BEAS-2B sejtek – A BEAS-2B sejtek a légúti betegségek kutatásában: átfogó útmutató
A BEAS-2B egy immortalisált, nem tumorogén emberi tüdőepiteliális sejtvonal. Széles körben használt in vitro modell a tüdősejtek különböző rákkeltő és toxikus anyagokra adott reakciójának vizsgálatához. Ezenkívül értékes kutatási eszköz különböző légúti fertőzések és betegségek, például a COVID-19 és a tüdőrák tanulmányozásához.
- Növekedési tápközeg
- A BEAS-2B tüdősejtvonal tenyésztéséhez 10% borjúszérumot tartalmazó BEGM (bronchiális epiteliális sejt tenyésztőtáp) táptalajt használnak. A táptalajt 2–3 naponta cserélni kell.
- Duplázódási idő
- A BEAS-2B populáció duplázódási ideje körülbelül 26 óra.
- Növekedési típus
- A BEAS-2B egy epitheliumszerű adhezív sejtvonal.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — BEAS-2B megrendelése
Ebben a cikkben a BEAS-2B tüdősejtvonal szinte minden aspektusát megvizsgáljuk, beleértve eredetét, a sejtkultúrával kapcsolatos információkat, előnyeit, hátrányait és kutatási alkalmazásait. Különösen a következőket fogjuk áttekinteni:
- A BEAS-2B sejtek eredete és általános jellemzői
- BEAS-2B sejtvonal: tenyésztési információk
- A BEAS-2B sejtek előnyei és hátrányai
- A BEAS-2B sejtvonal alkalmazásai a kutatásban
- BEAS-2B sejtek: Kutatási publikációk
- Sejtkultúra-protokollok
1. A BEAS-2B sejtek eredete és általános jellemzői
A sejtvonalaknál az első dolog, amit meg kell vizsgálni, azok eredete és általános jellemzői. Itt megismerheti a BEAS-2B humán bronchiális epiteliális sejtek legfontosabb jellemzőit és eredetét. A következőket fogja tanulmányozni: Mi a BEAS-2B tüdősejtvonal? Milyen típusú sejtek a BEAS-2B sejtek? Mi a BEAS-2B sejtek eredete?
- A BEAS-2B bronchiális epitheliális sejtvonalat 1988-ban Curtis C. Harris csoportja fejlesztette ki nem rákos emberi tüdőszövetből [1].
- A BEAS-2B sejtek epithelium-szerű morfológiával rendelkeznek.
HBEpC kontra BEAS-2B
A HBEpC emberi bronchiális epitheliális primer sejtek. A BEAS-2B-hez hasonlóan ezek is normális emberi bronchiális epitheliális sejtek. Azonban élettartamuk korlátozott a halhatatlanná tett BEAS-2B-hez képest. Mindkét sejtvonal felhasználható a pulmonális biológia, a toxikológia és a betegségmodellezés tanulmányozására.
BEAS-2B sejtvonal: Tenyésztési információk
A sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk megkönnyíthetik a munkát. Ebben a cikkben megismerheti a BEAS-2B tüdősejtvonal tenyésztésének alapjait. Különösen a következőket fogjuk megtudni: Mennyi a BEAS-2B sejtek duplázódási ideje? Mi a BEAS-2B táptalaj? A BEAS-2B sejtvonal adhezív? Hogyan tenyésztik a BEAS-2B sejteket?
A BEAS-2B sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A BEAS-2B populáció duplázódási ideje körülbelül 26 óra.
Adherens vagy szuszpenziós:
A BEAS-2B egy hámsejtszerű adhezív sejtvonal.
Sejtsűrűség:
A BEAS-2B sejtvonalhoz ajánlott sejtsűrűség 1–2 × 104 sejt/cm2. Az adhezív BEAS-2B sejteket foszfátpuffer-sóoldattal öblítik, majd szobahőmérsékleten néhány percig Accutase-szal inkubálják. A sejtek szétválasztása után friss táptalajt adunk hozzá, és a sejteket centrifugálással gyűjtjük össze. A begyűjtött sejteket óvatosan reszuszpendáljuk, és a növekedéshez új lombikba öntjük.
Növekedési tápközeg:
A BEAS-2B tüdősejtvonal tenyésztéséhez 10% borjú szérumot tartalmazó BEGM (bronchiális epiteliális sejt tenyésztő tápközeg) tápközeget használnak. A tápközeget 2–3 naponta cserélni kell.
