SH-SY5Y sejtek - Neuroblastoma-kutatás és az SH-SY5Y sejtek idegtudományi jelentősége
Az emberi neuroblastomából származó SH-SY5Y sejtvonalat széles körben használják az orvosi kutatásokban a neurodegeneratív betegségek vizsgálatára és gyógyszerek fejlesztésére. A kutatók ezeket a sejteket eredeti, differenciálatlan formában alkalmazzák, vagy differenciálják őket neuronokra emlékeztető sejtekké.
Általános információk és az SH-SY5Y sejtvonal eredete
Ez a szakasz az SH-SY5Y sejtvonalra vonatkozó alapvető információkkal foglalkozik, beleértve annak eredetét, meghatározását és sejtszerkezetét. Olyan kérdésekkel fogunk foglalkozni, mint a morfológiája és a sejtek eredete.
- Az SH-SY5Y egy emberi eredetű sejtvonal, amely az SK-N-SH neuroblastóma sejtvonal 1970-es szubklónozásából származik.
- Az SK-N-SH szülő sejtvonalat egy négyéves női neuroblasztómás beteg csontvelőbiopsziájából fejlesztették ki.
- Az SH-SY5Y sejtek fenotípusosan adrenergek és dopaminerg markereket expresszálnak, így hasznos in vitro modellnek bizonyulnak a neurodegeneratív betegségek, a neurogenezis és az agyi sejtek jellemzőinek tanulmányozására [1].
- Az SH-SY5Y sejtek neuritákkal rendelkező, életképes neuroblastikus sejtek csomóiként növekednek, és lazán tapadnak.
- Az SH-SY5Y sejtek sejtmérete 12 μm.
- Az SH-SY5Y sejtek modális kromoszómaszáma 47, és rendelkeznek az 1-es kromoszómaszám ritka markerével, az 1q triszómiával, amelyet az 1q szegmens egy extra példányának az 1. kromoszóma hosszú karjába történő beillesztése okoz.
SH-SY5Y sejtek tenyésztése
A neurobiológiai kutatólaboratóriumokban az SH-SY5Y sejtek a legtöbbet tenyésztett neuroblastóma sejtek. Ahhoz, hogy ezekkel a sejtekkel dolgozhassunk, elengedhetetlen, hogy megértsük, milyen típusú táptalaj alkalmas a tenyésztésükhöz, növekedési jellemzőik, optimális vetési sűrűségük és a fagyasztásuk megfelelő módszere. Ez a szakasz alapvető információkat nyújt az SH-SY5Y sejtek tenyésztésével kapcsolatban, hogy segítsen Önnek ezekben a szempontokban.
Az SH-SY5Y sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
A populáció megduplázódási ideje: Az SH-SY5Y sejtek átlagos megduplázódási ideje körülbelül 3-4 nap. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: Az SH-SY5Y lazán tapadó sejtek. Nagy sűrűségű magvetés esetén csomókban nőnek. |
|
Ültetési sűrűség: Az SH-SY5Y optimális vetési sűrűsége 1 x 104 sejt/cm2. Az SH-SY5Y kultúrák mind tapadó, mind lebegő sejtekből állnak. |
|
Növekedési közeg: A DMEM:Ham's F12 médium 3,1 g/L glükózzal, 10% FBS-szel és 1,6 mM L-glutaminnal kiegészítve ideális az SH-SY5Y sejtvonal tenyésztéséhez. |
|
Növekedési körülmények (hőmérséklet, CO2): Az SH-SY5Y sejteket 37°C-os hőmérsékleten, 5%-os CO2-ellátással párásított inkubátorban tenyésztjük. |
|
Tárolás: Az SH-SY5Y sejtek életképességének megőrzése érdekében folyékony nitrogén gőzfázisában, -150°C alatti hőmérsékleten tároljuk őket. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: Az SH-SY5Y sejtek lefagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztási közeget használunk. E neuroblastóma-sejtvonal fagyasztásához lassú, a hőmérsékletet fokozatosan 1°C-kal csökkentő fagyasztási módszert választunk. |
|
Felolvasztási folyamat: Az SH-SY5Y sejteket tartalmazó fagyasztott fiolákat 37 °C-os vízfürdőbe helyezzük. A fiolát gyorsan kevergetjük, amíg a sejtek felolvadnak, és csak egy kis jégcsomó marad. |
|
Biológiai biztonsági szint: Az SH-SY5Y sejtek 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumban tenyészthetők. |
SH-SY5Y sejtek: SHYYY-SYE: Előnyök és korlátok: Előnyök és korlátok
Előnyök
- Neuronokká differenciálódás: Az SH-SY5Y sejtek specifikus vegyületek segítségével funkcionális neuronokká differenciálhatók, ami kényelmesebb alternatívát jelent a primer neuronok helyett, és elkerüli a felhasználásukkal kapcsolatos etikai aggályokat [2].
