HL-60 sejtek: Az akut mieloid leukémia kutatásának alapjai
Az HL-60 egy halhatatlan emberi leukémia sejtvonal. Széles körben használják a rákbiológia tanulmányozására és a rákellenes gyógyszerek hatékonyságának vizsgálatára. Ezenkívül felhasználható a leukémiás sejtek szaporodásában és differenciálódásában szerepet játszó különböző sejt- és molekuláris mechanizmusok megértésére is.
- Növekedési tápközeg
- Lásd a termékoldalt
- Duplázódási idő
- Lásd a termékoldalt
- Növekedési típus
- Adherens
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — HL-60 megrendelése
- HL-60 sejtvonal: Eredet és általános információk
- HL-60 sejtkultúra-információk
- HL-60 sejtek: Előnyök és hátrányok
- Az HL-60 sejtvonal alkalmazásai a kutatásban: a rákos megbetegedésektől az immunológiáig és azon túl
- HL-60 sejtvonal a kutatásához
- HL-60 sejtek: Kutatási publikációk
- HL-60 sejtvonal források: protokollok, videók és egyebek
- HL-60 sejtvonal: alapvető GYIK kutatók számára
- Hivatkozások
- Gyakran feltett kérdések
HL-60 sejtvonal: Eredet és általános információk
A HL-60 sejtvonal a hematológiai kutatások fontos modelljeként szolgál, mélyreható betekintést nyújtva az akut promyelocytás leukémia természetébe és kezelésébe. Ez a blogbejegyzés a HL-60 sejtvonal eredetét és jellegzetes tulajdonságait vizsgálja, rávilágítva annak kulcsfontosságú szerepére az orvosi kutatásban és a terápiás fejlesztésekben.
Az HL-60-at először egy 36 éves, akut promyelocytás leukémiával diagnosztizált kaukázusi nő leukémiás sejtjeiből állították elő. Ezt az úttörő munkát S.J. Collins és csapata végezte, ami jelentős áttörést jelentett, mivel az HL-60 volt az első mieloid leukémia sejtvonal, amelyet sikeresen izoláltak és szuszpenzióban tenyésztettek. Ez az eredmény számos kutatási lehetőséget nyitott meg a leukémia és más kapcsolódó betegségek tanulmányozása terén. Fizikai jellemzőik tekintetében a HL-60 sejtek limfoblasztos morfológiát mutatnak, és ismert, hogy szuszpenzióban növekednek, alakjuk kerek. Ezeknek a sejteknek a mérete változó, átmérőjük 9 és 25 μm között mozog, ami heterogenitásukat tükrözi. Genomszinten a HL-60 sejtvonal túlnyomórészt pszeudodiploid, a kromoszómaszám modális értéke 43. Érdekes módon a sejtek kis hányada (6,2%) 2S komponenst mutat, ami további komplexitást ad genetikai felépítésükhöz [1].
A HL-60 sejtek ezen alapvető jellemzőinek megértése nemcsak a leukémia sejtszintű ismereteit bővíti, hanem támogatja a folyamatban lévő kutatási erőfeszítéseket is az új kezelési módszerek feltárása érdekében. A következő szakaszokban azt vizsgáljuk, hogy a HL-60 sejtvonal egyedülálló tulajdonságai hogyan járultak hozzá az orvosi kutatás jelentős előrelépéseihez.
Információk az HL-60 sejtkultúráról
Az HL-60 sejtek tenyésztése egyszerű és könnyű. Ez a szakasz olyan alapvető kérdésekkel ismertet meg, mint például: Mennyi az HL-60 sejtvonal duplázódási ideje? Az HL-60 adhezív vagy szuszpenziós tenyészet? Mekkora az HL-60 sejtvonal beültetési sűrűsége? Milyen táptalajt használnak az HL-60 szaporodásához?
Duplázódási idő:
Az HL-60 sejtek duplázódási ideje körülbelül 36–48 óra.
Adherens vagy szuszpenziós:
A HL-60 sejtek szuszpenziós tenyészetként növekednek.
