DLD-1 sejtek: DLD-1 sejtek alkalmazása és betekintés a vastagbélrák kutatásában
ADLD-1 egy humán kolorektális karcinóma sejtvonal, amelyet a rákkutatásban gyakran alkalmaznak. Értékes eszköz a vastagbélrák különböző aspektusainak vizsgálatára, beleértve a tumor kialakulását, progresszióját, a mögöttes molekuláris mechanizmusokat és a terápiás szerekre adott választ. Így a DLD-1 kiválóan alkalmas a betegség megértésére és a lehetséges kezelési stratégiák kidolgozására.
Ez a cikk a DLD-1 sejtvonalról nyújt fontos információkat, amelyeket tudnia kell, mielőtt vele dolgozna. Kitér a következőkre:
- A DLD-1 sejtek általános jellemzői és eredete
- A DLD-1 sejtvonal tenyésztési információi
- DLD-1 sejtvonal: A DLD DLD-1D-1: Előnyök és korlátozások: Előnyök és korlátozások
- A DLD-1 sejtvonal kutatási alkalmazásai
- A DLD-1 sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
- A DLD-1 sejtvonal forrásai: DDLD-1D-1: Protokollok, videók és egyéb: protokollok, videók és egyéb
1. A DLD-1 sejtek általános jellemzői és eredete
Mielőtt egy sejtvonallal dolgozna, a kutató első szempontja annak eredete és általános jellemzői. Ez a cikkrész a DLD-1 sejtvonal részletes bemutatása. A következő gyakran felmerülő kérdésekre tér ki: Mik azok a DLD-1 sejtek? Mi az a DLD-1 rákos sejtvonal? Melyek a DLD-1 sejtvonal mutációi? Mekkora egy DLD-1 sejt mérete? Milyen a DLD-1 sejtek morfológiája?
- A DLD-1, egy vastagbélrákos sejtvonal, egy 67 éves, vastagbél adenokarcinómában szenvedő férfi beteg vastagbeléből származik. D.L. Dexter és munkatársai izolálták 1977-1979 folyamán. Ez a sejtvonal azonos eredetű a HCT-8, HCT-15 és HRT-18 sejtvonalakkal.
- A kolorektális rákokhoz hasonlóan a DLD-1 sejtek is mikroszatellita-instabilitás fenotípussal rendelkeznek [1].
- A DLD-1 mutációi közé tartozik a KRAS, a P53, a BRAF, a BRCA1 és a BRCA2. A DLD-1 P53 státusz, a DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 és DLD-1 KRAS mutáció miatt ezek a sejtek ideálisnak tekinthetők a rákos vizsgálatokhoz.
- Ezek a sejtek epithelszerű morfológiával rendelkeznek.
- A DLD-1 sejtvonal mérete körülbelül 15 µm.
- A DLD-1 humán kolorektális rákos sejtvonal pszeudodiploid kariotípussal rendelkezik. A sejtek mintegy 86%-a 46-os kromoszómaszámmal rendelkezik. A sejtpopuláció 17,1%-ában azonban poliploidia is előfordulhat.
2.a DLD-1 sejtvonal tenyésztési információi
Bármely sejtvonal tenyésztése előtt ismernie kell annak alapvető sejttenyésztési követelményeit. Ez a szakasz kiemeli azokat a fontos pontokat, amelyeket meg kell ismernie, mielőtt elkezdené a munkát a DLD-1 sejtvonallal. Ez magában foglalja a következőket: Mi a DLD-1 megduplázódási ideje? Milyen a DLD-1 táptalaj? Mi a DLD-1 sejtek vetési sűrűsége? Hogyan kell a DLD-1 sejteket tenyészteni?
