T98G sejtvonal
AT98G sejtek egy humán glioblasztóma sejtvonalat alkotnak, amelyet általában az orvosbiológiai kutatásokban használnak. Ezeket a sejteket különösen az agydaganatos vizsgálatokban használják fel a döntő fontosságú sejtek és az ehhez hozzájáruló molekuláris tényezők vizsgálatára. Ezenkívül segítenek a kutatóknak az új rákellenes gyógyszerek szűrésében és tesztelésében, amelyek segíthetik a gyógyszerfejlesztést.
Ez a cikk tartalmazza a T98G sejtvonallal kapcsolatos összes lényeges részletet, amelyre a vele való munka megkezdése előtt szüksége lesz, mint például:
- A T98G sejtvonal általános jellemzői és eredete
- A T98G sejtvonalra vonatkozó tenyésztési információk
- T98G sejtvonal: T98G9898-típus: előnyök és hátrányok: előnyök és hátrányok
- A T98G sejtek alkalmazásai
- A T98G sejteket tartalmazó kutatási publikációk
- A T98G sejtekkel kapcsolatos források: Jegyzőkönyvek, videók és egyéb
1. A T98G sejtvonal általános jellemzői és eredete
A cikk ezen szakasza segít a T98G sejtvonal alapvető jellemzőinek feltárásában. Tartalmazni fogja a sejtvonal eredetére, morfológiájára, méretére és ploidiájára vonatkozó információkat. Ezen túlmenően átfogóan megérti a következő kérdéseket: Mik azok a T98G sejtek? Milyen típusú sejt a T98G? Honnan származik a T98G? Milyen jellemzői vannak a T98G sejtvonalnak? Milyen a T98G U87 glioblasztóma sejtvonal?
- A T98G sejtvonalat GH Stein hozta létre. Olyan fibroblaszt-szerű sejtek alkotják, amelyeket egy 61 éves, glioblastoma multiforme-ban szenvedő kaukázusi férfi agyszövetéből nyertek [1].
- A T98G sejtek nem tumorogének; nem okoznak daganatot, ha meztelen egerekbe injektálják őket. Megfelelő lehorgonyzás mellett azonban hajlamosak a sejtkultúrában való szaporodásra.
- Ezek a sejtek fibroblaszt sejtekhez hasonló morfológiával rendelkeznek.
- A T98G glioblasztóma sejtvonal hiperpentaploidikus. A modális kromoszómaszám 128 és 132 között változik. A sejtpopuláció 1,39%-ánál magasabb ploidia is előfordulhat.
T98 Vs T98G
Mindkettő humán glioblasztóma sejtvonal, és hasonló eredetűek. Az egyetlen különbség e sejtvonalak között a kromoszómák száma. A T98G majdnem kétszer annyi kromoszómával rendelkezik, mint a T98. Ezért a T98G-t a T98 poliploid változatának nevezik.
T98G Vs U87
Az U87 és a T98G egyaránt az agydaganatok kutatásában használt emberi glioblasztóma sejtvonalak. Az U87 agresszívebb fenotípust mutat a T98G GBM-hez képest.
2. A T98G sejtvonalra vonatkozó tenyésztési információk
A sejtvonallal kapcsolatos tenyésztési információkat elengedhetetlenül fontos tudni, mielőtt elkezdené a munkát vele. Segítségükkel könnyedén és kényelmesen kezelheti a sejtvonalat a laboratóriumban. Tudnia kell: Mennyi a T98G sejtvonal megduplázódási ideje? Milyen növekedési közeg a legjobb a T98G sejtek számára? Milyenek a T98G növekedési jellemzői? Mekkora a T98G sejtek vetési sűrűsége? Hogyan kell a T98G sejteket lefagyasztani?