Beültetési sűrűség:
Ezeket a sejteket szubkultúrában 1 x 106 sejt/ml sűrűséggel, új tenyészet indításakor pedig 2 x 105 sejt/ml sűrűséggel vetik be.
Növekedési tápközeg:
Az HL-60 sejtek tenyésztéséhez 10 % FBS-t és 2,5 mM L-glutamint tartalmazó RPMI 1640 tenyészközeget használnak. A közeget hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
A HL-60 sejteket párásított inkubátorban, 37 °C hőmérsékleten és 5 %-os CO2-ellátás mellett tenyésztik.
Tárolás:
A HL-60 sejteket -150 °C alatti hőmérsékleten vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tárolják, hogy a sejtek maximális száma életképes maradjon.
Fagyasztó tápközeg és eljárás:
A HL-60 sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztóközeget használnak. A HL-60 sejtek fagyasztásához a lassú fagyasztási módszert részesítik előnyben.
Felolvasztási eljárás:
A fagyasztott HL-60 sejtekkel töltött fiolát gyorsan felkeverik egy 37 °C-ra beállított vízfürdőben. Ezután a sejteket centrifugálják a fagyasztó közeg eltávolítása érdekében. Új tenyészközeget adnak hozzá, és a sejteket újra szuszpendálják, hogy azokat növekedés céljából lombikba töltsék.
Biológiai biztonsági szint:
Az HL-60 tenyészetek kezeléséhez az 1. biológiai biztonsági szint ajánlott.
HL-60 sejtek: Előnyök és hátrányok
Mielőtt bármilyen sejtvonalat használna, érdemes megismernie annak előnyeit és hátrányait. Ez a cikk a HL-60 sejtek használatának néhány előnyét és hátrányát mutatja be.
Előnyök
Az HL-60 sejtvonal néhány kiemelkedő előnye:
- Sokoldalúság: A HL-60 sejtek megfelelő tenyésztési körülmények között képesek többféle sejttípussá differenciálódni, beleértve a monocitákat, a makrofágokat és a granulocitákat. Ezért hasznosak a sejtdifferenciálódás és más sejtfolyamatok tanulmányozásához.
- Könnyű tenyésztés: A HL-60 sejtek könnyen tenyészthetők és fenntarthatók szuszpenziós tenyészetekben, ami kényelmes eszközzé teszi őket számos sejtfolyamat tanulmányozásához.
- Leukémia in vitro modellje: Ezeket a sejteket akut mieloid leukémiában szenvedő betegtől nyerték, így genetikai és molekuláris jellemzőik hasonlóak a betegségéhez.
Hátrányok
A HL-60 sejtvonal hátrányai a következők:
- Korlátozott differenciálódási potenciál: A HL-60 sejtek stimuláció hatására bizonyos mieloid vonalakká differenciálódhatnak, de differenciálódási potenciáljuk az elsődleges sejtekéhez képest korlátozott.
A HL-60 sejtvonal alkalmazásai a kutatásban: a rákos megbetegedésektől az immunológiáig és azon túl
Az akut promyelocytás leukémiában szenvedő betegtől származó HL-60 sejtvonal sokoldalúsága és könnyű tenyészthetősége miatt az orvosi kutatás egyik alapkövévé vált. Ezek a kis karbantartási igényű tenyészetek számtalan kutatási alkalmazásban játszanak kulcsfontosságú szerepet, és célunk, hogy a legjelentősebbek közül néhányat bemutassunk, széles körű kutatási kulcsszavak bevonásával, hogy átfogó áttekintést nyújtsunk.
