DU-145 sejtek - A kutató átfogó útmutatója
ADU-145 egy humán prosztata karcinóma sejtvonal, amelyet széles körben alkalmaznak az orvosbiológiai kutatásban. Ezek a sejtek felbecsülhetetlen értékű modellként szolgálnak a prosztatarák biológiájának tanulmányozásához, a gyógyszerek teszteléséhez és fejlesztéséhez. Emellett a kutatók a DU-145 sejteket a prosztatarák kialakulásának, növekedésének és progressziójának hátterében álló molekuláris mechanizmusok vizsgálatára is alkalmazzák.
Ez a cikk értékes betekintést nyújt a DU-145 prosztataráksejtekbe. Különösen a következőkre terjed ki:
- Általános információk és a DU-145 sejtvonal eredete
- A DU-145 sejtek tenyésztése
- DU-145 sejtvonal: A DU1545 DU15 DU15 celluloid: Előnyök és korlátok
- A DU-145 sejtek kutatási alkalmazásai
- A DU-145 sejteket tartalmazó kutatási publikációk
- A DU-145 sejtvonal forrásai: Jegyzőkönyvek, videók, és még sok más
1. Általános információk és a DU-145 sejtvonal eredete
Egy sejtvonal alapvető tulajdonságainak és eredetének megértése alapvető fontosságú, mielőtt elkezdenénk vele dolgozni. Ez a szakasz a DU-145 sejtvonal jellemzőinek és eredetének átfogó megértését biztosítja. Megismerheti: Mik azok a DU145 rákos sejtek? Milyen a DU145 sejtek morfológiája? Mi a különbség a PC-3 és a DU145 között?
- A DU-145 egy emberi prosztatarák sejtvonal, amelyet egy metasztatikus prosztatarákban szenvedő kaukázusi férfi (69 éves) agyából nyertek. Ezeket a sejteket először K.R. Stone és munkatársai helyezték letétbe 1978-ban.
- A PC-3 prosztataráksejtekhez hasonlóan a DU-145 is expresszál androgénreceptorokat. Amikor azonban ezeket a sejteket androgén-ligand kezelésnek vetik alá, nem mutatják az androgénreceptor-rezisztens gének aktivitását, így androgén-független sejteknek tekinthetők.
- A DU-145 sejtek epithelialis morfológiával rendelkeznek.
- A DU-145 sejtek hipotriploidok, és 64-es kromoszómaszámmal rendelkeznek. Számos marker kromoszómát mutatnak, mint például del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) és del (9) (p11).
PC-3 Vs DU145
Mindkét prosztatarákos sejtvonal androgénreceptor-független. Tumorigén és metasztatikus potenciáljuk tekintetében különböznek egymástól. Immunkompromittált egérbe injektálva a PC-3 sejtvonal erősen metasztatikus IV. fokozatú adenokarcinómát képez. Ezzel szemben a DU-145 sejtvonal közepes metasztatikus potenciállal rendelkező prosztatarákot fejleszt [1].
2. dU-145 sejtek tenyésztése
A DU-145 sejtvonalat széles körben használják a prosztatarákot kutató laboratóriumokban. A könnyű és hatékony tenyésztés megkönnyítése érdekében meg kell ismernie a következő kulcsfontosságú pontokat. Ez a szakasz a DU145 táptalajra, a megduplázódási időre, a sejttenyésztési körülményekre és a protokollokra vonatkozó információkat tartalmazza.
