HT-29 sejtvonal

AHT-29 egy humán vastagbélrákos sejtvonal, amely a rák- és toxikológiai kutatások széleskörű alkalmazásával rendelkezik. Ezek a sejtek például érzékenyek a vastagbélrák elleni standard kemoterápiás kezelésekre. Ezenkívül a HT-29 sejtvonal jól jellemzett in vitro modell a bélhám bakteriális fertőzésre adott válaszának vizsgálatára. A HT-29 sejtek utánozzák az érett bélsejtek, azaz az enterociták jellemzőit, és így alkalmasak a kötődés és a mechanisztikus vizsgálatok elvégzésére.

Ez a cikk a HT-29 sejtvonallal kapcsolatos minden olyan szempontot tárgyal, amelyet ismernie kell, mielőtt vele dolgozna. Főként a következőket fogja tartalmazni:

  1. HT-29 sejtek: Eredet és általános információk
  2. A HT-29 sejtvonal sejttenyésztési információi
  3. HT-29 sejtek: A-29-29-29 típusú sejtek: előnyök és korlátok
  4. HT-29 sejtek: Alkalmazások
  5. A HT-29 sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
  6. HT-29 sejtek Források: Jegyzőkönyvek, videók és egyéb

1. HT-29 sejtek: -29-29-29: Eredet és általános információk

Mielőtt bármilyen sejtvonalat használna, tudnia kell a sejtvonal általános jellemzőiről és eredetéről. Ez a szakasz segít megismerni: Mik azok a HT-29 sejtek? A HT-29 egy vastagbélrákos sejtvonal? Milyen a HT-29 sejtek morfológiája?

Milyen a HT-29 sejtvonal? A HT-29 egy 1964-ben Trempe és Fogh által létrehozott kolorektális adenokarcinóma sejtvonal. A sejtek eredetileg egy 44 éves kaukázusi nő elsődleges daganatából származnak, aki vastagbél adenokarcinómában szenvedett [1]. Létrehozása óta ezt a sejtvonalat a rákos megbetegedések biológiájának tanulmányozására használják.

A HT-29 sejtek morfológiája: A HT-29 sejtvonal általában epithelszerű morfológiával rendelkezik. A differenciált sejtek monorétegben nőnek, szoros sejt-sejt összeköttetéseket képeznek, és apikális kefehatárral rendelkeznek. Ha ezeket a sejteket glükózhiányos táptalajban tenyésztik, vagy olyan induktorokat kapnak, mint a butirát vagy sav, akkor enterocita-szerű tulajdonságokat mutatnak.

Sejtméret: A HT-29 kolorektális rákos sejtvonal átmérője 11 μm.

Genom és ploidia: A HT-29 sejtvonal kromoszómáinak modális száma 71. Ez a szám 68-72 között változhat. Ezenkívül a HT-29 sejtek áramvonalas kromoszómaszáma hiper-triploid, a 2S komponens 2,4 %-ban fordul elő.

Milyen típusú gyógyszer a HT29 MTX? A HT29 MTX egy metotrexát-rezisztens sejtvonal, amelyet az eredeti HT-29 humán vastagbélrák sejtvonalból izoláltak 10 µM metotrexáthoz való adaptációval. Ezek a sejtek a nyálkahártya-szekretáló érett goblet sejtek jellemzőit mutatják.

A vastagbélrákos sejtek osztódása és mozgása mikroszkóp alatt.

2. A HT-29 sejtvonal sejttenyésztési információi

Egy sejtvonal alapvető tenyésztési követelményeinek ismerete megkönnyítheti a vele való munkát. Tudnia kell: mennyi a HT-29 sejtvonal megduplázódási ideje? Mekkora a HT-29 sejtek vetési sűrűsége? Milyen táptalajra van szükség a HT-29 sejtek számára?

Megduplázódási idő

A HT-29 sejtvonal átlagos megduplázódási ideje 24 óra.

Adherens/szuszpenzió

A HT-29 egy adherens sejtvonal.

