SiHa sejtek - Fényt derít a méhnyakrák kutatására
ASiHa sejtek az orvosbiológiai kutatásokban széles körben használt méhnyakráksejtek. Kiváló transzfekciós gazdatestek, és így alkalmasak génexpressziós vizsgálatokra. Humán eredetük és méhnyakrákos relevanciájuk miatt ezeket a sejteket elsősorban rákbiológiai, virológiai és gyógyszerfejlesztési vizsgálatokban alkalmazzák.
A SiHa sejtek általános jellemzői és eredete
Egy sejtvonal eredetének és általános tulajdonságainak megértése kulcsfontosságú, mivel ez befolyásolja a kutatáson belüli felhasználását. Ebben a cikkrészben megismerheti a SiHa sejtvonal eredetét, megkülönböztető jellemzőit és még sok mást: Mi a SiHa rákos sejtvonal? Mi a SiHa sejtek HPV-je? Mi a SiHa sejtvonal eredete? Milyen a SiHa morfológiája?
- A SiHa, a méhnyakrákos sejtvonal egy laphámrákos ázsiai nő (55 éves) primer méhbiopsziájának töredékeiből származik [1].
- A SiHa sejtvonal hipertriploid kariotípust mutat. A sejtek többségének átlagos kromoszómaszáma 69 és 72 között van. A sejtek mintegy 24%-a azonban 71-es kromoszómaszámmal rendelkezik.
- A SiHa sejtek humán papillómavírus 16 pozitívak. A HPV-genom sejtenként 1-2 példányának integrációját mutatják [2].
- Ezek a méhnyakrákos sejtek epithelialis morfológiát mutatnak.
SiHa sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk
Egy sejtvonal-kultúra fenntartása nem egyszerű, amíg nem ismeri a tenyésztés minden fontos pontját. Tudnia kell: Mi a SiHa megduplázódási ideje? Milyen a SiHa sejtmédia? Hogyan kell a SiHa sejtvonalat tenyészteni?
A SiHa sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A SiHa sejtek megduplázódási ideje körülbelül 17 óra. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A SiHa egy adherens sejtvonal. |
|
Szubkultivációs arány: |
A SiHa sejtek szubkultivációs aránya 1:2 és 1:4 között van. A passzázshoz és az adherens sejteket 1x PBS-szel öblítjük. Accutase oldatot adunk hozzá, és a sejteket 8-10 percig szobahőmérsékleten inkubáljuk. Ezután táptalajt adunk hozzá, és a sejteket centrifugáljuk. A sejtpelletet reszuszpendáljuk, és a sejteket a tenyésztéshez új lombikba öntjük. |
|
Növesztőközeg: |
A SiHa sejtek ideális növekedéséhez 10% FBS-t, 2 mM L-Glutamint, 2,2 g/L NaHCO3-t és Earle kiegyensúlyozott sóoldatát (EBSS) tartalmazó Eagle's minimum essential mediumot (EMEM) használunk. A tápfolyadékot hetente 2-3 alkalommal cseréljük. |
|
Növekedési feltételek: |
A SiHa sejteket 37 °C-os, párásított inkubátorban tartjuk, 5%-os CO2-ellátással. |
|
Tárolás: |
A fagyasztott SiHa méhnyakrák-sejtvonal fiolákat -150°C alatti hőmérsékleten, elektromos fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tárolják hosszabb ideig. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A SiHa sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztóközeget használunk. A sejteket lassú fagyasztási módszerrel fagyasztják le, amely a sejtek életképességének védelme érdekében percenként csak 1 °C-os csökkenést tesz lehetővé. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A lefagyasztott sejteket 40-60 másodpercig tartjuk 37 °C-os vízfürdőben, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Ezután friss tápfolyadékot adunk hozzá, és a sejteket centrifugáljuk a fagyasztóközeg összetevőinek eltávolítása érdekében. A sejtpelletet reszuszpendáljuk, és a sejteket a növekedéshez tenyésztőlombikba adagoljuk. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A SiHa sejtkultúrák kezeléséhez és fenntartásához 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium szükséges. |
A SiHa sejtvonal előnyei és hátrányai
Más humán karcinóma sejtvonalakhoz hasonlóan a SiHa is rendelkezik bizonyos előnyökkel és hátrányokkal járó jellegzetességekkel. A következőkben néhány jelentőset tárgyaltunk.
A SiHa méhnyakrák-sejtvonal előnyei
- Méhnyakrák modell
- A méhnyak laphámsejtes karcinómájából származik.
- A méhnyakrák mechanizmusainak, növekedésének és fejlődésének tanulmányozására szolgál.
- A p53+ és pRB+ géneket fejezi ki, amelyek a DNS-javítással, a sejtciklus szabályozásával és a tumorszuppresszióval kapcsolatosak.
- Tumorgenikus potenciál
- A SiHa sejtek tumorgenikusak, és rosszul differenciált III. fokozatú epidermoid tumorokat képesek kiváltani meztelen egerekben.
- In vivo rákkutatásra és rákellenes kezelések tesztelésére használják.
A SiHa sejtek hátrányai
- Proliferációs ráta
- A SiHa sejtek gyorsan proliferálódnak, ami túlburjánzáshoz vezet.
- Gyakori passzázsra van szükség, ami növeli a genetikai instabilitás kockázatát, ami idővel befolyásolhatja a sejtek viselkedését.
A SiHa sejtek kutatási alkalmazásai
A SiHa sejtvonalat széles körben használják a méhnyakrák kutatásában. A következőkben e sejtvonal néhány meghatározott alkalmazását tárgyaljuk.
