MX-1 sejtvonal

Az MX-1 egy emberi emlőadenokarcinóma sejtvonal, amelyet atimikus egerekben kialakított emlőrák-xenotranszplantációs modellből nyertek. Az emberi emlőadenokarcinóma sejteket egy 29 éves kaukázusi nő emlődaganatából állították elő. Az MX-1 sejtek hármas negatív emlőrák (TNBC) sejtek, amelyeket széles körben használnak a gyógyszerrezisztencia, a sejtjelátvitel, a gyógyszerreakció mechanizmusa stb. kutatásához.

Az MX-1 sejtek eredete és általános információk

Mielőtt ezzel a sejtvonalal dolgozna, ismernie kell annak alapvető jellemzőit. Áttekintjük az MX-1 sejtvonalra vonatkozó szinte összes általános információt.

Az örökélő MX-1 sejtvonal egy tumorigenikus sejtvonal, amelyet tumoros xenotranszplantátumból állítottak elő. Az MX-1 sejteket a hármas negatív emlőrák (TNBC) egyik típusának tekintik [1]. Ezenkívül ezek a sejtek ösztrogénreceptor- és p53-negatívak, mivel nem fejezik ki ezeket a géneket.

MX-1 sejtek – modellrendszer a hármas negatív emlőrákhoz

Az MX-1 sejtvonal tenyésztési feltételei nem igényelnek különösebb odafigyelést. Ezek a sejtek könnyen szaporíthatók, és különböző kutató laboratóriumokban felhasználhatók transzfekciós vizsgálatokhoz. A transzient transzfekciós módszerrel általában a sejtvonalban rejlő sejtmechanizmusokat és génexpressziós mintázatokat tanulmányozzák [2, 3].

Ez a sejtvonal megbízható modellrendszer az emlőkarcinómákhoz. Használható a betegség progressziója mögött álló molekuláris mechanizmusok megértésére, valamint a betegség leküzdésére szolgáló gyógyszerek szűrésére és fejlesztésére. Pontosabban: az emberi MX-1 emlő-adenokarcinóma sejtvonal alternatívája lehet a TNBC-sejteknek, mivel ösztrogénreceptor-negatív [4].

Közzététel: 2023 | Utolsó felülvizsgálat: 2026. május

MX-1 sejtvonal: Tenyésztési információk

• Duplázódási idő: Az INS-1 sejtek populációjának duplázódási ideje körülbelül 44 óra.
• Adherens vagy szuszpenziós tenyésztés: Az INS-1 sejtek szuszpenziós és adherens formában egyaránt szaporodnak.
• Átültetési arány: Az INS-1 sejteket 1:3 arányban ültetik át. Röviden: a szuszpenziós sejteket összegyűjtik. Az adhezív sejteket PBS-sel öblítik le, majd Accutase oldattal inkubálják. A leválasztás után a sejtekhez friss táptalajt adnak. Ezt követően mind a szuszpenziós, mind az adhezív sejteket centrifugálják és összegyűjtik. A sejteket gondosan újra szuszpendálják, majd a növekedéshez új lombikokba osztják.
• Növekedési tápközeg: Az INS-1 patkány-inzulinoma sejtvonal tenyésztéséhez RPMI 1640-et használnak. A táptalajt 10% hőinaktivált borjúszérummal, 2,1 mM stabil glutaminnal, 10 mM HEPES-szel, 2,0 g/L NaHCO3-mal és 1 mM nátrium-piruváttal egészítik ki.
• Növekedési körülmények: Az INS-1 sejteket 37 °C-ra beállított, párásított inkubátorban tartják, folyamatos 5%-os CO₂-ellátás mellett.
• Tárolás: Az INS-1 béta-sejtek hosszú távon folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150 °C alatti hőmérsékleten elektromos fagyasztóban tárolhatók.
• Fagyasztási eljárás és táptalaj: Az INS-1 sejtek lassú fagyasztási eljárás során CM-1 vagy CM-ACF táptalajok felhasználásával kerülnek fagyasztásra. A sejtek életképességének megőrzése érdekében a hőmérséklet percenkénti csökkenése legfeljebb 1 °C lehet.
• Felolvasztási folyamat: A fagyasztott INS-1 sejteket 37 Celsius-fokra előre beállított vízfürdőben 40–60 másodpercig olvasztják fel. A felolvasztás után a sejteket friss táptalajjal keverik össze, majd közvetlenül egy új lombikba öntik a szaporodáshoz. 24 óra elteltével a táptalajt kicserélik, hogy eltávolítsák a fagyásból származó szennyeződéseket.
• Biológiai biztonsági szint: Az INS-1 patkány inzulinoma sejtek tenyésztéséhez 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium szükséges.