Ültetési sűrűség

A HT-29 sejtek ajánlott vetési sűrűsége 3 x104 sejt/cm2. A tenyésztett sejteket 1 X PBS-szel mossuk, majd 8-10 perces Accutase inkubáció után leválasztjuk. Friss tápfolyadékot adunk hozzá, és a sejteket centrifugáljuk. A sejtpelletet reszuszpendáljuk, és a sejteket az ajánlott sejtsűrűséggel új lombikokba adagoljuk.

Növesztőközeg

A HT-29 sejtek optimális tenyésztéséhez 2,5 mM L-glutaminnal és 10 % FBS-szel kiegészített Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) tápoldatot használunk. A táptalajt hetente 2-3 alkalommal kell cserélni.

Növekedési feltételek

A HT-29 sejtek növekedéséhez 37 °C-os hőmérsékletű, 5 %-osCO2-ellátással rendelkező, nedvesített inkubátorban kell tenyészteni.

Tárolás

Ezeket a sejteket folyékony nitrogén gőzfázisában, -195 °C alatt tárolják.

Fagyasztási közeg és eljárás

A HT-29 sejtvonalhoz használt fagyasztóközeg a CM-1 vagy CM-ACF. A sejteket lassú fagyasztási eljárással fagyasztják le, amely 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést okoz, és hatékonyan védi a sejtek életképességét.

Felolvasztási folyamat

A fagyasztott HT-29 sejteket 37 °C-os hőmérsékletre állított vízfürdőben olvasztjuk fel. Ezek a sejtek reszuszpendálhatók és közvetlenül a friss táptalajos lombikba adagolhatók. Ezzel ellentétben a felolvasztott sejtek centrifugálhatók a fagyasztóközeg elemeinek eltávolítása érdekében, újraszuszpendálhatók friss tápfolyadékban, és lombikokban tenyészthetők.

Biológiai biztonsági szint

A HT-29 sejtvonal kezelésére és fenntartására az 1-es biológiai biztonsági szintet alkalmazzák.

HT-29 sejtek 10x és 20x nagyításban.

3. HT-29 sejtek: H-29 cellulózok: előnyök és korlátok

Minden sejtvonalnak egyedi előnyei és hátrányai vannak, amelyek megkülönböztetik más sejtvonalaktól. Ez a szakasz a HT-29 sejtekkel kapcsolatos főbb előnyökkel és korlátozásokkal foglalkozik.

Előnyök

A HT-29 sejtek fő előnyei a következők:

  • Könnyen tenyészthető

    A HT-29 sejtvonal könnyen kezelhető és karbantartható, a tenyésztésnek nincsenek összetett követelményei. Széles körben tenyésztik a kutatólaboratóriumokban.

  • A bélsejtek in vitro modellje

    A HT-29 sejtek specifikus tenyésztési körülmények között képesek érett bélsejtekké (enterociták és nyálkatermelő sejtek) differenciálódni. Sejtmodellként használják őket a táplálék emésztésének és biológiai hozzáférhetőségének tanulmányozására.

  • Nagy transzfekciós hatékonyság

    A HT-29 vastagbélráksejtek magas transzfekciós hatékonyságot kínálnak, így alkalmasak génexpressziós és szabályozási vizsgálatokra. Mind a tranziens, mind a stabil transzfekciós kísérletek különböző módszerekkel végezhetők.

  • Gyógyszerérzékenység

    A HT-29 sejtek érzékenyek az olyan kemoterápiás gyógyszerekre, mint a vastagbélrák kezelésében általánosan használt fluorouracil és oxaliplatin. Ezeket a sejteket a gyógyszerrezisztencia tanulmányozására és a vastagbélrák potenciális terápiás gyógyszereinek szűrésére használják.

Korlátozások

  • Heterogenitás

    A HT-29 sejtek, más rákos sejtvonalakhoz hasonlóan, heterogenitást mutatnak, és nem feltétlenül alkotnak egységes sejtpopulációt. Ez befolyásolhatja az eredmények reprodukálhatóságát bizonyos vizsgálatokban, és kisebb eltérésekhez vezethet a kísérleti eredményekben.