- Neurodegeneratív betegségek in vitro modellje: A molekuláris markerek, köztük a dopaminerg neurális markerek expressziója alkalmassá teszi az SH-SY5Y sejteket a neurodegeneratív betegségek, például a Parkinson-kór tanulmányozására.
Korlátozások
- Nem szinkronizált sejtciklus: Az SH-SY5Y sejtkultúrák nem szinkronizált sejtciklust mutatnak differenciálatlan állapotban [3].
- Meghatározatlan differenciálódási állapot: Az SH-SY5Y sejtek differenciálódási állapota nem meghatározott, amely a tumorigén neuroblastoma állapottól a posztmitotikus neuronokig vagy neurális progenitor sejtekig terjed. Nem fejeznek ki olyan molekuláris markereket, mint az érett neuronsejtek [4].
SH-SY5Y sejtek in vitro neurofarmakológiai és gyógyszerkutatási célokra
Az SH-SY5Y sejtek alkalmazása
Neurodegeneratív betegségek kutatása: SH-SY5Y sejteket neurodegeneratív betegségek, például az Alzheimer- és a Parkinson-kór tanulmányozására használják. Egy tanulmányban például az SH-SY5Y sejteket amiloid β peptid 1-42-vel kezelték az Alzheimer-kór in vitro modelljének létrehozásához. A kifejlesztett sejtvonalat ezután pcDNS-17A és 17A shRNS transzfektálták, hogy megvizsgálják a hosszú nem kódoló RNS 17A hatását az Alzheimer-kórhoz hasonló sejtekre. A vizsgálat kimutatta, hogy az LncRNS-17A szabályozza az SH-SY5Y sejtek apoptózisát és autofágiáját, ezzel imitálva az Alzheimer-kórt [5].
Gyógyszerfejlesztés: Az SH-SY5Y sejteket a neurodegeneratív betegségek elleni terápiás hatású gyógyszerek szűrésére és validálására használják. Egy 2021-ben végzett tanulmány például egy gyomirtó szerrel (Paraquat) parkinsonizmust idézett elő SH-SY5Y sejtekben, majd ezeket a sejteket egy flavonoid, a naringenin terápiás potenciáljának vizsgálatára használta. A vegyület védőhatást mutatott a Parkinson-kór által közvetített neurodegenerációval és neurotoxicitással szemben sejtmodellekben, ami jelzi a Parkinson-kór kezelésére szolgáló kezelések kifejlesztésének lehetőségét [6].
SH-SY5Y sejteket tartalmazó kutatási publikációk
Az SH-SY5Y sejtekkel kapcsolatban rengeteg kutatási tanulmány született. Ez a szakasz néhány jelentős példát mutat be.
- Az LncRNS17A szabályozza az SH-SY5Y sejtvonal autofágiáját és apoptózisát, mint az Alzheimer-kór in vitro modelljét: Ebben a publikációban azt javasolták, hogy az LncRNS17A közvetíti az Alzheimer-kór modelljévé kísérletileg átalakított SH-SY5Y sejtek apoptózisát és autofágiáját.
- A naringenin enyhíti a paraquat által kiváltott dopaminerg neuronális veszteséget SH-SY5Y sejtekben és a Parkinson-kór patkánymodelljében: Ez a tanulmány a naringenin vegyületeket neuroprotektív szerként javasolta a Parkison-kór kísérletileg kialakított sejtes és állati modelljével szemben.
