DLD-1 sejtek: a DLD-1 sejtek alkalmazása és jelentősége a vastagbélrák kutatásában
A DLD-1 egy humán vastagbélrákos sejtvonal, amelyet gyakran alkalmaznak a rákkutatásban. Értékes eszköz a vastagbélrák különböző aspektusainak vizsgálatához, beleértve a tumor kialakulását, progresszióját, az alapul szolgáló molekuláris mechanizmusokat és a terápiás szerekre adott választ. Így a DLD-1 kiemelkedő szerepet játszik a betegség megértésében és a lehetséges kezelési stratégiák kidolgozásában.
- Növekedési tápközeg
- A DLD-1 sejtek tenyésztéséhez RPMI 1640 táptalajt használnak, kiegészítve 10% borjú szérummal (FBS), 2,1 mM stabil glutaminnal és 2,0 g/l NaHCO3-mal. A táptalajt hetente 2-3 alkalommal kell cserélni.
- Duplázódási idő
- A DLD-1 sejtek duplázódási ideje körülbelül 15 óra.
- Növekedési típus
- A DLD-1 egy adhezív humán vastagbélrákos sejtvonal. A sejtek monorétegekké növekednek.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — DLD-1 megrendelése
- A DLD-1 sejtek általános jellemzői és eredete
- A DLD-1 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- DLD-1 sejtvonal: Előnyök és korlátozások
- A DLD-1 sejtvonal kutatási alkalmazásai
- 5. A DLD-1 sejtekről szóló kutatási publikációk
- Források a DLD-1 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
- Gyakran ismételt kérdések
A DLD-1 sejtek általános jellemzői és eredete
Mielőtt egy kutató egy sejtvonalon kezd el dolgozni, elsőként annak eredetét és általános tulajdonságait veszi figyelembe. Ez a cikk a DLD-1 sejtvonal részletes bemutatását tartalmazza. A következő gyakran feltett kérdésekre ad választ: Mik a DLD-1 sejtek? Mi az a DLD-1 rákos sejtvonal? Melyek a DLD-1 sejtvonal mutációi? Mekkora egy DLD-1 sejt? Milyen a DLD-1 sejtek morfológiája?
- A DLD-1, egy vastagbélrákos sejtvonal, egy 67 éves, kolorektális adenokarcinómában szenvedő férfi páciens vastagbeléből származik. D.L. Dexter és munkatársai izolálták 1977 és 1979 között. Ez a sejtvonal ugyanabból a forrásból származik, mint a HCT-8, HCT-15 és HRT-18 sejtvonalak.
- A kolorektális rákokhoz hasonlóan a DLD-1 sejtek is mikroszatellit-instabilitási fenotípussal rendelkeznek [1].
- A DLD-1 mutációi között szerepel a KRAS, a P53, a BRAF, a BRCA1 és a BRCA2. A DLD-1 P53 státusza, a DLD-1 BRCA, a DLD-1 BRCA2 és a DLD-1 KRAS mutációja miatt ezek a sejtek ideálisnak tekinthetők a rákkutatásokhoz.
- Ezek a sejtek epitheliális jellegű morfológiával rendelkeznek.
- A DLD-1 sejtvonal mérete körülbelül 15 µm.
- A DLD-1 humán kolorektális ráksejtvonal pszeudodiploid kariotípussal rendelkezik. A sejtek körülbelül 86%-ának modális kromoszómaszáma 46. A sejtpopuláció 17,1%-ában azonban poliploidia is előfordulhat.
A DLD-1 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
Bármely sejtvonal tenyésztése előtt ismernie kell annak alapvető sejttenyésztési követelményeit. Ez a szakasz kiemeli azokat a fontos szempontokat, amelyeket meg kell ismernie, mielőtt megkezdené a munkát a DLD-1 sejtvonalon. Ide tartoznak: Mi a DLD-1 duplázódási ideje? Mi a DLD-1 tenyészközeg? Mi a DLD-1 sejtek beültetési sűrűsége? Hogyan tenyésztjük a DLD-1 sejteket?
A DLD-1 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A DLD-1 sejtvonal duplázódási ideje körülbelül 15 óra.
Adherens vagy szuszpenziós:
A DLD-1 egy adhezív humán vastagbélrák sejtvonal. A sejtek monorétegekké növekednek.