- Humán papillomavírussal (HPV) kapcsolatos vizsgálatok: Így értékes entitások a humán papillomavírus-fertőzés, annak molekuláris mechanizmusai, valamint a méhnyakrák kialakulásában és progressziójában játszott szerepe tanulmányozására. A kutatók ezeket a sejteket a vírus replikációjának, integrációjának és a gazdasejtek folyamataira gyakorolt hatásának vizsgálatára is használják. Egy 2020-ban végzett tanulmány a SiHa sejtvonalat használta a HPV E6/E7 onkoproteinek méhnyakrák kialakulásában játszott szerepének vizsgálatára, CRISPR technológiával történő célzott kezeléssel. Az eredmények azt mutatták, hogy az E6/E7 gének kiütése a SiHa sejtek növekedésének gátlását és apoptózist okozott. Ezért ezek a vírusgének kulcsfontosságú gyógyszercélpontokként szolgálhatnak a HPV-asszociált méhnyakrák elleni terápiák kifejlesztéséhez [3].
- Rákbiológia: A SiHa sejtek felbecsülhetetlen értékű modellként szolgálnak a méhnyakrák biológiájának tanulmányozásához, beleértve a rák kialakulását, progresszióját, metasztázisát és invázióját. A kutatók ezeket a sejteket a méhnyakrák kialakulásához és növekedéséhez hozzájáruló genetikai mutációk és a mögöttes molekuláris útvonalak feltárására használják, például egy tanulmányban SiHa sejteket használtak, és megállapították, hogy a felszabályozott SEC61G (SEC61 transzlokon alegység gamma) a MAPK kaszkád aktiválásán keresztül ösztönzi a méhnyakráksejtek proliferációját [4].
- Gyógyszerszűrés és tesztelés: A SiHa egy széles körben használt méhnyakrák vonal a HPV-asszociált méhnyakrákra specifikus potenciális rákellenes gyógyszerek hatékonyságának értékelésére. A kutatók e sejtek segítségével vizsgálják a gyógyszerek antiproliferatív, apoptotikus és antimetasztatikus potenciálját. Ilyen például egy 2019-ben végzett tanulmány, amely a Vatica diospyroides Symington típusú SS gyümölcskivonatok citotoxikus potenciálját vizsgálta a SiHa méhnyakrákos sejtvonalon [5].
SiHa sejtek a kutatáshoz!
SiHa sejteket tartalmazó kutatási publikációk
Néhány jelentős és gyakran idézett kutatási publikációban szerepel a SiHa méhnyak laphámrák sejtvonal.
Az OncoTargets and Therapy (2019) című szaklapban megjelent publikáció azt javasolta, hogy az aloe-emodin nevű természetes vegyület HPV E6/E7 és glükóz anyagcserével összefüggő apoptotikus hatást fejt ki a SiHa méhnyakráksejtekben.
Ez a cikk a Future Journal of Pharmaceutical Sciences 2022-es számában jelent meg. Ez a tanulmány az Excoecaria agallocha (L.) növényi levélkivonat daganatellenes hatását vizsgálta a SiHa méhnyakrák sejtvonalon.
A Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) című folyóiratban közzétett tanulmány azt javasolta, hogy az 1, 10-fenantrolin molekula cink-szulfát nanorészecskékkel való összekapcsolódás után jelentős antiproliferatív hatást fejt ki a SiHa sejtekben.
Ez a kutatás az Oncology Reports 2019-es számában jelent meg. A tanulmány kimutatta, hogy az Astragaloside IV, egy természetes termék, a TGF-β1 által közvetített PI3K és MAPK jelátviteli útvonalak modulálásával elnyomja a SiHa sejtek migrációját és invázióját.
A Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) című szaklapban megjelent tanulmány kimutatta, hogy az IFI16 (interferon-gamma indukálható fehérje 16) a STING-TBK1-NF-kB útvonal aktiválásán keresztül szabályozza a PD-L1 gént, és ezzel elősegíti a SiHa méhnyakráksejtek növekedését.
Források a SiHa sejtvonalhoz: SiAa Sia: Protokollok, videók és még sok más: Protokollok, videók és még sok más
Íme néhány online forrás a SiHa sejtekkel kapcsolatban.
- SiHa sejt transzfekció: Ez a kutatási cikk a SiHa méhnyakráksejtek fenntartására és a SiHa sejtek transzfekciójára vonatkozó protokollt tartalmaz.
A következő link a SiHa sejtek sejttenyésztési információit tartalmazza.
- SiHa sejtvonal: Ez a weboldal sok értékes adatot tartalmaz a SiHa sejtvonalról. Ide tartoznak a növekedési táptalajokra, a tenyésztési körülményekre, a SiHa sejtek szubkultúrázására és a proliferatív és kriokonzervált tenyészeteinek kezelésére vonatkozó információk.
GYIK a SiHa méhnyakrák sejtek esetében
Hivatkozások
- Melzer, C., J. von der Ohe, and R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
- Ostrowska, K.M., et al., A magas kockázatú humán papillomavírus hatásának vizsgálata a méhnyakráksejtek biokémiai összetételére rezgésspektroszkópia segítségével. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., Humán méhnyakráksejtek in vitro és in vivo növekedésének gátlása humán papillomavírus E6/E7 mRNS-ek CRISPR/Cas13a rendszerrel történő hasításán keresztül. Antivirális kutatás, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y., et al., SEC61G elősegíti a méhnyakrák proliferációját a MAPK jelátviteli útvonal aktiválásával. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Vatica diospyroides symington típusú SS gyümölcskivonatok rákellenes potenciálja és hatásuk a méhnyakrákos sejtvonalak programos sejthalálára. The Scientific World Journal, 2019. 2019.