Rákkutatás
Az onkológia területén a HL-60 sejtvonal döntő szerepet játszott a ráksejtek jelátvitelének bonyolult folyamatainak feltárásában, elősegítve az onkogén expresszió megértését és új terápiás célpontok felfedezését. Ez a sejtvonal része a leukémia sejtvonal-panelnek, amelyet új kemoterápiás szerek szűrésére használnak. Egy ékes példa erre a HL-60 sejtek felhasználása a tengeri szervezetekből kivont vegyületek leukémiaellenes tulajdonságainak megállapítására, amelynek során mind antiproliferatív, mind proapoptotikus hatások kerültek napvilágra [2]. Továbbá a sejtvonal megkönnyítette olyan kulcsfontosságú jelátviteli útvonalak vizsgálatát, mint a JAK/STAT, és azok hatását a leukémiás sejtek szaporodására, valamint olyan bioaktív vegyületek terápiás ígéretességének értékelését, mint a timokinon [3].
Immunológia
A HL-60 sejtek egy robusztus in vitro rendszer különböző immunválaszok vizsgálatára, beleértve a kemotaxis komplex folyamatát és a kulcsfontosságú immunmediátorok expressziójának szabályozását. Ezek a sejtek makrofágokhoz és neutrofilekhez hasonló mieloid sejtekké differenciálódhatnak, így sokoldalú modellként szolgálnak a gyulladásos útvonalak vizsgálatához. Például HL-60-ból származó makrofágszerű sejteket használtak a Brassica nemzetségből származó fitokemikáliák gyulladáscsökkentő potenciáljának feltárására [4]. Egy másik tanulmányban az HL-60 sejtek neutrofil-szerű sejtekké történő differenciálódása lehetővé tette a kutatók számára, hogy azonosítsák a sejtek differenciálódásához és a kapcsolódó immunfunkciókhoz elengedhetetlen géneket [5].
Gyógyszerkutatás
A HL-60 mieloid differenciálódási képességeit a gyógyszerkutatásban is kihasználják, különösen olyan jelöltek azonosítására, amelyek potenciálisan modulálhatják a differenciálódási útvonalat, ami kulcsfontosságú a leukémia kezelésében. Ezt példázzák azok a tanulmányok, amelyek a HL-60 sejtvonalat használták természetes termékek rákellenes potenciáljának értékelésére [6].
Ezenkívül a HL-60 sejtvonalat a mieloid sejtvonalak biológiájának különböző aspektusainak tanulmányozására is használják, például annak megértésére, hogy a retinsavhoz hasonló szerekkel történő kezelés hogyan vezethet monocita-differenciálódáshoz, vagy hogy ezek a sejtek hogyan utánozzák az elsődleges neutrofileket az extracelluláris csapdák kialakításában. A modell használata a hematológiai malignitások molekuláris eseményeinek tisztázásában tovább bővül a mutációs sejtpanel-vizsgálatokban való alkalmazásával, különösen a leukémia p53 hotspot-elemzésének kontextusában.
Azok számára, akik a sejtek mechanikáját, a HL-60 sejtvonal duplázódási idejét és a mikrofluidikus csatornákban végzett elektroporációra adott reakciójukat vizsgálják, a sejtvonal megbízható kutatási platformot kínál.
HL-60 sejtvonal a kutatásához
HL-60 sejtek: Kutatási publikációk
Számos kutatási tanulmány áll rendelkezésre az HL-60 sejtekről. Itt felsoroltunk néhány figyelemre méltó példát:
Ez a kutatási cikk egy vegyület, a Stigmast-5-en-3-ol daganatellenes hatását mutatta be HL-60 leukémia sejtekre és MCF7 emlőrák sejtekre.
Ez a tanulmány a JAK/STAT jelátvitel szerepét írja le az HL-60 sejtek szaporodásában. Ezenkívül a kutatók a timochinon vegyület terápiás potenciálját vizsgálják ennek a leukémia sejtvonalnak a felhasználásával. A vegyület gátolja a sejtek szaporodását és sejthalált indukál a JAK/STAT kaszkád negatív szabályozóinak expressziójának újraindításával.
Ez a tanulmány HL-60 sejteket használt egy makrofágszerű sejtmodell létrehozásához a Brassica növényi vegyületek gyulladáscsökkentő hatásának vizsgálata céljából.