Növekedési feltételek:
A BEAS-2B tenyészetet 37 °C-on, párásított inkubátorban, folyamatos 5%-os CO2-ellátással tartjuk.
Tárolás:
A fagyasztott BEAS-2B sejtfiolákat folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150 °C alatti hőmérsékletű elektromos fagyasztóban lehet tárolni.
Fagyasztási folyamat és táptalaj:
A BEAS-2B tüdősejtvonal fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztóközeget használnak. A sejtek életképességének megőrzése érdekében a fagyasztás során a hőmérséklet percenkénti csökkenése legfeljebb 1 °C lehet. Ezt a módszert lassú fagyasztásnak nevezik.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott vagy krioprezervált BEAS-2B tenyészeteket 37 °C-os, antimikrobiális szert tartalmazó vízfürdőben 40–60 másodpercig felolvasztják. Ezt követően a sejteket táptalajjal keverik össze, és közvetlenül új lombikokban tenyészthetik, vagy centrifugálhatják, hogy eltávolítsák a fagyasztó táptalaj komponenseit. Ezután az összegyűjtött sejteket újra szuszpendálják és tenyésztik. Az előbbi esetben a fagyasztó táptalajt 24 óra elteltével eltávolítják.
Biológiai biztonsági szint:
A BEAS-2B tenyészetek kezeléséhez 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumok szükségesek.
A BEAS-2B sejtek előnyei és hátrányai
Más sejtvonalakhoz hasonlóan a BEAS-2B sejteknek is vannak előnyeik és hátrányaik. Ezek közül néhányat az alábbiakban ismertetünk.
Előnyök
A BEAS-2B sejtvonal előnyei a következők:
Halhatatlan sejtvonal
A BEAS-2B humán bronchiális epiteliális sejtvonal halhatatlanná vált. Ezért öregedés nélkül folyamatosan növekszik. A BEAS-2B sejtek ezen tulajdonsága miatt nincs szükség az élettartamuk rövidebb elsődleges humán tüdőepiteliális sejtek ismételt kivonására.
Könnyen tenyészthető
A BEAS-2B tenyészetek könnyen fenntarthatók. A sejtek standard tenyésztési körülmények között könnyedén növekednek és szaporodnak. Nincsenek bonyolult vagy szigorú sejttenyésztési követelmények.
Emberi eredet
A BEAS-2B sejtvonal emberi eredetű és releváns. Így ideális in vitro modell az emberi légúti hámsejtek reakcióinak, viselkedésének és folyamataiknak a tanulmányozására.
Hátrányok
A BEAS-2B tüdősejtvonalhoz kapcsolódó hátrányok a következők:
Transzformált emberi tüdőepiteliális sejtek
A BEAS-2B sejteket Ad12-SV40 2B vírussal transzformálták, ami megváltoztathatja viselkedésüket és reakcióikat az eredeti, emberi tüdőszövetből származó hörgőhámsejtekhez képest.
A BEAS-2B sejtvonal alkalmazásai a kutatásban
A BEAS-2B sejtvonal számos alkalmazási lehetőséget kínál az orvostudományi kutatásban. A BEAS-2B sejtek néhány gyakori alkalmazási területe:
- Toxikológia: A BEAS-2B sejteket gyakran használják különböző toxinok, környezeti szennyező anyagok és vegyi anyagok genotoxicitásának és citotoxicitásának vizsgálatára. A kutatók ezt a bronchiális epiteliális sejtvonalat alkalmazzák ezen anyagok tüdőegészségre gyakorolt káros hatásainak értékelésére. Emellett a mögöttes molekuláris mechanizmusokat is tanulmányozzák. Például egy 2021-ben végzett tanulmány a kadmiumfém toxicitását értékelte a BEAS-2B sejtvonalban. A kutatási eredmények kimutatták, hogy a kadmium a MAPK jelátviteli út modulációján keresztül sejthalált és mitokondriális károsodást okozott a BEAS-2B tüdősejtvonalban [2]. Egy másik tanulmány a BEAS-2B sejtvonalat használta az oxidatív stressz alatt lévő cink-oxid nanorészecskék toxicitásának értékelésére [3].