A DU-145 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
A populáció megduplázódási ideje: |
A DU-145 sejtek megduplázódási ideje 30 és 40 óra között mozog. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A DU-145 egy adherens sejtvonal. |
|
Ültetési sűrűség: |
A DU-145 sejteket 2 x104 sejt/cm2 ajánlott sejtsűrűséggel vetik be. Ennél a sűrűségnél a sejtek közel 4 nap alatt konfluens monoréteget képeznek. A sejtek beültetéséhez a sejteket 1 x foszfátpuffer sóoldattal mossuk, és Accutase passzázsoldattal inkubáljuk. Szobahőmérsékleten történő 8-10 perces inkubáció után a sejteket friss táptalajjal adjuk össze, és centrifugáljuk. Az összegyűjtött sejtpelletet óvatosan reszuszpendáljuk, és a sejteket új tenyésztőlombikokba öntjük a növekedéshez. |
|
Növesztőközeg: |
EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) tápközeg-kiegészítőkkel, azaz 10% magzati szarvasmarha-szérummal (FBS), 2 mM L-Glutaminnal, 2,2 g/L NaHCO3-mal és EBSS-szel. A táptalajt hetente 2-3 alkalommal megújítjuk. |
|
Növekedési feltételek: |
A DU-145 kultúrákat 37 °C-os, párásított inkubátorban tartjuk, 5%-os CO2-forrással. |
|
Tárolás: |
A DU-145 sejteket folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150°C alatti hőmérsékleten, elektromos fagyasztóban tároljuk a sejtek életképességének hosszabb távú fenntartása érdekében. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
CM-1 vagy CM-ACF fagyasztási közeg ajánlott a DU-145 prosztataráksejtekhez. A sejtek lefagyasztásához lassú fagyasztási módszert választunk, amely lehetővé teszi a hőmérséklet fokozatos, 1 °C-os csökkenését. Ez megakadályozza a sejtek sokkhatását, és segít megőrizni életképességüket. |
|
Kiolvasztási folyamat: |
A lefagyasztott DU-145 sejtes fiolákat 37 °C-os vízfürdőben 40-60 másodpercig gyorsan felolvasztjuk. Ezután a sejteket tenyésztőközeggel adjuk hozzá, és centrifugáljuk a fagyasztóközeg összetevőinek eltávolítása érdekében. A kinyert sejteket növekedési táptalajban reszuszpendáljuk, és a lombikba öntjük a növekedéshez. A fagyasztás helyreállítása közel 24 órát vesz igénybe. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A DU145 androgénreceptor-független sejtvonal tenyésztéséhez 1. biológiai biztonsági szintű beállítások szükségesek. |
3. dU-145 sejtvonal: Előnyök és korlátok
Más sejtvonalakhoz hasonlóan a DU-145 prosztatarákos sejtvonal is rendelkezik előnyökkel és hátrányokkal. Ezek a tulajdonságok segíthetnek eldönteni, hogy felhasználja-e a kutatásában. A DU-145 sejtek főbb előnyeit és hátrányait az alábbiakban említjük.
Előnyök
A DU-145 sejtek előnyei a következők:
|
Tumorigenitás |
A DU-145 egy agresszív tumorigén prosztatarákos sejtvonal, mérsékelt metasztatikus potenciállal. A DU145 xenograft modell kifejlesztésére használják immunhiányos egerekben a prosztatarák biológiájának, fejlődésének és növekedésének in vitro és in vivo tanulmányozására. |
|
Androgénreceptor-függetlenség |
A DU-145 prosztataráksejtek androgénreceptor-függetlenek. Nem támaszkodnak az androgénekre a növekedéshez, és nem mutatnak választ sejt- és molekuláris szinten, amikor androgénekkel kezelik őket. Ideális a hormonfüggetlen prosztatarák mechanizmusainak kutatására. |
Korlátozások
A DU-145 sejtvonal korlátai a következők:
|
In Vitro modell |
A DU-145 az áttétes prosztatakarcinóma in vitro sejtmodellje, így nem biztos, hogy teljes mértékben reprezentálja a primer prosztatadaganatok komplexitását. Továbbá nem biztos, hogy minden prosztatarák-típust és altípust leképez, olyan sajátos jellemzők miatt, mint például az androgénreceptor-függetlenség. |
4. a DU-145 sejtek kutatási alkalmazásai
A DU-145 prosztatarák sejtvonal kutatási alkalmazások széles skálájával rendelkezik. Itt néhány ígéretes alkalmazást sorolunk fel.
- Prosztatarák biológiája: A DU-145 releváns modell a prosztatarák biológiájának tanulmányozására. A kutatók ezeket a sejteket a rák kialakulását, progresszióját és metasztázisát irányító molekuláris mechanizmusok vizsgálatára használják. Ezenkívül a prosztatarákhoz gyakran társuló genetikai változásokat is vizsgálják. A 2021-ben végzett kutatások a DU-145 sejteket vizsgálták a hatékony diagnosztikai és terápiás következményekkel járó potenciális biomarkerek azonosítása érdekében. A tanulmány az aktin gamma 1 (ACTG1) mint potenciális prosztatarák biomarkert javasolta, mivel a MAPK/ERK útvonal aktiválásán keresztül elősegíti a rákos sejtek proliferációját és szabályozza az áttétképzést [2].
