HL-60 sejtek: Akut myeloid leukémia kutatási alapismeretek

AHL-60 egy halhatatlan emberi leukémiasejtvonal. Széles körben használják a rák biológiájának tanulmányozására és a rákellenes gyógyszerek hatékonyságának feltárására. Ezenkívül a leukémiás sejtek proliferációjában és differenciálódásában szerepet játszó különböző sejtes és molekuláris mechanizmusok megértésére is használható.

HL-60 sejtvonal: HL-60-60-60 vonal: Eredet és általános információk

A HL-60 sejtvonal a hematológiai kutatások alapvető fontosságú modelljeként szolgál, amely mélyreható betekintést nyújt az akut promilocitás leukémia természetébe és kezelésébe. Ez a blogbejegyzés a HL-60 sejtvonal eredetét és jellegzetes tulajdonságait tárja fel, megvilágítva az orvosi kutatásban és a terápiás fejlesztésekben betöltött döntő szerepét.

A HL-60-at először egy 36 éves kaukázusi nő leukémiás sejtjeiből állították elő, akinél akut promilocitális leukémiát diagnosztizáltak. Ezt az úttörő munkát S. J. Collins és csapata végezte, ami jelentős áttörést jelentett, mivel a HL-60 volt az első olyan myeloid leukémiás sejtvonal, amelyet sikeresen izoláltak és szuszpenzióban tenyésztettek. Ez az eredmény számos kutatási lehetőséget tett lehetővé a leukémia és más kapcsolódó betegségek tanulmányozásában. Fizikai jellemzőit tekintve a HL-60 sejtek limfoblasztos morfológiát mutatnak, és ismert, hogy szuszpenzióban növekednek, és kerek alakúnak tűnnek. E sejtek mérete változó, átmérőjük 9 és 25 μm között mozog, ami heterogenitásukat tükrözi. Genomikai szinten a HL-60 sejtvonal túlnyomórészt pszeudodiploid, 43-as modális kromoszómaszámmal. Érdekes módon a sejtek egy kis százaléka (6,2%) 2S komponenst mutat, ami a genetikai felépítésük egy újabb komplexitási réteget jelent [1].

A HL-60 sejtek ezen alapvető aspektusainak megértése nemcsak a leukémiáról való sejt szintű ismereteinket bővíti, hanem támogatja az új kezelési módok feltárására irányuló, folyamatban lévő kutatási erőfeszítéseket is. A következő szakaszokban azt vizsgáljuk meg, hogy a HL-60 sejtvonal egyedi tulajdonságai hogyan járultak hozzá az orvosi kutatás jelentős előrelépéséhez.

Monocelluláris leukémiás szövet mikroszkóp alatt.

HL-60 sejtkultúrával kapcsolatos információk

A HL-60 sejtek tenyésztése egyszerű és könnyű. Ez a rész megismerteti Önt az olyan alapokkal, mint például: Mennyi a HL-60 sejtvonal megduplázódási ideje? A HL-60 adherens vagy szuszpenziós tenyésztés? Mekkora a HL-60 sejtvonal vetési sűrűsége? Milyen táptalajt használnak a HL-60 növekedéséhez?

Megduplázódási idő:	A HL-60 sejtek megduplázódási ideje körülbelül 36-48 óra.
Adherens vagy szuszpenzióban:	A HL-60 sejtek szuszpenziós kultúrákban növekednek.
Ültetési sűrűség:	Ezeket a sejteket 1 x¹⁰⁶ sejt/ml sűrűséggel vetjük be szubkultúrázáskor és 2 x¹⁰⁵ sejt/ml sűrűséggel, amikor új kultúrát indítunk.
Növesztőközeg:	A HL-60 sejtek tenyésztéséhez 10 % FBS-t és 2,5 mM L-glutamint tartalmazó RPMI 1640 növekedési táptalajt használunk. A táptalajt hetente 2-3 alkalommal kell megújítani.
Növekedési feltételek:	A HL-60 sejteket párásított inkubátorban, 37 °C-os hőmérsékleten és 5 %-os_{CO2-ellátás} mellett tenyésztjük.
Tárolás:	A HL-60 sejteket -150 °C alatti hőmérsékleten vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tároljuk, hogy a sejtek maximális száma életképes maradjon.
Fagyasztási közeg és eljárás:	A HL-60 sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztóközegeket használunk. A HL-60 sejtek fagyasztásához a lassú fagyasztási módszert részesítjük előnyben.
Felolvasztási folyamat:	A HL-60 sejtek lefagyasztott fioláját 37 °C-os vízfürdőben gyorsan megmozgatjuk. Ezt követően a sejteket centrifugáljuk a fagyasztóközeg eltávolítása érdekében. Új táptalajt adunk hozzá, és a sejteket újra szuszpendáljuk, hogy a növekedéshez lombikba adagoljuk.
Biológiai biztonsági szint:	A HL-60 kultúrák kezeléséhez az 1. biológiai biztonsági szint ajánlott.

