apoptózist indukálni az U87 sejtekben.
A LITAF a FoxO1 útvonalon keresztül fokozza a humán glióma sejtek sugárérzékenységét
Ez a kutatási cikk a Cellular and Molecular Neurobiology folyóirat 2019-es számában jelent meg. A tanulmány azt javasolta, hogy egy transzkripciós faktor, a LITAF a FOXO-1 jelátviteli útvonal szabályozásán keresztül szabályozza le és fokozza a glióma sejtek sugárérzékenységét.
Ez a cikk a Biointerface Research in Applied Chemistry (2019) című folyóiratban jelent meg. A kutatók U 87 MG sejteket használtak a kurkuminnal töltött PLGA nanorészecskék citotoxikus hatásának vizsgálatára.
Az U-87 MG sejtekkel kapcsolatos források: Jegyzőkönyvek, videók és még sok más: protokollok, videók és egyéb
Az U87MG glioblasztóma sejtvonalat számos rákkutató laboratóriumban használják. Néhány, ezt a sejtvonalat bemutató forrás:
- Az U87 sejtvonal transzfekciója: Ez a dokumentum leírja Önnek az U 87 MG sejtek transzfekciós protokollját.
- U 87 MG sejtvonal transzfekciója: Ez a videó egy bemutató, amely lépésről lépésre elmagyarázza az U87 sejtek transzfekciós protokollját.
Az U87 sejtek sejttenyésztési protokolljának forrása az alábbiakban található:
- U87 MG sejtek: Ez a link alapvető információkat tartalmaz az U 87 MG sejtvonalról. Rövid sejtosztási, fagyasztási és kiolvasztási protokollokat tartalmaz.
Betekintés az U87 MG glioma kutatásába: Glilioma Glilioma: Gyakran ismételt kérdések
Hivatkozások
- Gwon, D.H., et al., A BMAL1 elnyomja az U87MG sejtek proliferációját, migrációját és invázióját a ciklin B1, a foszfo-AKT és a metalloproteináz-9 downregulálásával. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF fokozza a humán glióma sejtek sugárérzékenységét a FoxO1 útvonalon keresztül. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., Inula helenium (L.) kivonatának antioxidáns és rákellenes hatása humán U-87 MG glioblasztóma sejtvonalon. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Nuphar növényekből származó szeszkviterpén alkaloidok citotoxicitása érzékeny és gyógyszerrezisztens sejtvonalakkal szemben. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.