SH-SY5Y sejtek – A neuroblasztóma kutatása és az SH-SY5Y sejtek idegtudományi jelentősége

Az emberi neuroblastómából származó SH-SY5Y sejtvonalat széles körben használják az orvosi kutatásban a neurodegeneratív betegségek vizsgálatához és gyógyszerek fejlesztéséhez. A kutatók ezeket a sejteket eredeti, differenciálatlan formájukban alkalmazzák, vagy neuronokra hasonlító sejtekké differenciálják őket.

Általános információk és az SH-SY5Y sejtvonal eredete

Ez a szakasz az SH-SY5Y sejtvonalról szóló alapvető információkat tartalmazza, beleértve annak eredetét, meghatározását és sejtszerkezetét. Olyan kérdésekkel foglalkozunk, mint a sejtek morfológiája és eredete.

• Az SH-SY5Y egy emberi eredetű sejtvonal, amely az SK-N-SH neuroblasztóma sejtvonal 1970-ben történt szubklónozásából származik.
• Az anyasejtvonalat, az SK-N-SH-t egy négyéves, neuroblastomában szenvedő kislány csontvelőbiopszijából állították elő.
• Az SH-SY5Y sejtek fenotípusuk szerint adrenerg jellegűek és dopaminerg markereket fejeznek ki, ami hasznos in vitro modellé teszi őket a neurodegeneratív betegségek, a neurogenezis és az agysejtek jellemzőinek tanulmányozásához [1].
• Az SH-SY5Y sejtek neuritokkal rendelkező, életképes neuroblasztos sejtek csomóiként növekednek, és lazán tapadnak egymáshoz.
• Az SH-SY5Y sejtek mérete 12 μm.
• Az SH-SY5Y-sejtek modális kromoszómaszáma 47, és rendelkeznek az 1. kromoszóma egy ritka markereivel, az 1q-triszómiával, amelyet az 1q-szegmens egy extra másolatának beillesztése okoz az 1. kromoszóma hosszú karjába.

SH-SY5Y sejtek tenyésztése

A neurobiológiai kutató laboratóriumokban az SH-SY5Y sejtek a leggyakrabban tenyésztett neuroblasztóma sejtek. Ezen sejtekkel való munkához elengedhetetlen megérteni, hogy milyen típusú tenyésztőközeg alkalmas a tenyésztésükhöz, milyenek a növekedési jellemzőik, mi az optimális beültetési sűrűség, valamint mi a megfelelő fagyasztási módszer. Ez a szakasz alapvető információkat nyújt az SH-SY5Y sejtek tenyésztéséről, hogy segítsen Önnek ezekben a kérdésekben.

Az SH-SY5Y sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai

Populációduplázódási idő: Az SH-SY5Y sejtek átlagos populációduplázódási ideje körülbelül 3–4 nap.

Adherens vagy szuszpenziós: Az SH-SY5Y sejtek laza adhéziójú sejtek. Magas sűrűségű beültetés esetén csomókban növekednek.

Beültetési sűrűség: Az SH-SY5Y sejtek optimális beültetési sűrűsége 1 × 10⁴ sejt/cm². Az SH-SY5Y tenyészetek mind tapadó, mind lebegő sejtekből állnak.

Növekedési tápközeg: A DMEM:Ham’s F12 tápközeg, 3,1 g/L glükózzal, 10% FBS-szel és 1,6 mM L-glutaminnal kiegészítve ideális az SH-SY5Y sejtvonal tenyésztéséhez.

Növekedési feltételek (hőmérséklet, CO₂): Az SH-SY5Y sejteket 37 °C-os hőmérsékleten, párásított inkubátorban, 5%-os CO₂-ellátással tenyésztik.

Tárolás: Az SH-SY5Y sejtek életképességének megőrzése érdekében azokat folyékony nitrogén gőzfázisában, -150 °C alatti hőmérsékleten tárolják.

Fagyasztási eljárás és táptalaj: Az SH-SY5Y sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztó táptalajt használnak. Ezen neuroblasztóma sejtvonal fagyasztásához olyan lassú fagyasztási módszert alkalmaznak, amely során a hőmérsékletet fokozatosan, 1 °C-kal csökkentik.

Felolvasztási folyamat: Az SH-SY5Y sejteket tartalmazó fagyasztott fiolákat 37 °C-ra beállított vízfürdőbe helyezzük. A fiolát gyorsan rázjuk, amíg a sejtek fel nem olvadnak, és csak egy kis jégdarab marad benne.

Biológiai biztonsági szint: Az SH-SY5Y sejtek biológiai biztonsági 1. szintű laboratóriumban tenyészthetők.

SH-SY5Y sejtek: Előnyök és korlátok

Előnyök

• Neuronokká történő differenciálódás: Az SH-SY5Y sejtek specifikus vegyületek segítségével funkcionális neuronokká differenciálódhatnak, ami kényelmesebb alternatívát nyújt az elsődleges neuronokhoz képest, és elkerüli azok használatával kapcsolatos etikai aggályokat [2].
• In vitro modell neurodegeneratív betegségekhez: A molekuláris markerek, köztük a dopaminerg idegsejt-markerek expressziója miatt az SH-SY5Y sejtek alkalmasak olyan neurodegeneratív rendellenességek tanulmányozására, mint a Parkinson-kór.

Korlátai

• Szinkronizálatlan sejtciklus: A SH-SY5Y sejtkultúrák differenciálatlan állapotban szinkronizálatlan sejtciklusokat mutatnak [3].
• Meghatározatlan differenciálódási állapot: Az SH-SY5Y sejtek differenciálódási állapota meghatározatlan, amely a tumorigenikus neuroblastoma állapottól a posztmitotikus idegsejtekig vagy idegelősejtekig terjed. Nem fejezik ki azokat a molekuláris markereket, amelyeket az érett idegsejtek kifejeznek [4].