MX-1 sejtek: Alkalmazások a kutatásban

Ezt az emberi emlőadenokarcinóma MX-1 sejtvonalat gyakran használják emlőrák-kutatásokban olyan sejtek helyett, mint az MDA-MB-231 vagy az MCF-7. Íme néhány speciális alkalmazási terület ennek a sejtvonalnak a rákkutatásban.  

Gyógyszerrezisztencia-mechanizmusok

Az MX-1 sejteket az emlőrák elleni gyógyszerekkel szembeni rezisztencia kialakulását közvetítő molekuláris tényezők vizsgálatára használják. A kutatások során széles körben alkalmazták az MX-1 sejteket gyógyszerrezisztens modellek létrehozására. Egy 2021-ben publikált tanulmány beszámolt az MX-1 sejtek felhasználásáról egy doxorubicin-rezisztens emlőrák-sejtvonal létrehozásához. A kifejlesztett sejtmodell igazolta az ABCB1 transzporter és az epiteliális-mezenchimális átalakulás (EMT) szerepét a kemoterápiás rezisztencia kialakulásában [5].

Génkifejeződés/sejtjelátviteli útvonal

Az MX-1 sejtvonal átmenetileg transzfektálható a génkifejeződési minták és a sejtjelátviteli útvonalak feltárása érdekében. Különböző tanulmányokban MX-1 sejteket használtak shRNA (rövid hajtűs RNS) és nem kódoló RNS transzfekciójához, hogy feltárják azok hatását az emlőrákos sejtek szaporodására és növekedésére. Ezen felül a kapcsolódó génjelátviteli útvonalakat is feltárták [2, 6].

Potenciális gátlók szűrése

Az MX-1 sejtek felhasználhatók az emlőrák elleni potenciális gyógyszerek szűrésére, mivel utánozzák a ráksejtek mikrokörnyezetét. Egy kutatás kimutatta a vinorelbin – egy mikrotubulus-toxin – terápiás hatását, amely sejthalált és poliploidiát váltott ki az MX-1 sejtekben [4].

Rendelje meg még ma az MX-1 sejtvonalat!

MX-1 sejtvonal – Források: protokollok, videók és egyéb anyagok

A tenyésztési és transzfekciós módszerekkel kapcsolatban korlátozott mennyiségű forrás áll rendelkezésre, de a lehető legtöbb információt összegyűjtöttük Önök számára.

Sejtkultúra-protokollok

Az MX-1 sejteket számos átmeneti transzfekciós elemzési tanulmányban használják. Itt felsoroltunk néhány forrást, amelyek segíthetnek a transzfekciós protokollok elkészítésében.

• MX-1 sejtek transzfekciója: Ez a publikáció leírja az MX-1 sejtekben végzett siRNA-val történő transzfekció protokollját egy gén-knockout modell kifejlesztése céljából.
• Emberi sejtek transzfekciója: Ez a cikk minden lényeges információt tartalmaz az emberi sejtvonalakban alkalmazott transzfekciós módszerekről.

Reméljük, hogy ez a cikk értékes ismereteket nyújtott Önnek az MX-1 sejtvonalról, és hogy jobban megértette, hogyan kell ezeket a sejteket tenyészteni, fenntartani és felhasználni kutatása során. Ha érdekli az MX-1 sejtvonal használata, ne habozzon megrendelni tőlünk, hogy elindíthassa kutatási útját!

Gyakran ismételt kérdések az MX-1 emlőrák sejtvonalról

Hivatkozások

1. Stefanski, C.D. és J.R. Prosperi, A CHK1-rezisztencia leküzdése a hármas negatív emlőrákban: az EGFR-gátlás mint potenciális kombinációs terápia. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): 229. o.
2. Vasiyani, H. és munkatársai, A cGAMP analógja, a c-di-AMP, aktiválja a STING által közvetített sejthalál útvonalat az ösztrogénreceptor-negatív emlőrákos sejtekben. Apoptosis, 2021. 26: 293–306. o.
3. Xiang, S. és munkatársai: Az apoptózisgátló fehérje-szerű fehérje-2 (IAP-2) proteomikai elemzése az emlőrákos sejtek proliferációjában. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): 1–11. o.
4. Nakajima, H., C. Furukawa és J. Magae: A vinorelbin, egy mikrotubulus-toxin, apoptózist és poliploidiát indukál az MX-1-ben, egy humán hármas negatív emlőrák-sejtvonalban. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): 447–451. o.
5. Kubiliute, R. és munkatársai: A nem genotoxikus ABCB1-aktivátor, a tetrafenilfoszfónium hozzájárulhat a doxorubicin-rezisztenciához az MX-1 emlőrák-sejtvonalban. Scientific reports, 2021. 11(1): 1–11. o.
6. Jiang, R. és munkatársai: Az emlőrák mixomikai elemzése: A hosszú, nem kódoló linc01561 RNS ceRNA-ként működik, és szerepet játszik az emlőrák progressziójában. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: 1–9. o.