A DLD-1 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A DLD-1 sejtek megduplázódási ideje körülbelül 15 óra. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A DLD-1 egy adherens humán vastagbélrákos sejtvonal. A sejtek monorétegben nőnek. |
|
Ültetési sűrűség: |
A DLD-1 sejteket 1-2 x104 sejt/cm2 sűrűségben kell elültetni. Az adherens sejteket 1x foszfátpuffer sóoldattal (PBS) mossuk, és passzázsoldattal (Accutase) inkubáljuk szobahőmérsékleten. A 8-10 perces inkubáció után a levált sejteket a táptalajhoz adjuk és centrifugáljuk. A sejtpelletet ezután óvatosan reszuszpendáljuk, és a sejteket a növekedési tápfolyadékot tartalmazó új tenyésztőedényekbe öntjük. |
|
Növesztőközeg: |
A DLD-1 sejtek tenyésztéséhez RPMI 1640 tápközeg-kiegészítőket használunk, beleértve 10% magzati szarvasmarha szérum FBS-t, 2,1 mM stabil glutamint és 2,0 g/L NaHCO3-t. A táptalajt hetente 2-3 alkalommal kell cserélni. |
|
Növekedési feltételek: |
A DLD-1 tenyészeteket 37 °C-os párásított inkubátorban tartjuk, 5%-os CO2-ellátás mellett. |
|
Tárolás: |
A DLD-1 sejteket folyékony nitrogén gőzfázisában vagy elektromos ultraalacsony hőmérsékletű fagyasztóban (-150°C alatti hőmérsékleten) tárolják. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A DLD-1 sejtek lefagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztási közeg használható. Mindig lassú fagyasztási folyamat ajánlott, amely lehetővé teszi a hőmérséklet fokozatos, 1°C-os csökkenését, így megakadályozza a sejtek sokkhatását és védi életképességüket. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott sejteket 37 °C-os hőmérsékletre előzetesen beállított vízfürdőben 40-60 másodpercig olvasztjuk, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Ezt követően a sejteket friss tápfolyadékhoz adjuk és centrifugáljuk. Erre a lépésre azért van szükség, hogy a fagyasztási közeg összetevőit eltávolítsuk a sejtekből. Az összegyűjtött sejteket újra szuszpendáljuk a növekedési táptalajban, és a lombikba adagoljuk a növekedéshez. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A DLD-1 sejtvonalat az 1-es biológiai biztonsági szintű laboratóriumokban tartják fenn. |
3.dLD-1 sejtvonal: Előnyök és korlátok
A cikk ezen részében a DLD-1 vastagbélrákos sejtvonal előnyeit és korlátait tekintjük át.
Előnyök
A DLD-1 sejtvonal fő előnyei a következők:
|
Vastagbélrák modell |
A DLD-1 sejtek rendelkeznek a vastagbélrákos betegeknél gyakran előforduló mutációkkal, mint például a DLD-1 KRAS mutáció, a DLD-1 BRCA és a DLD-1 BRCA2. Ez a relevancia teszi őket klinikailag megfelelő sejtmodellé e betegség tanulmányozására. |
|
Tumorigén sejtvonal |
A DLD-1 sejtek tumorgenikusak. Nude egerekbe injektálva tumorokat képesek okozni. Ezért a kutatók ezeket a sejteket xenograft tumormodellek kifejlesztésére használják, amelyek segítségével in vivo vizsgálható a daganatképződés, -fejlődés és -progresszió. |
Korlátozások
A DLD-1 sejtekkel kapcsolatos korlátok a következők:
|
Heterogenitás |
A DLD-1 vastagbélrákos sejtpopulációk genetikai és fenotípusos heterogenitást mutatnak. Ez befolyásolhatja a kutatási eredmények általánosíthatóságát. |
4.a DLD-1 sejtvonal kutatási alkalmazásai
A DLD-1 sejtvonal számos alkalmazást kínál a rákkutatásban. Ebben a szakaszban néhány kiemelkedő alkalmazást tárgyalunk.
- Rákkutatás: A DLD-1 sejtek értékes in vitro modellként szolgálnak a vastagbélrák növekedésének, fejlődésének és progressziójának hátterében álló molekuláris mechanizmusok megértéséhez. Ezenkívül a génexpresszió, a jelátviteli útvonalak és a specifikus genetikai mutációk rákos sejtek viselkedésére gyakorolt hatásának tanulmányozására is felhasználhatók. A 2022-ben végzett kutatások megfigyelték, hogy a PI3K/Akt/YAP jelátviteli kaszkád szabályozza a DLD-1 kolorektális rákos sejtvonal migrációját és invázióját [2].