Beültetési sűrűség:
A DLD-1 sejteket 1–2 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel vetjük be. Az adhezív sejteket 1x foszfátpuffer-sóoldattal (PBS) mossuk, majd szobahőmérsékleten passzázsoló oldattal (Accutase) inkubáljuk. 8–10 perces inkubálás után a levált sejteket a tenyésztőközeghez adjuk, majd centrifugáljuk. A sejtpelletet ezután óvatosan újra szuszpendáljuk, és a sejteket növekedési közeget tartalmazó új tenyésztőedényekbe öntjük.
Növekedési tápközeg:
A DLD-1 sejtek tenyésztéséhez RPMI 1640-et használnak kiegészítőkkel, beleértve 10% borjú szérumot (FBS), 2,1 mM stabil glutamint és 2,0 g/l NaHCO3-t. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
A DLD-1 tenyészeteket 37 °C-os, párásított inkubátorban, 5% CO2-ellátással tartják.
Tárolás:
A DLD-1 sejteket folyékony nitrogén gőzfázisában vagy elektromos, rendkívül alacsony hőmérsékletű fagyasztóban (-150 °C alatti hőmérsékleten) tárolják.
Fagyasztási folyamat és táptalaj:
A DLD-1 sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztó tápközeg használható. Mindig lassú fagyasztási folyamatot ajánlunk, amely lehetővé teszi a hőmérséklet fokozatos, 1 °C-os csökkenését, így megelőzve a sejtek sokkját és megóvva életképességüket.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott sejteket 37 °C-ra előre beállított vízfürdőben 40–60 másodpercig olvasztják, amíg csak egy kis jégdarabka marad. Ezt követően a sejteket friss táptalajba helyezzük és centrifugáljuk. Ez a lépés szükséges a fagyasztó táptalaj komponenseinek eltávolításához a sejtekből. Az összegyűjtött sejteket növekedési táptalajban reszuszpendáljuk, majd a növekedéshez lombikba töltjük.
Biológiai biztonsági szint:
A DLD-1 sejtvonalat 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumokban tartják.
DLD-1 sejtvonal: Előnyök és korlátai
A cikk ezen szakaszában áttekintjük a DLD-1 vastagbélrákos sejtvonal előnyeit és korlátait.
Előnyök
A DLD-1 sejtvonal fő előnyei a következők:
Vastagbélrák-modell
A DLD-1 sejtek olyan mutációkat hordoznak, amelyek gyakran előfordulnak kolorektális rákos betegeknél, mint például a DLD-1 KRAS mutáció, a DLD-1 BRCA és a DLD-1 BRCA2. Ez a relevancia teszi őket klinikailag megfelelő sejtmodellé a betegség tanulmányozásához.
Tumorképző sejtvonal
A DLD-1 sejtek tumorigenikusak. Meztelen egerekbe injekciózva daganatokat okozhatnak. Ezért a kutatók ezeket a sejteket használják olyan xenograft tumor modellek kifejlesztésére, amelyek segítenek a tumor kialakulásának, fejlődésének és progressziójának in vivo vizsgálatában.
Korlátozások
A DLD-1 sejtekkel kapcsolatos korlátozások a következők:
Heterogenitás
A DLD-1 vastagbélrákos sejtpopulációk genetikai és fenotípusbeli heterogenitást mutatnak. Ez befolyásolhatja a kutatási eredmények általánosíthatóságát.
A DLD-1 sejtvonal kutatási alkalmazásai
A DLD-1 sejtvonal számos alkalmazási lehetőséget kínál a rákkutatásban. Ebben a szakaszban néhány kiemelkedő alkalmazást ismertetünk.
- Rákkutatás: A DLD-1 sejtek értékes in vitro modellként szolgálnak a vastagbélrák növekedésének, fejlődésének és progressziójának molekuláris mechanizmusainak megértéséhez. Ezenkívül génkifejeződés, jelátviteli útvonalak, valamint specifikus genetikai mutációk ráksejtek viselkedésére gyakorolt hatásának vizsgálatára is használják őket. A 2022-ben végzett kutatások megállapították, hogy a PI3K/Akt/YAP jelátviteli kaszkád szabályozza a DLD-1 vastagbélrákos sejtvonal migrációját és invázióját [2].