  • Korlátozott differenciálódás

    A HT-29 sejtek korlátozott differenciálódási potenciállal rendelkeznek. Nem differenciálódnak teljesen bél- vagy vastagbélsejtekké, hanem csak néhány jellegzetes tulajdonságot mutatnak. Ez a korlátozás korlátozhatja felhasználásukat összetettebb biológiai folyamatok vizsgálatában.

4. hT-29 sejtek:

A HT-29 sejtvonalat széles körben tenyésztik a kutatólaboratóriumokban a széleskörű felhasználási lehetőségek miatt. Ez a szakasz csak a HT-29 sejtek néhány jelentős alkalmazásával foglalkozik.

Rákkutatás: A HT-29 egy kolorektális adenokarcinóma sejtvonal, így a rák progressziójának, fejlődésének és a mögöttes molekuláris mechanizmusoknak a tanulmányozására használják. Egy 2018-ban végzett tanulmány a HT-29 sejtvonalat használta az áttétképzésért felelős sejtmolekulák vizsgálatára. Ebben a tanulmányban megfigyelték, hogy a vimentin és a CXCR4 gének szabályozzák a sejtek metasztázisát. Míg a microRNS-193a-5p mimikájának transzfektálása csökkentheti ezen gének mRNS-szintjét, és sikeresen csökkentheti a rákos sejtek metasztázisát [2].

Toxikológiai kutatás: A HT-29 sejtvonalat széles körben használják a toxikológiai kutatásokban. Ezeket a kolorektális karcinóma sejteket használják a különböző gyógyszerjelöltek toxicitásának értékelésére különböző próbák segítségével. Egy tanulmány például a Syzygium cumini etanolos kivonatának toxicitási potenciálját vizsgálta a HT-29 sejtvonalon. Az eredmények a HT-29 sejtek növekedésének jelentős elnyomását mutatták, ami a kivonat ígéretes rákellenes tulajdonságaira utal [3].

Mikrobiológia: A HT-29 gazdasejt-rendszerként használható a potenciális mikrobák, azaz baktériumok és vírusok patogenezisének vizsgálatára. A kutatók megfertőzhetik a HT-29 sejteket mikrobákkal, hogy vizsgálják virulenciájukat és gazdaszervezeti válaszukat. Egy ilyen tanulmány HT-29 sejteket használt a tejsavbaktériumok probiotikus tulajdonságainak vizsgálatára [4]. Egy másik tanulmány HT-29 sejteket használt a bakteriofág kezelések hatékonyságának és biztonságosságának értékelésére [5].

5. HT-29 sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk

Ez a rész megvilágít néhány figyelemre méltó publikációt a HT-29 sejtekről, amelyek segítenek Önnek a kutatási tanulmány kidolgozásában.

A Syzygium cumini etanolos kivonatának rákellenes hatásának értékelése a HT-29 kolorektális sejtvonalon

Ez a tanulmány a Syzygium cumini etanolos kivonatát potenciális rákellenes szerként javasolta a HT-29 vastagbélrákos sejtvonal ellen. A kivonat jelentősen elnyomta a rákos sejtek növekedését.

A tetrandrin a Bcl-2/Caspase 3/PARP útvonalon és a G1/S fázison keresztül gátolja a HT-29 vastagbélrák sejtek növekedését

A Bioscience Reports című szaklapban megjelent publikáció egy vegyület, a tetradrin rákellenes hatását vizsgálta HT-29 sejteken. Az eredmények azt mutatták, hogy a tetradrin a sejtek jelátviteli útvonalainak szabályozásán keresztül gátolja a rákos sejtek proliferációját és növekedését.

a microRNS-193a-5p gátolja a humán HT-29 vastagbélráksejtek migrációját az áttétképződési útvonal elnyomása révén

Ez a tanulmány azt javasolta, hogy a miRNS-193a-5p potenciálisan szabályozhatja a HT-29 sejtek metasztázisát a metasztázissal kapcsolatos gének szabályozásán keresztül.