- Légúti betegségek modellezése: A BEAS-2B sejtvonal kiváló kutatási eszköz és in vitro modell olyan légúti betegségek tanulmányozásához, mint a krónikus obstruktív tüdőbetegség (COPD), az asztma, a tüdőrák és a vírusfertőzések, például a SARS-CoV-2. A kutatók gyakran indukálnak betegséghez kapcsolódó állapotokat a BEAS-2B sejtvonalban, és tanulmányozzák az azok mögött meghúzódó sejt- és molekuláris mechanizmusokat. Ez segít a potenciális gyógyszercélpontok azonosításában és a személyre szabott terápiák kifejlesztésében. Egy 2022-ben végzett kutatás a BEAS-2B sejtvonalat használta, és az ösztrogén és receptorainak szerepét vizsgálta a SARS-CoV-2 fertőzésben. Az eredmények kimutatták, hogy a GPER1 ösztrogénreceptor magasabb expressziója csökkenti a BEAS-2B SARS-CoV-2 vírusterhelését. Ezért szerepet játszhat a SARS-CoV-2 vírusfertőzésben vagy replikációjában [4].
5. BEAS-2B sejtek: Kutatási publikációk
Az alábbiakban bemutatunk néhány érdekes és leggyakrabban hivatkozott kutatási tanulmányt, amelyekben BEAS-2B sejtek szerepelnek.
A grafén toxicitása normál emberi tüdősejtekben (BEAS-2B)
Ez a tanulmány 2011-ben jelent meg a Journal of Biomedical Nanotechnology című folyóiratban. A kutatás szerint a grafit-oxid apoptózist és citotoxicitást vált ki a normál hörgőhámsejt-vonalban (BEAS-2B).
Ez a kutatási cikk a Journal of Microbiology and Biotechnology folyóiratban jelent meg (2014). A tanulmány a naringenin, egy flavonoid terápiás potenciálját vizsgálta a BEAS-2B sejtvonalban. Az eredmények arra utalnak, hogy a naringenin védi a BEAS-2B tüdősejteket a paraquat által kiváltott toxicitás vagy oxidatív károsodás ellen.
Ez a tanulmány az Inhalation Toxicology (2011) folyóiratban jelent meg. Ebben a kutatók in vitro körülmények között értékelték az amorf szilícium-dioxid bevonattal ellátott mágneses nanorészecskék toxicitási hatását a BEAS-2B sejtvonalban.
A Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) folyóiratban megjelent cikk szerint az ursodezoxikolsav gátolhatja a légúti hámsejtek rendellenes vándorlását, és megelőzheti a SARS-CoV-2 spike fehérje és az ACE-2 kölcsönhatása által okozott károsodást. Így segíthet a hám bazális rétegének helyreállításában.
A radon hatása a miR-34a által kiváltott apoptózisra emberi hörgőhám BEAS-2B sejtekben
Ezt a tanulmányt 2019-ben publikálták a Journal of Toxicology and Environmental Health folyóiratban. A kutatási eredmények szerint a radonnak való krónikus kitettség elősegítheti a karcinogenezist az emberi hörgőhámsejtekben (BEAS-2B) a mikroRNS-34a aktiválása révén.
Sejtkultúra-protokollok
A BEAS-2B sejtek sejtkultúra-protokollját itt találja.
- BEAS-2B szubkultúra: Ez a dokumentum segít megismerni a BEAS-2B táptalajokat és a szubkultúra-eljárásokat.
- BEAS-2B sejtvonal: Ez a weboldal tartalmazza az összes alapvető információt, amelyre szüksége van a BEAS-2B sejtvonal használatának megkezdéséhez, beleértve a táptalajokat és a szaporodó és kriokonzervált tenyészetek kezelésére vonatkozó protokollokat.
Hivatkozások
- Han, X. et al., Az emberi tüdőepiteliális BEAS-2B sejtek mesenchimális őssejtek jellemzőit mutatják. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X. és munkatársai: A kadmium a MAPK jelátviteli útvonalon keresztül apoptózist és mitokondriális károsodást okozott a BEAS-2B sejtekben. Chemosphere, 2021. 263: 128346. o.
- Heng, B.C. és munkatársai: Az oxidatív stressz fokozza a cink-oxid (ZnO) nanorészecskék emberi hörgőhámsejtekre (BEAS-2B) gyakorolt toxikus hatását. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): 1762–1766. o.
- Costa, A.J. és munkatársai, Az ösztrogénreceptor GPER1 túltermelése és a G1-kezelés csökkenti a SARS-CoV-2 fertőzést a BEAS-2B hörgősejtekben. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: 111775. o.