- A proliferatív és differenciált SH-SY5Y sejtvonal biokémiai jellemzése a Parkinson-kór modelljeként: A differenciált SH-SY5Y sejteket több, a Parkinson-kórban gyakran vizsgált biokémiai folyamat jellemzésére és értékelésére használtuk.
- Az acitretin in vitro hatásai humán neuronális SH-SY5Y sejtekre: Az SH-SY5Y sejteket neuronális differenciálódás tanulmányozására használtuk. A kutatók azt vizsgálták, hogy az acitretin elősegíti az idegsejtek differenciálódását, és kezeli a neurodegeneratív és idegfejlődési rendellenességeket, valamint az agydaganatokat.
- Az SH-SY5Y sejtvonal átalakulása neuronszerű sejtekké: Elektrofiziológiai és biomechanikai változások vizsgálata: Ebben a tanulmányban az SH-SY5Y neurális blastóma sejteket retinsavval és agyi eredetű neurotrófikus faktor (BDNF) molekulákkal történő kezeléssel neuronokká alakították át, és vizsgálták a biokémiai és elektrofiziológiai változásokat.
Az SH-SY5Y sejtek forrásai: SY5-SY5Y: Jegyzőkönyvek, videók és más eszközök: protokollok, videók és más
Számos online forrás áll rendelkezésre erről a híres neuroblasztóma-sejtvonalról. Ezek a források az SH-SY5Y kultúrák kezelésével és fenntartásával kapcsolatban adhatnak felvilágosítást.
Sejtkultúra protokollok
A következő weboldalak cikkei segíthetnek megismerni az SH-SY5Y sejtek tenyésztésének, fagyasztásának és felolvasztásának módszereit.
- SH-SY5Y sejtek tenyésztése: Alapvetőinformációk az SH-SY5Y sejtekről, beleértve a sejtek felolvasztását, fagyasztását és szubkultúrázását.
- SH-SY5Y sejtek szubkultiválása: Az SH-SY5Y sejtek esetében a felhasznált táptalajokkal és a szubkultiválási lépésekkel kapcsolatos információkat mutatja be.
- SH-SY5Y sejtek transzfektálása: Ez a dokumentum az SH-SY5Y sejtvonal tranziens transzfekciós protokollját írja le.
- Differenciálási protokoll: Ez a videó az SH-SY5Y sejtek differenciálásának protokollját ismerteti.
Arra számítunk, hogy ez a cikk hasznos információkat nyújt az SH-SY5Y sejtek kezelésével, tenyésztésével és a kutatási vizsgálatokban való felhasználásával kapcsolatban; ha ezzel a neuroblasztóma sejtvonallal szeretne dolgozni, fontolja meg, hogy tőlünk rendeljen.
SH-SY5Y sejtvonal: Gyakran Ismételt Kérdések
Hivatkozások
- Carvajal-Oliveros, A., et al., A BE (2)-M17 sejtvonal jobb dopaminerg fenotípussal rendelkezik, mint a Parkinson-kutatásban hagyományosan használt SH-SY5Y, amely főként szerotonerg. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
- Kovalevich, J. és D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology. Neuronális sejtkultúra: módszerek és protokollok, 2013: 9-21. o.
- Martin, E.-R., J. Gandawijaya és A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells utilizing B-27 supplement. Frontiers in Pharmacology, 2022: 4042. o.
- Feles, S., et al., Az SH-SY5Y neuroblastoma sejtvonal tenyésztési körülményeinek racionalizálása: a funkcionális vizsgálatok előfeltétele. Methods and Protocols, 2022. 5(4): p. 58.
- Wang, X., M. Zhang és H. Liu, Az LncRNS17A szabályozza az SH-SY5Y sejtvonal autofágiáját és apoptózisát, mint az Alzheimer-kór in vitro modelljét. Biotudomány, biotechnológia és biokémia, 2019. 83(4): p. 609-621.
- Ahmad, M.H., et al., Naringenin enyhíti a paraquat által kiváltott dopaminerg neuronális veszteséget SH-SY5Y sejtekben és a Parkinson-kór patkánymodelljében. Neuropharmacology, 2021. 201: p. 108831.