- Gyógyszerfejlesztés: A kutatók a DLD-1 sejtvonalat használják a rákellenes gyógyszerek hatékonyságának tesztelésére és a vastagbélrák kezelésében rejlő potenciáljuk értékelésére. Ez elősegíti a gyógyszerfejlesztést és a betegség hatékony leküzdését. Egy 2022-ben végzett tanulmány a DLD-1 rákos sejtvonalat használta, és a kémiailag szintetizált vegyületek, a szilícium-ftalocianinok rákellenes hatását vizsgálta. A tanulmány eredményei arra utaltak, hogy ezek a vegyületek hatékony rákellenes szerek lehetnek [3]. Érdekes módon egy másik kutatás a DLD-1 sejtek felhasználásával fedezte fel egy probiotikumokból származó P8 fehérje rákellenes potenciálját [4].
5. A DLD-1 sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
Ez a szakasz néhány érdekes és gyakran hivatkozott publikációt mutat be, amelyek a DLD-1 vastagbélrákos sejtvonalat tárgyalják.
Ez a publikáció a Journal of Biologically Active Products from Nature (2022) című folyóiratban jelent meg. A tanulmány megállapította, hogy a diosmin, egy flavonoid, sejthalált váltott ki a DLD-1 sejtekben, és sejtciklus-leállást is okozott; így potenciális rákellenes szer lehet.
A bromelain hatékonyan gátolja a Kras-mutáns vastagbélrákot a ferroptózis stimulálásával
Az Animal Cells and Systems (2018) folyóiratban megjelent tanulmány szerint a bromelain enzim gátolja a DLD-1 KRAS mutációt és erős citotoxikus hatást fejt ki.
Ez a kutatási cikk 2019-ben jelent meg az „Environmental Toxicology” folyóiratban. A tanulmány egy természetes vegyület, a bergapten tumorellenes hatásait vizsgálta egy DLD-1 kolorektális sejtvonal felhasználásával.
A Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) folyóiratban megjelent tanulmány megállapította, hogy a kurkumin/vas-oxid nanokompozitok rendkívül hatékonyak a DLD-1 vastagbélrákos sejtek ellen.
Ez a kutatási cikk 2020-ban jelent meg a Turkish Journal of Biology című folyóiratban. A tanulmány azt állította, hogy egy természetes termék, az epibrassinolid által közvetített AKT-aktiválás a DLD-1 sejtekben stimulálja a poliaminokkal kapcsolatos autofágiát.
Források a DLD-1 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
Az alábbiakban néhány forrás található a DLD-1 sejtekkel kapcsolatban:
- DLD-1 transzfekció: Ez a videó bemutató átfogó útmutató a DLD-1 in vitro transzfekciós protokolljáról.
- DLD-1 sejtek: Ez a kutatási cikk röviden leírja a DLD-1 sejtkultúra követelményeit, beleértve a táptalajt és a tenyésztési feltételeket. Emellett segíthet megismerni a DLD-1 sejtekhez használt transzfekciós protokollt.
Az alábbi linkek a DLD-1, az emberi eredetű vastagbélrákos sejtek tenyésztésének protokollját tartalmazzák.
- DLD-1 sejtvonal: Ez a weboldal alapvető információkat nyújt a DLD-1 sejtvonalról. Segítséget nyújt a különböző DLD-1 sejtkultúra-protokollok megismerésében, beleértve az alkultúrákat, valamint a kriokonzervált és proliferáló kultúrák kezelését.
Hivatkozások
- Gavrilas, L.I. és munkatársai, Az apoptózist elősegítő gének mint új célpontok a resveratrol és a kurkumin egyedi és kombinált kezeléseihez a vastagbélrákban. Food & function, 2019. 10(6): 3717–3726. o.
- Takeda, T. és munkatársai, A PI3K/Akt/YAP jelátvitel elősegíti a DLD-1 kolorektális ráksejtek migrációját és invázióját. Oncology Letters, 2022. 23(4): 1–9. o.
- Farajzadeh, N. és társai, Új szilícium-ftalocianinok rákellenes hatása a kolorektális adenokarcinóma sejtvonal (DLD-1) ellen. New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): 19863–19873. o.
- An, B.C. és társai, A probiotikumokból származó P8 fehérje rákellenes szerepe a DLD-1 kolorektális rákos sejtvonalban. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): 9857. o.