HL-60 szuszpenziós sejtek 10x és 20x nagyításban.

HL-60 sejtek: HL-60 sejtek: előnyök és hátrányok

Mielőtt bármilyen sejtvonallal dolgozna, érdemes megismerni annak előnyeit és hátrányait. Ez a cikkrész a HL-60 sejtek használatának néhány előnyét és hátrányát tárgyalja.

Előnyök

A HL-60 sejtvonal néhány kiemelkedő előnye a következő:

Sokoldalúság: A HL-60 sejtek megfelelő növekedési körülmények között képesek több sejttípussá, többek között monocitákká, makrofágokká és granulocitákká differenciálódni. Ez teszi őket hasznossá a sejtdifferenciálódás és más sejtfolyamatok tanulmányozására
Könnyen tenyészthető: A HL-60 sejtek könnyen tenyészthetők és fenntarthatók szuszpenziós kultúrákban, ami kényelmes eszközzé teszi őket számos sejtfolyamat tanulmányozására
A leukémia in vitro modellje: Ezeket a sejteket egy akut myeloid leukémiában szenvedő betegből nyerték, így a betegséghez hasonló genetikai és molekuláris jellemzőkkel rendelkeznek

Hátrányok

A HL-60 sejtvonal hátrányai a következők:

Korlátozott differenciálódási potenciál: A HL-60 képes stimulusokra reagálva egyes myeloid vonalakká differenciálódni, de differenciálódási potenciáljuk korlátozott a primer sejtekhez képest.

A HL-60 sejtvonal alkalmazásai a kutatásban: A rákos megbetegedésektől az immunológiáig és azon túl

A HL-60 sejtvonal, amely egy akut promilocitás leukémiás betegből származik, sokoldalúsága és könnyű tenyészthetősége miatt az orvosi kutatás sarokkövévé vált. Ezek az alacsony karbantartást igénylő tenyészetek kulcsfontosságúak számtalan kutatási alkalmazásban, és célunk, hogy a legjelentősebbek közül néhányat feltárjunk, a vizsgálati kulcsszavak széles körét beépítve, hogy átfogó áttekintést nyújtsunk.

Rákkutatás

Az onkológia területén a HL-60 sejtvonal jelentős szerepet játszott a rákos sejtek jelátvitelének bonyolult részleteinek feltárásában, az onkogének kifejeződésének megértésében és az új terápiás célpontok felfedezésében. Ez a sejtvonal az új kemoterápiás szerek szűrésére használt leukémiasejtvonal-panel részét képezi. Megható példa a HL-60 sejtek felhasználása a tengeri élőlényekből kivont vegyületek leukémiaellenes tulajdonságainak megállapítására, amely antiproliferatív és pro-apoptotikus hatásokat egyaránt kimutatott [2]. A sejtvonal továbbá megkönnyítette az olyan kulcsfontosságú jelátviteli útvonalak, mint a JAK/STAT és a leukémiás sejtek proliferációjára gyakorolt hatásuk vizsgálatát, valamint az olyan bioaktív vegyületek, mint a timokinon terápiás ígéretének értékelését [3].