A T98G sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A T98G sejtek hozzávetőleges megduplázódási ideje 40 óra. Ez a tenyésztési körülményektől függően változhat. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A T98G sejtek tapadnak. A tenyésztőedények aljára tapadnak, és monoréteget alkotnak. |
|
Osztott arány: |
A T98G sejteket 1:2 és 1:5 közötti osztott arányban szubkultiválják. Ehhez a sejteket először 1 X PBS pufferrel mossuk, majd passzázsoldattal (Accutase) inkubáljuk 8-10 percig környezeti hőmérsékleten. Az inkubáció után a leválasztott sejteket friss táptalajhoz adjuk és centrifugáljuk. Ezután az összegyűjtött sejtpelletet óvatosan reszuszpendáljuk, és a sejteket egy növekedési tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőlombikba adagoljuk. |
|
Növesztőközeg: |
A T98G sejtek tenyésztéséhez 10% magzati szarvasmarha szérumot, 2 mM L-Glutamint, 2,2 g/L NaHCO3-t és EBSS-t tartalmazó EMEM táptalajt használunk. A táptalajt hetente 3-4 alkalommal kell cserélni. |
|
Növekedési feltételek: |
A T98G sejteket 37 °C-os, párásított inkubátorban tartjuk, CO2-ellátásra csatlakoztatva. |
|
Tárolás: |
A fagyasztott sejteket -150°C alatt vagy folyékony nitrogén gőzfázisában lehet tárolni a sejtek életképességének hosszabb távú megőrzése érdekében. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A T98G sejteket CM-1 vagy CM-ACF sejtfagyasztó közegben ajánlott lefagyasztani. Ehhez lassú fagyasztási folyamat javasolt, amely percenként csak 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé. Ez megakadályozza a sejtek sokkhatását és fenntartja életképességüket. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott sejteket óvatosan felolvasztjuk, ha 40-60 másodpercre 37 °C-os, előmelegített vízfürdőbe helyezzük őket. Ezután újra szuszpendáljuk őket friss táptalajban, és új lombikba helyezzük át őket. A 24 órás inkubáció után a táptalajt kicseréljük, hogy a fagyasztási táptalaj összetevőit eltávolítsuk. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A T98G kultúrákat az egyes biológiai biztonsági szintű laboratóriumban tartják. |
3. T98G sejtvonal: Hátrányok és előnyök
A T98G egy széles körben használt humán glioblasztóma sejtvonal. Számos előnye és hátránya van, amelyek megkülönböztetik a többitől. Néhány figyelemre méltó közülük a cikk ezen szakaszában tárgyalunk.
Előnyök
A T98G sejtek előnyei a következők:
-
Jól jellemzett
Jól megalapozott és jól jellemzett sejtvonal. Kiterjedten tanulmányozott és dokumentált az irodalomban.
-
In vitro modell
A glioblasztóma, a legagresszívabb agydaganat jellemzőit reprezentálja. Értékes eszköz a betegség vizsgálatához, a biológia megértéséhez és a kezelés fejlesztéséhez.
Hátrányok
A T98G sejtekkel kapcsolatos hátrányok a következők:
-
Heterogenitás
A T98G sejtpopuláció genetikai heterogenitása következetlenséget eredményezhet a kísérleti eredményekben és megnehezítheti az adatok értelmezését.
4. A T98G sejtek alkalmazása
A T98G sejtvonal értékes eszköz a rákkutatásban. A T98G sejtek néhány fontosabb kutatási alkalmazását soroljuk fel:
- Rákkutatás: A T98G sejtvonal értékes eszköz a glioblasztóma tumorok biológiájának vizsgálatához. Ezeket a sejteket elsősorban a glioblasztóma betegség kialakulásának és progressziójának hátterében álló bonyolult molekuláris útvonalak tanulmányozására használják. Ezenkívül a daganat növekedését és más rákos sejtmechanizmusokat irányító genetikai mutációk azonosítására is alkalmazzák őket. Yang Chen és munkatársai ezeken a sejteken dolgoztak, és megállapították, hogy a miRNS-21 túlterjedése csökkenti a PDCD4 (Programozott sejthalál fehérje 4) szintjét a T98G sejtekben. Ez a PDCD4 által közvetített T98G sejt apoptózis gátlásához vezet. Így a tanulmány a miRNa-21-et a terápiák fejlesztésének potenciális célpontjaként javasolja [2]. Ehhez a tanulmányhoz hasonlóan Fanqiang Kong és munkatársai a mikroRNS-15a szerepét vizsgálták a T98G glioblasztóma sejtek proliferációjában és inváziójában. Azt találták, hogy a miRNS-15a-5p elősegíti ezeket a sejtfolyamatokat a sejtadhéziós molekula 1 (CADM1) megcélzásával [3].