A bakteriofágok humán sejtekkel virulensebbek a baktériumokra, mint baktériumtenyészetben; betekintés a HT-29 sejtekből

Ez a tanulmány a Nature Scientific Reports 2018-as számában jelent meg. Ez a tanulmány a HT-29 tumoros sejtvonalat használta bélrendszeri sejtmodellként a javasolt bakteriofág kezelés hatékonyságának értékeléséhez.

A laktobacillusok probiotikus tulajdonságai és az enteropatogén baktériumok Caco-2 és HT-29 sejtekhez való tapadását gátló képességük

Ebben a tanulmányban a kutatók HT-29 sejteket használtak a tejsavbaktériumok probiotikus tevékenységének vizsgálatára. Érdekes módon a vizsgálat azt mutatta, hogy a laktobacillusok baktériumok megakadályozzák a patogén baktériumok tapadását a vastagbélsejtekhez.

6. HT-29 sejtek Erőforrások: Jegyzőkönyvek, videók és egyéb

Ez a szakasz néhány, a HT-29 sejtekkel kapcsolatban elérhető online forrást ismertet, amelyek segítenek a HT-29 sejtek fenntartási, tenyésztési és transzfekciós protokolljainak megismerésében.

Sejttenyésztési protokollok

A következő források a HT-29 sejtek szubkultúrázásával kapcsolatban nyújtanak útmutatást.

  • HT-29 sejtek tenyésztése: Ez a link alapvető ismereteket nyújt a HT-29 sejtek táptalajáról, felolvasztásáról és szubkultúrázásáról.
  • HT-29 kultúrák fenntartása: Ez a cikk minden hasznos információt tartalmaz a HT-29 sejtek tenyésztésével és fenntartásával kapcsolatban.

Transzfekciós protokollok

A HT-29 sejtvonal nagy transzfekciós hatékonysággal rendelkezik, és gyakran használják génexpressziós vizsgálatokban. Az alábbi források leírják az ezen sejtek lehetséges transzfekciós protokolljait.

A HT-29 sejtvonalhoz kapcsolódó videók

Íme néhány videó ennek a tumorogén sejtvonalnak a tenyésztéséről és fenntartásáról.

Elvárjuk, hogy a cikkben található információk értékes és elegendőek legyenek az Ön számára a HT-29 sejtvonal kezeléséhez és karbantartásához. Ha HT-29 sejteket tervez használni tanulmányában, rendeljen tőlünk.

Hivatkozások

  1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles és I. Recio, HT29 sejtvonal. Az élelmiszerek bioaktív anyagainak hatása az egészségre: in vitro és ex vivo modellek, 2015: 113-124. o.
  2. Shirafkan, N., et al., microRNS-193a-5p gátolja a humán HT-29 vastagbélráksejtek migrációját a metasztázis útvonal elnyomása révén. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
  3. Khodavirdipour, A., R. Zarean és R. Safaralizadeh, A Syzygium cumini etanolos kivonatának rákellenes hatásának értékelése a HT-29 vastagbélsejtvonalon. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
  4. Fonseca, H.C., et al., A laktobacillusok probiotikus tulajdonságai és az enteropatogén baktériumok Caco-2 és HT-29 sejtekhez való tapadását gátló képességük. Probiotikumok és antimikrobiális fehérjék, 2021. 13: p. 102-112.
  5. Shan, J., et al., A bakteriofágok virulensebbek a baktériumokra emberi sejtekkel, mint baktériumtenyészetben; betekintés a HT-29 sejtekből. Tudományos jelentések, 2018. 8(1): p. 5091.

Azt észleltük, hogy Ön egy másik országban él, vagy a jelenleg kiválasztottól eltérő böngészőnyelvet használ. Szeretné elfogadni a javasolt beállításokat?

Zárja be a