MX-1 sejtvonal

AzMX-1 egy humán emlő adenokarcinóma sejtvonal, amely egy athymikus egerekből származó emlőrák xenograft modellből származik. A humán emlő adenokarcinóma sejteket egy 29 éves kaukázusi nő emlődaganatából állították elő. Az MX1 sejtek tripla-negatív emlőrák (TNBC) sejtek, amelyeket széles körben használnak a gyógyszerrezisztencia, a sejtek jelátvitelének, a gyógyszerre adott válasz mechanizmusának stb. kutatására.

Az MX-1 sejtek eredete és általános információi

Mielőtt ezzel a sejtvonallal dolgozna, meg kell ismernie a sejtvonal lényegét. Áttekintjük az MX-1 sejtvonallal kapcsolatos szinte összes általános információt.

A halhatatlan MX-1 sejtvonal egy tumoros xenograftból létrehozott tumoros sejtvonal. Az MX-1 sejteket a tripla-negatív emlőrák (TNBC) egyik típusának tekintik [1]. Ezek a sejtek ráadásul ösztrogénreceptor- és p53-negatívak, mivel nem expresszálják ezeket a géneket.

MX-1 sejtek - A tripla-negatív emlőrák modellrendszere

Az MX-1 sejtvonal tenyésztési körülményei nem kényesek. Ezek a sejtek könnyen szaporíthatók és különböző kutatólaboratóriumokban transzfekciós vizsgálatokhoz használhatók. A tranziens transzfekciós módszerrel általában a mögöttes sejtmechanizmusokat és génexpressziós mintázatokat vizsgálják ebben a sejtvonalban [2, 3].

Ez a sejtvonal jó modellrendszer az emlőrákok számára. Felhasználható a betegség progressziója mögött álló molekuláris mechanizmusok megértésére, valamint a betegség elleni gyógyszerek szűrésére és fejlesztésére. Pontosabban, a humán MX-1 emlő adenokarcinóma sejtvonal alternatívája lehet a TNBC sejteknek, mivel ösztrogénreceptor-negatív [4].

MX-1 sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk

• Megduplázódási idő: Az INS-1 sejtek populációjának megduplázódási ideje körülbelül 44 óra.
• Adhezív vagy szuszpenzióban: Az INS-1 sejtek szuszpenzióban és adherens formában is növekednek.
• Szubkultivációs arány: Az INS-1 sejteket 1:3 arányban szubkultúráztatjuk. Röviden, a szuszpendált sejteket összegyűjtjük. Az adherens sejteket PBS-szel öblítjük és Accutase oldattal inkubáljuk. Leválasztás után a sejteket friss tápfolyadékkal adjuk hozzá. Ezt követően mind a szuszpendált, mind a tapadó sejteket centrifugáljuk és összegyűjtjük. A sejteket óvatosan reszuszpendáljuk és a növekedéshez új lombikokba adagoljuk.
• Növesztőközeg: Az INS-1 patkány inzulinóma sejtvonal tenyésztéséhez RPMI 1640-et használunk. A táptalajt 10% hővel inaktivált magzati szarvasmarha szérummal, 2,1 mM stabil glutaminnal, 10 mM HEPES-szel, 2,0 g/L NaHCO3-mal és 1 mM nátrium-piruváttal egészítjük ki.
• Növekedési feltételek: Az INS-1 sejteket 37 °C-os hőmérsékleten, folyamatos 5%-os CO2-ellátás mellett párásított inkubátorban tartjuk.
• Tárolás: Az INS-1 béta sejtek hosszú távon tárolhatók folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150°C alatti hőmérsékleten elektromos fagyasztóban.
• Fagyasztási folyamat és közeg: CM-1 vagy CM-ACF táptalajokat használnak az INS-1 sejtek lassú fagyasztási folyamat révén történő lefagyasztásához. Ez percenként csak 1°C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé a sejtek életképességének védelme érdekében.
• Felolvasztási folyamat: A lefagyasztott INS-1 sejteket 37 Celsius-fokos hőmérsékletre előzetesen beállított vízfürdőben 40-60 másodpercig olvasztjuk fel. A felolvasztás után a sejtekhez friss tápfolyadékot adunk, és közvetlenül egy új lombikba öntjük a növekedéshez. 24 óra elteltével a tápfolyadékot kicseréljük a fagyasztási tápfolyadék összetevőinek eltávolítása érdekében.
• Biológiai biztonsági szint: Az INS-1 patkány inzulinóma sejtek tenyésztéséhez 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium szükséges.