Az International Immunopharmacology folyóiratban megjelent tanulmány dimetil-szulfoxid felhasználásával neutrofilsejteket utánozó sejteket fejlesztett ki a HL-60 sejtvonalból. A tanulmány megállapította, hogy az ERK gén részt vesz ezeknek a sejteknek a differenciálódásában.
Ez a kutatási cikk a növényi polifenolok, azaz a galluszsav és az ellaginsav rákellenes hatását vizsgálja gyógyszerérzékeny és gyógyszerrezisztens HL-60 leukémia sejtekre.
HL-60 sejtvonal Források: protokollok, videók és egyéb anyagok
Számos online oktatási forrás áll rendelkezésre az HL-60 sejtvonalról. Ez a szakasz néhány olyan forrást ismertet, amelyek leírják e sejtvonal tenyésztését és transzfekcióját.
Sejtkultúra-protokollok
Az HL-60 sejtek tenyésztési módszereit leíró források a következők:
- HL-60 szaporítása: Ez a dokumentum információkat nyújt az HL-60 sejtek szubkultiválásáról.
- HL-60 sejtvonal: Ez a weboldal alapvető információkat tartalmaz az HL-60 sejtekről és a protokollokról, beleértve a sejtek tenyésztését, fagyasztását és felolvasztását.
Transzfekciós protokollok
Íme néhány forrás, amely az HL-60 sejtekre alkalmazott transzfekciós módszereket ismerteti.
- HL-60 sejtek transzfekciója: Ez a link részletes transzfekciós eljárást tartalmaz az HL-60 leukémia sejtekre vonatkozóan.
- HL-60 sejtek átmeneti transzfekciója: Ez a dokumentum hasznos információkat tartalmaz a sejtvonalról, és részletes protokollt ad az HL-60 sejtek átmeneti transzfekciójához.
Az HL-60 sejtvonalhoz kapcsolódó videók
Az HL-60 sejtekről nagyon kevés videóforrás áll rendelkezésre.
- HL-60 sejtek átültetése: Ez a videó bemutatja az HL-60 sejtek szubkultiválásának protokollját.
Reméljük, hogy ez a cikk alapvető információkat nyújt Önnek a HL-60 sejtvonal tenyésztéséről és fenntartásáról. Ezenkívül bővítheti ismereteit ezeknek a leukémia sejteknek a kutatásban való felhasználásának előnyeiről. Ha ezt a sejtvonalat tervezi használni, rendeljen tőlünk.
HL-60 sejtvonal: Fontos tudnivalók kutatók számára
A HL-60 sejtvonal egy akut promyelocytás leukémiában szenvedő betegtől származó promyelocytás leukémia sejtvonal. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a kutatásban a mieloid sejtek differenciálódásának és az onkogének expressziójának vizsgálatára.
A retinsav differenciálódást vált ki a HL-60 sejtvonalban, ami arra készteti a sejteket, hogy granulocita-szerű sejtekké érjenek. Ez a folyamat kulcsfontosságú a mieloid differenciálódás mögött meghúzódó mechanizmusok vizsgálatában.
A szérum a vérképző sejtek tenyésztőközegeinek elengedhetetlen alkotóeleme, amely biztosítja a tenyészetben lévő HL-60 sejtek szaporodásához és fennmaradásához szükséges alapvető növekedési faktorokat és tápanyagokat.
Igen, az HL-60 sejtvonal képes kemotaxiszra, vagyis a sejtek kémiai ingerekre adott válaszként történő mozgására. Ezért alkalmasak kemotaxisz-vizsgálatokhoz és a sejtvándorlás megértéséhez.
Az HL60 sejtvonal, amelyben sejtes onkogén expresszió figyelhető meg, modellrendszerként szolgál az onkogének expressziójának szabályozásának, valamint a leukémia kialakulásában betöltött szerepüknek a vizsgálatához.
A HL-60 sejtvonal felbecsülhetetlen értékű a sejtbiológiai kutatásokban, különösen a sejtciklus, a sejtdifferenciálódási folyamatok, valamint a leukémiához vezető molekuláris események vizsgálata során.