- Gyógyszerkísérletek és terápiás fejlesztés: A T98G kiváló glioblasztóma in vitro modellként szolgál az új gyógyszerek szűrésére, és platformot biztosít a potenciális rákterápiák hatékonyságának értékeléséhez. A kutatók különféle vegyületeket és terápiákat is tesztelnek, hogy azonosítsák és felfedezzék a legígéretesebb glioblasztómaellenes tulajdonságokkal rendelkező gyógyszerjelölteket. Ez új gyógyszerek és kezelési stratégiák kifejlesztéséhez vezet, reményt adva a glioblasztómás betegek számára. Egy ilyen tanulmány a korilagin nevű természetes vegyület rákellenes potenciálját vizsgálta a temozolomid temozolomid-rezisztens T98G GBM-sejtvonalon. A vizsgálat eredményei azt javasolták, hogy a korilagin a temozolomiddal kombinálva nagyobb mértékű antiproliferatív és antiapoptotikus hatást vált ki a sejtekben [4].
5. T98G sejteket tartalmazó kutatási publikációk
Az alábbiakban néhány érdekes és gyakran idézett kutatási publikáció található a T98G glioblasztóma sejtvonalról.
Az SR9009, egy REV-ERB agonista kemoterápiás hatása a humán glioblasztóma T98G sejtekre
Az ASN Neuro (2019) című folyóiratban megjelent publikáció az SR9009 nevű REV-ERB agonista rákellenes hatását vizsgálta a T98G glioblasztóma sejteken.
A Neurochemical research (2019) című szaklapban megjelent kutatási cikk azt javasolta, hogy a nátrium-butirát és a kvercetin szinergikusan gátolja a T98G sejtekben a védő autofágiát és növeli a sejtek apoptózisát.
A Genes (2023) című szaklapban megjelent tanulmány a T98G hipoxiára adaptált sejtvonalat RNS-szekvenálásnak vetette alá, és az IRE1-et (Inositol-requiring enzyme 1) ígéretes terápiás célpontként javasolta.
Ez a cikk az Oncology Letters című folyóiratban jelent meg (2017). A tanulmány azt vizsgálta, hogy a miRNS-548c-3p a T98G onkogéneket (c-Myb) célozza, hogy gátolja a T98G sejtek proliferációját és migrációját.
A Journal of Medicinal Plants Research (2011) című folyóiratban megjelent cikk azt javasolta, hogy a Dracocephalum tanguticum kloroform kivonata antiproliferatív hatást fejt ki a T98G sejtekre a kaszpáz-3, Bax és P21 gének modulálásával.
6. Források a T98G sejtekhez: T98G T98G: Protokollok, videók és egyéb
A T98G sejttenyésztési és transzfekciós protokollokat tartalmazó, rendelkezésre álló forrásokat itt említjük.
- T98G transzfekció: Ez a kutatási cikk a T98G transzfekció protokollját tartalmazza. Röviden ismerteti a módszert és a szükséges reagenseket.
A következő linkek nagyban segítik a T98G sejttenyésztési protokoll megismerését és megkönnyítik a munkát.
- T98G sejtek: Ez a weboldal kulcsfontosságú információkat tartalmaz a T98G sejttenyésztési protokollokkal kapcsolatban, beleértve a szubkultúrázást és a proliferatív és kriokonzervált kultúrák kezelését. Ezenkívül segít megismerni a sejtnövekedési médiumokat, a feltételeket és a megduplázódási időt.
Hivatkozások
- Haehl, E., Endotélsejtek által indukált radiorezisztencia glioblasztómában. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNS-21 lefelé szabályozza a tumorszuppresszor PDCD4 expresszióját a T98G humán glioblasztóma sejtben. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5pelősegíti a T98G glioblasztóma sejtek proliferációját és invázióját a sejtadhéziós molekula 1 célpontján keresztül. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin magas szintű apoptózist idéz elő a Temozolomid-rezisztens T98G glioma sejtvonalban. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.