- Gyógyszer-szűrés és fejlesztés: A DU-145 prosztataráksejteket széles körben használják a potenciális rákellenes gyógyszerek citotoxicitásának és hatékonyságának tesztelésére. Ez segíti a kutatókat az új gyógyszerek azonosításában, a gyógyszerrezisztencia és a mögöttes molekuláris mechanizmusok megértésében. Egy 2022-ben végzett tanulmány egy gyantakeverék, a propolisz vagy méhragasztó citotoxikus hatását vizsgálta a PC-3 és DU-145 prosztatarákos sejtvonalakban. A tanulmány mindkét sejtvonalon kimutatta e természetes anyag növekedést gátló hatását, és javasolta rákellenes potenciálját [3]. Egy másik tanulmányt 2019-ben végeztek, amely egy természetes vegyület, a betain antiproliferatív hatását vizsgálta DU-145 prosztataráksejtekben. A kutatás kimutatta, hogy a betain antiproliferatív hatást fejt ki az oxidatív stressz által közvetített sejthalál és gyulladás fokozásával a DU-145 sejtekben [4].
5.dU-145 sejteket tartalmazó kutatási publikációk
Az alábbiakban a DU-145 sejtvonallal kapcsolatos kutatási publikációkat mutatjuk be.
A Biological Trace Element Research, 2020 című folyóiratban megjelent tanulmány azt javasolta, hogy a cink-szulfát (ZnSo4) apoptózis, morfológiai változások, oxidatív károsodás és gyulladás kiváltásán keresztül antiproliferatív hatást fejt ki a DU-145 sejtekben.
Ez a kutatási cikk a BMC Complementary Medicine and Therapies című folyóiratban jelent meg 2020-ban. Ez a tanulmány egy növény, az Annona muricata L. kéregkivonatának és bioaktív hatóanyagának, az annonacinnak a DU-145 sejtvonalban mutatott citotoxikus és antimetasztatikus potenciálját vizsgálta.
Az IUBMB Life (2019) című folyóiratban megjelent publikáció azt javasolta, hogy a hosszú nem kódoló RNS LOXL1-AS1 kölcsönhatása a miR-let-7a-5p-vel és az EGFR-hez kapcsolódó útvonallal szabályozza a DU-145 prosztataráksejtek doxorubicinrezisztenciáját.
Az Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) című szaklapban megjelent cikk szerint a Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) gén downregulációja a DU-145 sejtek pusztulását okozza és gátolja az epiteliális-mesenchymális átmenetet (EMT) a Pyk2/MKK7 útvonal aktiválásán keresztül.
A Journal of Food Biochemistry (2019) című folyóiratban megjelent tanulmány azt javasolta, hogy a Casticin, egy polimetoxiflavon, a Ras/Akt/NF-κB jelátviteli útvonalak szabályozásával gátolja a DU-145 sejtek migrációját és invázióját.
6. források a DU-145 sejtvonalhoz: A DU4545-11545: protokollok, videók és egyéb
A DU-145 prosztatarákos sejtvonalról számos online forrás áll rendelkezésre. Ez a szakasz néhány olyan forrást említ, amelyek elmagyarázzák e sejtek kezelését, karbantartását és transzfekciós protokollját:
- DU-145 transzfekció: A DU-145 sejtek transzfektálásának protokollját lépésről lépésre elsajátíthatja.
A DU-145 sejttenyésztési protokollt itt említjük.
- DU-145 sejtek szubkultiválása: Ez a link segít megtanulni a DU-145 sejtek szubkultúrázásának vagy szubkultiválásának protokollját.
- DU-145 sejtek: Ez a weboldal rengeteg hasznos információt tartalmaz a DU-145 sejtvonalról, beleértve a DU145 táptalajt, a szubkultúrázás protokollját, valamint a proliferatív és kriokonzervált kultúrák kezelését.
Hivatkozások
- Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS. Tudományos jelentések, 2018. 8(1): p. 5539.
- Xiao, L., et al., Az ACTG1 expressziójának elnémítása a prosztatarák epiteliális mesenchymális átmenetét indukálja a MAPK/ERK jelátviteli útvonalon keresztül. DNS és sejtbiológia, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
- Gogacz, M., et al., Hideg szeparációs módszerrel nyert propolisz kivonatok rákellenes hatása PC-3 és DU-145 prosztatarák sejtvonalakon. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
- Kar, F., et al., A betain elnyomja a sejtproliferációt az oxidatív stressz által közvetített apoptózis és a gyulladás fokozásával a DU-145 humán prosztatarák sejtvonalban. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.