Immunológia

A HL-60 sejtek robusztus in vitro rendszert jelentenek különböző immunválaszok vizsgálatára, beleértve a kemotaxis összetett folyamatát és a kulcsfontosságú immunmediátorok expressziójának szabályozását. Ezek a sejtek képesek a makrofágokhoz és neutrofilekhez hasonló myeloid sejtekké differenciálódni, sokoldalú modellként szolgálva a gyulladásos útvonalak vizsgálatához. HL-60-ból származó makrofágszerű sejteket alkalmaztak például a Brassica nemzetségből származó fitokémiai anyagok gyulladáscsökkentő potenciáljának vizsgálatára [4]. Egy másik tanulmányban a HL-60 sejtek neutrofilszerű sejtekké történő differenciálása lehetővé tette a kutatók számára, hogy azonosítsák a sejtdifferenciálódás és a kapcsolódó immunfunkciók szempontjából kulcsfontosságú géneket [5].

Gyógyszerkutatás

A HL-60 sejtek myeloid differenciálódási képességét a gyógyszerkutatásban is hasznosították, különösen olyan jelöltek azonosítása során, amelyek potenciálisan módosíthatják a differenciálódási útvonalat, ami kulcsfontosságú a leukémia kezelésében. Ezt példázzák azok a vizsgálatok, amelyek a HL-60 sejtvonalat használták a természetes termékek rákellenes potenciáljának értékelésére [6].

Ezenkívül a HL-60 sejtvonalat a myeloid sejtvonalak biológiájának különböző aspektusainak tanulmányozására is használják, például annak megértésére, hogy az olyan szerekkel való kezelés, mint a retinsav, hogyan vezethet monocita differenciálódáshoz, vagy hogyan utánozzák ezek a sejtek az extracelluláris csapdák létrehozásában a primer neutrofileket. A modellnek a hematológiai malignitások molekuláris eseményeinek tisztázására való felhasználását tovább bővíti a mutációs sejtpanel-vizsgálatokban való alkalmazása, különösen a leukémia p53 hotspot-elemzésével összefüggésben.

A HL-60 sejtmechanikáját, megduplázódási idejét és mikrofluidikus csatornákban történő elektroporációra adott válaszát kutatók számára a sejtvonal megbízható vizsgálati platformot kínál.

HL-60 sejtvonal az Ön kutatásaihoz

430,00 EUR*

Tartalom: 1.5 milliliter

Árak adók és szállítási költségek nélkül

cryovial

Termékszám: 300209

HL-60 sejtek: HL-60-60-60: kutatási publikációk

Számos kutatási tanulmány áll rendelkezésre a HL-60 sejtekről. Az alábbiakban néhány figyelemre méltó példát sorolunk fel:

A Dendronephthya giganteából származó Stigmast-5-en-3-ol apoptotikus és antiproliferatív hatása a HL-60 humán leukémiás és MCF-7 humán emlőrákos sejtekre

Ez a kutatási cikk egy vegyület, a Stigmast-5-en-3-ol tumorellenes hatását javasolta a HL-60 leukémiasejtekre és az MCF7 emlőráksejtekre.

A timokinon elnyomja a HL60 leukémiás sejtek sejtproliferációját és fokozza az apoptózist a JAK/STAT negatív szabályozók újrakifejeződésén keresztül

Ez a tanulmány a JAK/STAT jelátvitel szerepét írja le a HL-60 sejtek proliferációjában. Emellett a kutatók a timokinon vegyület terápiás potenciálját vizsgálják e leukémiás sejtvonal felhasználásával. A vegyület a JAK/STAT kaszkád negatív szabályozóinak expressziójának felélesztésével gátolja a sejtproliferációt és sejthalált indukál.

A Brassica bioaktív vegyületek gyulladáscsökkentő potenciáljának elemzése HL-60 sejtekből származó humán makrofág-szerű sejtmodellben

Ebben a tanulmányban HL-60 sejteket használtak fel a Brassica növényi vegyületek gyulladáscsökkentő hatásának vizsgálatából származó makrofág-szerű sejtmodell származtatására.