- Gyógyszerfejlesztés: A kutatók a DLD-1 sejtvonalat alkalmazzák a rákellenes gyógyszerek hatékonyságának tesztelésére és a vastagbélrák kezelésében rejlő lehetőségeik értékelésére. Ez segíti a gyógyszerfejlesztést és a betegség elleni hatékony küzdelmet. Egy 2022-ben végzett tanulmány a DLD-1 rákos sejtvonalat használta, és a szilícium-ftalocianinok, kémiailag szintetizált vegyületek rákellenes hatását vizsgálta. A vizsgálat eredményei arra utaltak, hogy ezek a vegyületek erős rákellenes szerek [3]. Érdekes módon egy másik kutatás egy probiotikumból származó P8 fehérje rákellenes potenciálját állapította meg DLD-1 sejtek felhasználásával [4].
5.dLD-1 sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
Ez a szakasz néhány érdekes és gyakran idézett publikációt emel ki, amelyekben a DLD-1 vastagbélrákos sejtvonal szerepel.
Ez a publikáció a Journal of Biologically Active Products from Nature (2022) című folyóiratban jelent meg. A tanulmány megállapította, hogy a diozmin, egy flavonoid, sejtpusztulást indukált a DLD-1 sejtekben, és sejtciklus-megállást is okozott; így potenciális rákellenes szer lehet.
A bromelain hatékonyan elnyomja a Kras-mutáns vastagbélrákot a ferroptózis serkentésével
Az Animal Cells and Systems (2018) című szaklapban megjelent tanulmány azt javasolta, hogy a bromelain, egy enzim, elnyomja a DLD-1 KRAS-mutációt és erős citotoxikus hatást fejt ki.
Ez a kutatási cikk 2019-ben jelent meg az "Environmental Toxicology" folyóiratban. A tanulmány egy természetes vegyület, a Bergapten daganatellenes hatását vizsgálta egy DLD-1 corectális sejtvonal segítségével.
A Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) című folyóiratban megjelent tanulmány szerint a kurkumin/vas-oxid nanokompozitok rendkívül hatékonyak a DLD-1 vastagbélráksejtekkel szemben.
Ez a kutatási cikk 2020-ban jelent meg a Turkish Journal of Biology című folyóiratban. A tanulmány azt javasolta, hogy egy természetes termék, az epibrassinolid által közvetített AKT aktiválása a DLD-1 sejtekben serkenti a poliaminokkal kapcsolatos autofágiát.
6.a DLD-1 sejtvonalra vonatkozó források: DDL-DD-1D-1: Protokollok, videók és egyéb anyagok: Protokollok, videók és egyéb
Az alábbiakban néhány forrás található a DLD-1 sejtekkel kapcsolatban:
- DLD-1 transzfekció: Ez a videós bemutató átfogó útmutató a DLD-1 in vitro transzfekciós protokollról.
- DLD-1 sejtek: Ez a kutatási dokumentum röviden ismerteti a DLD-1 sejtkultúra követelményeit, beleértve a médiumokat és a tenyésztési feltételeket. Emellett segíthet megismerni a DLD-1 sejteknél használt transzfekciós protokollt.
A következő linkek tartalmazzák a DLD-1, humán eredetű vastagbélráksejtek tenyésztésének protokollját.
- DLD-1 sejtvonal: Ez a weboldal alapvető információkat nyújt a DLD-1 sejtvonalról. Segít megismerni a különböző DLD-1 sejttenyésztési protokollokat, beleértve a szubkultúrázást és a kriokonzervált és a proliferáló kultúrák kezelését.
Hivatkozások
- Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotikus gének mint új célpontok a resveratrol és a kurkumin egyedi és kombinatorikus kezeléséhez vastagbélrákban. Élelmiszer és funkció, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., A PI3K/Akt/YAP jelátvitel elősegíti aDLD-1vastagbélráksejtek migrációját és invázióját. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Új szilícium-ftalocianinek rákellenes aktivitása a vastagbél adenokarcinóma sejtvonallal (DLD-1) szemben. New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C., et al., A probiotikumból származó P8 fehérje rákellenes szerepe a DLD-1 vastagbélrák sejtvonalban. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.