HT22 sejtvonal
AHT22 egy, az idegtudományi kutatásokban gyakran alkalmazott egér neuronális sejtvonal. Értékes a neurogeneratív rendellenességek tanulmányozására és a potenciális neuroprotektív terápiák vagy kezelések tesztelésére. Emellett a HT22 sejtek glutamát-érzékenyek, így a glutamát által kiváltott toxicitás vagy neuronális károsodás vizsgálatára használják.
Ez a cikk kiemeli a HT22 sejtek elengedhetetlen szempontjait, amelyek segíthetnek Önnek a kutatómunkában. Elsősorban a következőket tárgyalja:
- A HT22 sejtek általános jellemzői és eredete
- HT22 sejtvonal tenyésztési információi
- A HT22 sejtvonal előnyei és hátrányai
- A HT22 sejtvonal kutatási alkalmazásai
- HT22 sejteket tartalmazó kutatási publikációk
- A HT22 sejtekkel kapcsolatos források: Protokollok, videók és még sok más: protokollok, videók és egyéb
1. A HT22 sejtek általános jellemzői és eredete
A cikk ezen szakasza a HT22 sejtek eredetére és általános jellemzőire világít rá. A sejtvonalra vonatkozó ezen információk ismerete szükséges, mielőtt elkezdené a munkát rajta. Itt megtudhatja: Mik azok a HT22 sejtek? Milyen a HT22 hippokampusz sejtek morfológiája? Mekkora a HT22 sejtek mérete?
A HT22 egy folyamatos sejtvonal, amely az egér agy hippokampusz régiójából származik. Ez a HT-4 szülői HT-4 sejtvonal szubklónja, amelyet egér neuronális szövetek immortalizálásával fejlesztettek ki egy hőmérséklet-érzékeny poliomavírus simian virus 40 (SV40) T antigén segítségével.
Ezek a sejtek különböznek az érett hippokampusz sejtjeitől, mivel hiányoznak belőlük a glutamát- és kolinerg receptorok, mint az érett hippokampusz eredetű neuronokból. Így nem alkalmasak a memóriával kapcsolatos kutatások elvégzésére [1].
A HT22 sejtek hámsejt-szerű megjelenésűek.
2. HT22 sejtvonal tenyésztési információ
A HT22 sejteket az idegtudományi kutatólaboratóriumokban használják. Mielőtt ezeket a sejteket tenyésztik, a kutatók alapvető sejttenyésztési információkat keresnek, amelyek megkönnyítik és hatékonyabbá teszik a munkájukat. Ez a szakasz a HT22 sejtek tenyésztésével kapcsolatos összes kulcsfontosságú pontot tartalmazza. Tudni fogja: Mennyi a HT22 sejtek megduplázódási ideje? Hogyan kell HT22 sejteket tenyészteni? Mi a HT22 sejttenyésztési protokoll? Milyen a HT22 sejtek táptalaja?
A HT22 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A HT22 sejtek megduplázódási ideje körülbelül 15 óra. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A HT22 sejtek tapadnak. |
|
Szubkultivációs arány: |
A HT22 hippokampusz sejtek szubkultivációs aránya 1:3 és 1:6 között van. Röviden, a médiumot eltávolítjuk, és az adherens sejteket 1 x PBS-szel öblítjük. Az Accutase disszociáló oldatot a lombikba adjuk, és a sejteket 8-10 percig környezeti hőmérsékleten inkubáljuk. Ezután friss tápfolyadékot adunk hozzá, és a sejteket egy üvegcsébe gyűjtjük centrifugáláshoz. A kapott sejtpelletet óvatosan reszuszpendáljuk, és a sejteket a tenyésztőlombikba adagoljuk a növekedéshez. |
|
Növesztőközeg: |
A HT22 sejtek tenyésztéséhez DMEM tápfolyadékot használunk. Az optimális sejtnövekedés érdekében 10% FBS-t, 4,5 g/l glükózt, 4 mM L-Glutamint, 1,5 g/l NaHCO3-t és 1,0 mM nátrium-piruvátot tartalmaz. |
|
Növekedési feltételek: |
A HT22 sejtkultúrákat párásított inkubátorban (37 °C hőmérsékleten), 5%-osCO2-ellátás mellett tartjuk. |
|
Tárolás: |
A fagyasztott HT22 sejtek hosszú távon -150 °C alatti hőmérsékleten tárolhatók folyékony nitrogén gőzfázisában vagy ultraalacsony hőmérsékletű elektromos fagyasztóban. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A HT22 sejtek CM-1 vagy CM-ACF táptalajban lassú fagyasztási módszerrel fagyaszthatók. Ez az eljárás percenként csak 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé a minta hőmérsékletében, megvédi a sejteket a sokktól, és segít megőrizni életképességüket. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A sejteket 37 °C-os vízfürdőben 40-60 másodpercig olvasztjuk, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Ezután a sejtekhez tápfolyadékot adunk, és a sejteket centrifugáljuk, hogy eltávolítsuk a fagyasztási tápfolyadék összetevőit. A sejtpelletet reszuszpendáljuk, és a sejteket a tenyésztőközeget tartalmazó új lombikba öntjük. Ezt követően a sejteket 37 °C-on inkubátorban legalább 24 órán át inkubáljuk. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A HT22 sejtek tenyésztéséhez kötelező az 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumi beállítás. |
3. A HT22 sejtvonal előnyei és hátrányai
A HT22 hippokampusz sejtekhez társul néhány előny és hátrány, amelyek megkülönböztetik őket más neuronális sejtvonalaktól. A sejtvonal néhány figyelemre méltó előnyét és hátrányát itt említjük meg.