A leukémiás sejtvonal-panelek lehetővé teszik különböző leukémiás sejtvonalak összehasonlító vizsgálatát, ideértve azok genetikai összetételét, mutációs profilját, a gyógyszerekre adott reakciót, valamint a leukémia kialakulásában szerepet játszó molekuláris útvonalakat, például a MAPK-útvonalat.
Az analitikai és származási tanúsítványok általában letölthetők, illetve beszerezhetők a HL-60 sejtvonalat forgalmazó beszállítótól vagy adattárból, így biztosítva, hogy a kutatók hitelesített és szennyeződésmentes sejteket kapjanak kutatásaikhoz.
A HL-60 sejtvonal differenciálható úgy, hogy az elsődleges neutrofilekhez hasonló tulajdonságokat nyerjen, ideértve az extracelluláris csapdák kialakításának képességét is, ami lehetővé teszi a kutatók számára, hogy ezeket helyettesítő modellként használják a neutrofilek viselkedésének és működésének vizsgálatához.
Az HL-60 sejteket in vitro modellként használják az akut promyelocytás leukémia, a mieloid sejtvonalak biológiája, valamint a különböző vegyületek differenciálódásra és szaporodásra gyakorolt hatásainak vizsgálatához. Ezenkívül olyan sejtválaszok kutatásában is alkalmazzák őket, mint a kemotaxis, az onkogén expresszió, valamint a mutációk sejtfolyamatokra gyakorolt hatása.
A „HL-60” rövidítés a „Human Leukemia 60” kifejezést jelenti. Ez a kifejezés arra utal, hogy a sejtvonalat a kifejlesztés idején a 60. leukémiás betegtől állították elő. Az „HL” betűk az emberi leukémiás sejtekre való összpontosítást jelzik.
Az HL-60 sejtek duplázódási ideje optimális tenyésztési körülmények között körülbelül 36–48 óra. Ez azonban a tenyésztési körülményektől és a sejtek passzálási számától függően változhat.
Amikor a HL-60 sejteket forbol-12-mirisztát-13-acetáttal (PMA) kezelik, azok általában makrofágokra vagy monocitákra emlékeztető sejttípussá differenciálódnak. Ez a differenciálódás a monocita-differenciálódási útvonalak kutatásának része, és hozzájárul a mieloid sejtek differenciálódásának mechanizmusainak megértéséhez.
Hivatkozások
- Fleck, R., S. Romero-Steiner és M. Nahm, HL-60 sejtvonal használata a pneumococcus ellenanyagok opszonikus kapacitásának mérésére. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): 19–27. o.
- Fernando, I.S. és társai, A Dendronephthya gigantea-ból származó Stigmast-5-en-3-ol apoptotikus és antiproliferatív hatásai az emberi leukémia HL-60 és az emberi emlőrák MCF-7 sejtekre. Toxicology in Vitro, 2018. 52: 297–305. o.
- Almajali, B. és munkatársai, A timokinon gátolja a sejtek szaporodását és fokozza a HL60 leukémia sejtek apoptózisát a JAK/STAT negatív szabályozók újbóli expresszióján keresztül. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): 879. o.
- Ruiz-Alcaraz, A.J. és munkatársai: A Brassica bioaktív vegyületeinek gyulladáscsökkentő potenciáljának elemzése HL-60 sejtekből származó, emberi makrofágszerű sejtmodellben. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: 112804. o.
- Wang, D. és munkatársai, Az ERK részt vesz a dimetil-szulfoxid által indukált HL-60 neutrofil-szerű sejtek differenciálódásában és működésében, amelyek utánozzák a gyulladásos neutrofileket. International Immunopharmacology, 2020. 84: 106510. o.
- Núñez-Sánchez, M.Á. és munkatársai: Brassica-ból származó bioaktív vegyületek anti-leukémiás hatása HL-60 mieloid leukémia sejtekben. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): 13400. o.