Az ERK részt vesz a dimetil-szulfoxid által indukált HL-60 neutrofilszerű sejtek differenciálódásában és működésében, amelyek gyulladásos neutrofileket utánoznak

Az International Immunopharmacology folyóiratban megjelent tanulmány dimetil-szulfoxid felhasználásával a HL-60 sejtvonalból neutrofil sejtutánzatot fejlesztett ki. A tanulmány megfigyelte, hogy az ERK gén részt vesz e sejtek differenciálásában.

Válogatott növényi polifenolok, a galluszsav és az ellagsav tumorellenes hatása érzékeny és multidrog-rezisztens HL60 leukémiás sejtekre

Ez a kutatás a növényi polifenolos vegyületek, azaz a galluszsav és az ellagsav rákellenes potenciálját vizsgálja gyógyszerérzékeny és rezisztens HL-60 leukémiasejteken.

HL-60 sejtvonal Források: Jegyzőkönyvek, videók és egyéb

A HL-60 sejtvonalról több online oktatási forrás is elérhető. Ez a szakasz néhány olyan forrással foglalkozik, amelyek ennek a sejtvonalnak a tenyésztését és transzfekcióját írják le.

Sejttenyésztési protokollok

A HL-60 sejttenyésztési módszereket leíró források a következők:

HL-60 szaporítása: Ez a dokumentum a HL-60 sejtek szubkultúrázásáról nyújt információt.
HL-60 sejtvonal: Ez a weboldal tartalmazza a HL-60 sejtekre és a protokollokra vonatkozó alapvető információkat, beleértve a sejtek tenyésztését, fagyasztását és kiolvasztását.

Transzfekciós protokollok

Itt néhány forrás található, amelyek a HL-60 sejtekhez választott transzfekciós módszereket írják le.

HL-60 sejtek transzfekciója: Ez a link a HL-60 leukémiasejtek részletes transzfekciós eljárását tartalmazza.
HL-60 sejtek tranziens transzfekciója: Ez a dokumentum hasznos információkat tartalmaz a sejtvonalról, és részletes protokollt ad a HL-60 sejtek tranziens transzfekciójához.

A HL-60 sejtvonalhoz kapcsolódó videók

A HL-60 sejtekkel kapcsolatban nagyon korlátozott számú videóforrás áll rendelkezésre.

HL-60 sejtek passziválása: Ez a videó a HL-60 sejtek szubkultiválásának protokollját ismerteti.

Arra számítunk, hogy ez a cikk alapvető információkat nyújt a HL-60 sejtvonal tenyésztésével és fenntartásával kapcsolatban. Ezenkívül bővítheti ismereteit az e leukémiasejtek kutatásban való felhasználásának előnyeiről. Ha tervezi ennek a sejtvonalnak a használatát, rendeljen tőlünk.

HL-60 sejtvonal: GYIK a kutatók számára

Hivatkozások

Fleck, R., S. Romero-Steiner és M. Nahm, HL-60 sejtvonal használata a pneumococcus antitestek opsonikus kapacitásának mérésére. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
Fernando, I.S., et al., A Dendronephthya giganteából származó Stigmast-5-en-3-ol apoptotikus és antiproliferatív hatása a HL-60 humán leukémiás és MCF-7 humán emlőrákos sejtekre. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
Almajali, B., et al., Thymoquinone suppresses cell proliferation and enhances apoptosis of HL60 leukemia cells through re-expression of JAK/STAT negative regulators. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention (Ázsiai csendes-óceáni rákmegelőzési folyóirat): APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., A Brassica bioaktív vegyületek gyulladáscsökkentő potenciáljának elemzése HL-60 sejtekből származó humán makrofág-szerű sejtmodellben. Biomedicina és farmakoterápia, 2022. 149: p. 112804.
Wang, D., et al., Az ERK részt vesz a dimetil-szulfoxid által indukált HL-60 neutrofilszerű sejtek differenciálódásában és funkciójában, amelyek gyulladásos neutrofileket utánoznak. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-Leukémiás aktivitás a Brassica-ból származó bioaktív vegyületek HL-60 myeloid leukémiás sejtekben. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.