MX-1 sejtek: Alkalmazások a kutatásban

Ezt a humán emlő adenokarcinóma MX-1 sejtvonalat gyakran használják emlőrák-vizsgálatokban olyan sejtek helyett, mint az MDA-MB-231 vagy az MCF-7. Íme néhány speciális alkalmazása ennek a sejtvonalnak a rákkutatásban.

Gyógyszerrezisztencia mechanizmusok

Az MX-1 sejteket az emlőrák elleni gyógyszerekkel szembeni rezisztencia kialakulását közvetítő molekuláris tényezők tanulmányozására használják. A tanulmányok széles körben használták az MX-1 sejteket gyógyszerrezisztens modellek létrehozására. Egy 2021-ben közzétett tanulmány beszámolt arról, hogy MX-1 sejteket használtak doxorubicin-rezisztens emlőrák-sejtvonal létrehozására. A kifejlesztett sejtmodell validálta az ABC transzporter ABCB1 és az epiteliális-mesenchimális átmenet (EMT) részvételét a kemorezisztencia megszerzésében [5].

Génexpresszió/sejtszignál útvonal

Az MX-1 sejtvonal tranziens módon transzfektálható a génexpressziós mintázatok és a sejtjelátviteli útvonalak feltárására. Az MX-1 sejteket shRNS (rövid hajtű RNS) és nem kódoló RNS transzfekcióra használták a tanulmányok, hogy feltárják az emlőráksejtek proliferációjára és növekedésére gyakorolt hatásukat. Ezen túlmenően a kapcsolódó génszignalizációs útvonalakat is feltárták [2, 6].

A potenciális inhibitorok szűrése

Az MX-1 sejtek felhasználhatók az emlőrák elleni potenciális gyógyszerek szűrésére, mivel utánozzák a rákos sejtek mikrokörnyezetét. Egy kutatás kimutatta a Vinorelbine, egy mikrotubulustoxin terápiás aktivitását, amely MX-1 sejtekben sejthalált és poliploiditást váltott ki [4].

Rendelje meg MX-1 sejtvonalát még ma

MX-1 sejtvonal Források: Jegyzőkönyvek, videók és egyéb

A tenyésztési és transzfekciós módszerekkel kapcsolatban korlátozott számú forrás áll rendelkezésre, de a lehető legtöbb információt összegyűjtöttük az Ön számára.

Sejttenyésztési protokollok

Az MX-1 sejteket számos tranziens transzfekciós elemző vizsgálatban használják. Itt felsoroltunk néhány forrást, amelyek segítenek a transzfekciós protokollok elkészítésében.

• MX-1 sejtek transzfekciója: Ez a kiadvány leírja az MX-1 sejtekben siRNS-szel történő transzfekció protokollját a gén knock-out modell kifejlesztéséhez.
• Emlőssejtek transzfekciója: Ez a cikk minden lényeges információt tartalmaz az emlős sejtvonalakban használt transzfekciós módszerekről.

Reméljük, hogy ez a cikk értékes ismereteket nyújtott Önnek az MX-1 sejtvonalról, és hogy jobban megértette, hogyan kell ezeket a sejteket tenyészteni, fenntartani és felhasználni a kutatásaiban. Ha érdekli az MX-1 sejtvonallal való munka, ne habozzon, rendeljen tőlünk, hogy elindulhasson kutatási útjára!

Gyakran ismételt kérdések az MX-1 emlőrák sejtvonalról

Hivatkozások

1. Stefanski, C.D. és J.R. Prosperi, A CHK1-rezisztencia leküzdése a hármas negatív emlőrákban: EGFR-gátlás mint lehetséges kombinációs terápia. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., A cGAMP analógja, a c-di-AMP, aktiválja a STING által közvetített sejthalál útját ösztrogénreceptor-negatív emlőráksejtekben. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Az apoptózist gátlófehérje-szerűfehérje-2 proteomikai elemzéseaz emlőráksejtek proliferációjára. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa és J. Magae, Vinorelbine, a mikrotubulustoxin, Apoptózist és poliploiditást indukál az MX-1-ben, egy humán tripla-negatív emlőrák sejtvonalban. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., A nem genotoxikus ABCB1 aktivátor, a tetrafenilfoszfónium hozzájárulhat a doxorubicin rezisztenciához az MX-1 emlőrák sejtvonalban. Tudományos jelentések, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomikai elemzés az emlőrákról: A hosszú nem kódoló RNS linc01561 az emlőrák progressziójában részt vevő ceRNS-ként működik. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.