SH-SY5Y sejtek in vitro neurofarmakológiai kutatásokhoz és gyógyszerfejlesztéshez

Az SH-SY5Y sejtek alkalmazásai

Neurodegeneratív betegségek kutatása: Az SH-SY5Y sejteket neurodegeneratív rendellenességek, például az Alzheimer-kór és a Parkinson-kór tanulmányozására használják. Például egy tanulmányban SH-SY5Y sejteket kezeltek amiloid β peptid 1-42-vel az Alzheimer-kór in vitro modelljének létrehozása érdekében. A kifejlesztett sejtvonalat ezután pcDNA-17A-val és 17A shRNA-val transzfektálták, hogy megvizsgálják a hosszú, nem kódoló 17A RNS hatását az Alzheimer-kórhoz hasonló sejtekre. A tanulmány kimutatta, hogy az LncRNA-17A szabályozza az SH-SY5Y sejtek apoptózisát és autofágiáját, utánozva az Alzheimer-kórt [5].

Gyógyszerfejlesztés: Az SH-SY5Y sejteket használják a gyógyszerek szűrésére és validálására a neurodegeneratív betegségek elleni terápiás hatásuk vizsgálata céljából. Például egy 2021-ben végzett tanulmányban egy gyomirtó szer (paraquat) segítségével parkinsonizmust váltottak ki SH-SY5Y sejtekben, majd ezeket a sejteket használták fel egy flavonoid, a naringenin terápiás potenciáljának vizsgálatára. A vegyület sejtmodellekben védő hatást mutatott a Parkinson-kór által kiváltott neurodegeneráció és neurotoxicitás ellen, ami arra utal, hogy alkalmas lehet a Parkinson-kór kezelésének fejlesztésére [6].

Az SH-SY5Y-sejteket bemutató kutatási publikációk

Számos kutatási tanulmány foglalkozik az SH-SY5Y sejtekkel. Ebben a szakaszban néhány jelentős példát mutatunk be.

• Az LncRNA17A szabályozza az SH-SY5Y sejtvonal autofágiáját és apoptózisát az Alzheimer-kór in vitro modelljeként: Ebben a publikációban azt állították, hogy az LncRNA17A közvetíti az Alzheimer-kór modelljévé kísérletileg átalakított SH-SY5Y sejtek apoptózisát és autofágiáját.
• A naringenin enyhíti a paraquat által kiváltott dopaminerg idegsejtvesztést SH-SY5Y sejtekben és a Parkinson-kór patkánymodelljében: Ez a tanulmány a naringenin-vegyületeket javasolta neuroprotektánsként a Parkinson-kór kísérletileg kifejlesztett sejt- és állatmodellje ellen.
• A proliferatív és differenciált SH-SY5Y sejtvonal biokémiai jellemzése a Parkinson-kór modelljeként: Differenciált SH-SY5Y sejteket használtak a Parkinson-kórban gyakran vizsgált számos biokémiai folyamat jellemzésére és értékelésére.
• Az acitretin in vitro hatásai emberi idegsejtekre (SH-SY5Y sejtek): SH-SY5Y sejteket használtak az idegsejt-differenciálódás vizsgálatához. A kutatók azt vizsgálták, hogy az acitretin elősegíti-e az idegsejt-differenciálódást, valamint alkalmas-e neurodegeneratív és idegfejlődési rendellenességek, illetve agydaganatok kezelésére.
• Az SH-SY5Y sejtvonal neuron-szerű sejtekké történő átalakítása: elektrofiziológiai és biomechanikai változások vizsgálata: Ebben a tanulmányban az SH-SY5Y idegsejt-blastoma sejteket retinsavval és agyból származó neurotrófikus faktorral (BDNF) kezelve neuronokká alakították át, majd megvizsgálták a folyamat során bekövetkező biokémiai és elektrofiziológiai változásokat.

Források az SH-SY5Y sejtekhez: protokollok, videók és egyéb anyagok

Számos online forrás áll rendelkezésre erről a híres neuroblasztóma sejtvonalról. Ezek a források tájékoztatást nyújtanak az SH-SY5Y tenyészetek kezeléséről és fenntartásáról.

Sejtkultúra-protokollok

Az alábbi weboldalakon található cikkek segítségével megismerheti az SH-SY5Y sejtek tenyésztésének, fagyasztásának és felolvasztásának módszereit.

• SH-SY5Y sejtek tenyésztése: Alapvető információk az SH-SY5Y sejtekről, beleértve a sejtek felolvasztását, fagyasztását és szubkultiválását.
• SH-SY5Y szubkultiválása: Információkat tartalmaz a használt tenyészközegekről és az SH-SY5Y sejtek szubkultiválásának lépéseiről.
• SH-SY5Y sejtek transzfekciója: Ez a dokumentum az SH-SY5Y sejtvonal átmeneti transzfekciós protokollját írja le.
• Differenciálási protokoll: Ez a videó bemutatja az SH-SY5Y sejtek differenciálására vonatkozó protokollt.

Reméljük, hogy ez a cikk hasznos információkat nyújt az SH-SY5Y sejtek kezeléséről, tenyésztéséről és kutatási célú felhasználásáról; ha ezzel a neuroblasztóma sejtvonalával szeretne dolgozni, fontolja meg, hogy tőlünk rendeljen.

SH-SY5Y sejtvonal: Gyakran Ismételt Kérdések