Előnyök
A HT22 egér neuronális sejtvonal előnyei a következők:
-
Gyors növekedési ütem
A HT22 sejtek megduplázódási ideje 15 óra, ami lehetővé teszi a gyors és hatékony kísérletezést, és segíti az időszerű kutatási eredményeket.
-
Immortalizáció
A HT22 egy immortalizált sejtvonal, amely biztosítja a folyamatos növekedést hosszabb ideig. Ez biztosítja a sejtek állandó elérhetőségét, csökkenti az időt és a költségeket, és megkönnyíti a hosszú távú kísérleteket konzisztens eredményekkel.
Hátrányok
A HT22 sejtek hátrányai a következők:
-
Egér eredetű
A HT22 sejtvonal egér agyi hippokampusz szövetből származik, amely nem feltétlenül reprezentálja teljes mértékben az emberi neuronsejtek fiziológiájának és viselkedésének komplexitását, ami korlátozza transzlációs jelentőségüket.
4. A HT22 sejtvonal kutatási alkalmazásai
A HT22 sejteket széles körben használják a neurobiológiai kutatásokban. A cikknek ebben a részében e sejtvonal néhány ígéretes alkalmazását tárgyaljuk:
- Idegtudományi kutatások: A HT22 sejteket széles körben alkalmazzák a neurodegeneratív betegségek, azaz az Alzheimer- és a Parkinson-kór kutatásában. Értékes kutatási eszköznek tekintik őket az e betegségekkel kapcsolatos neurotoxicitás és oxidatív stressz mechanizmusok tanulmányozására. A 2020-ban végzett kutatások megállapították, hogy a PI3K/AKT/CREB útvonal részt vesz a HT22 sejtekben a hiperglikémia által kiváltott idegi toxicitásban [2]. Hasonlóképpen, egy nemrégiben végzett tanulmány azt javasolta, hogy az Nrf2/HO-1 útvonal és az NF- κB jelátviteli tengely jelentős szerepet játszik a HT22 amiloid béta toxicitásban [3].
- Gyógyszer-szűrés: A HT22 sejteket széles körben használják gyógyszerkísérleti és szűrési célokra. Segítenek a kutatóknak a neurodegeneratív betegségek elleni küzdelemben neuroprotektív hatást mutató potenciális terápiás szerek azonosításában. Egy 2019-ben végzett vizsgálat a tetrahidro kurkumin vegyület neuroprotektív potenciálját vizsgálta glutamáttal kezelt HT22 hippokampusz sejtekben. Ebben a glutamát oxidatív stresszt indukál a HT22 sejtekben, és a mitogén-aktivált protein kinázok aktiválásával sejthalált okoz [4].
5. HT22 sejteket tartalmazó kutatási kiadványok
Íme néhány érdekes kutatási cikk a HT22 sejtvonalról:
Az International Journal of Molecular Medicine (2019) című folyóiratban megjelent tanulmány a Crocus sativus L.-ből izolált crocin neuroprotektív potenciálját javasolta azL-glutamát-károsodottHT22 sejtekben.
A Neuropharmacology (2018) című szaklapban megjelent publikáció arról számolt be, hogy az oxindol-származékok védelmet nyújtanak az oxidatív stressz által kiváltott HT22-sejtpusztulás ellen.
Ez a kutatási cikk a Journal of Ginseng Research 2019-es számában jelent meg. Ez a tanulmány egy természetes termék, a ginsenozid Rb2 neuroprotektív hatását vizsgálta HT22 sejtvonalon. A tanulmány megállapította, hogy a ginsenozid rb2 hatékonyan csökkentette a glutamát által kiváltott oxidatív stresszt és a sejthalált a HT22-es egér hippokampusz sejtekben.
Az Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) című folyóiratban megjelent tanulmány az ezüst nanorészecskék citotoxikus potenciálját értékelte a HT22 sejtvonalon.
A ferrosztatin-1 megvédi a HT-22 sejteket az oxidatív toxicitástól
Ez a kutatási cikk 2020-ban jelent meg a Neural regeneration research című folyóiratban. Azt javasolta, hogy a ferrosztatin-1, a ferroptózis gátlója megakadályozza az oxidatív toxicitást a HT22 hippokampusz sejtekben.
6. A HT22 sejtek forrásai: H2222 HT22-alapú sejtek: protokollok, videók és egyéb
A HT22 sejtekkel kapcsolatos néhány online forrás ismerteti a transzfekciós, differenciálási és sejttenyésztési protokollokat:
- HT22 transzfekció: HT22 transzfekcióhoz 24 és 96 lyukú sejttenyésztő lemezekben optimalizált protokollt tartalmaz.
- HT22 sejtek differenciálása: Ez a cikk átfogóan eligazítja Önt a HT22 differenciálási protokollról.
Az alábbi link a HT22 sejttenyésztési protokollt tartalmazza:
- HT22 sejtek szubkultiválása: Ez a link segít megismerni a HT22 sejtvonal szubkultiválási protokollját. Ezenkívül segítséget nyújt a sejtek neurotoxicitásának kiváltására szolgáló protokoll megismerésében.
- HT22 hippokampusz sejtek: Ez a weboldal sok hasznos információt tartalmaz a HT22 sejtek megduplázódási idejéről, a médiumokról és a sejttenyésztési protokollokról.
Hivatkozások
- He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin megakadályozza a HT22 sejtek magas glükóz által kiváltott neurotoxicitást a PI3K/Akt/CREB jelátviteli útvonalon keresztül. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., A berberin védő hatása a β-amyloid által kiváltott neurotoxicitás ellen HT22 sejtekben az Nrf2/HO-1 útvonalon keresztül. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., A tetrahidrokurkumin neuroprotektív hatása a glutamát által kiváltott oxidatív stressz ellen hippokampusz HT22 sejtekben. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.