BEAS-2B sejtek - BEAS-2B sejtek a légúti betegségek kutatásában: A Comprehensive Guide: A Comprehensive Guide
ABEAS-2B egy immortalizált és nem tumorigén humán tüdőepithel sejtvonal. Ez egy széles körben használt in vitro modell a tüdősejtek különböző karcinogénekre és toxikus anyagokra adott válaszainak tanulmányozására. Ezenkívül értékes kutatási eszköz a különböző légúti fertőzések és betegségek, például a COVID-19 és a tüdőkarcinóma tanulmányozására.
Ebben a cikkben a BEAS-2B tüdősejtvonal szinte minden aspektusát tárgyaljuk, beleértve az eredetét, a sejtkultúrával kapcsolatos információkat, az előnyeit, hátrányait és a kutatásban való alkalmazását. Különösen a következőket fogjuk végigvenni:
- A BEAS-2B sejtek eredete és általános jellemzői
- BEAS-2B sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk
- A BEAS-2B sejtek előnyei és hátrányai
- A BEAS-2B sejtvonal alkalmazása a kutatásban
- BEAS-2B sejtek: Kutatási publikációk
- Sejttenyésztési protokollok
1. A BEAS-2B sejtek eredete és általános jellemzői
Az első dolog, amit egy sejtvonalon keresünk, az a származás és az általános jellemzők. Az alábbiakban megismerheti a BEAS-2B humán hörgőhámsejtek kiemelkedő jellemzőit és eredetét. Tanulmányozni fogod: Mi a BEAS-2B tüdősejtvonal? Milyen típusú sejtekből áll a Beas 2B? Mi a BEAS-2B sejtek eredete?
- A BEAS-2B hörgőhámsejtvonalat nem rákos emberi tüdőszövetből fejlesztette ki 1988-ban Curtis C. Harris csoportja [1].
- A BEAS-2B sejtek epithelszerű morfológiával rendelkeznek.
HBEpC Vs BEAS-2B
A HBEpC humán hörgőhám primer sejtek. A BEAS-2B-hez hasonlóan normális humán hörgőhámsejtek. Az immortalizált BEAS-2B-hez képest azonban korlátozott élettartamúak. Mindkét sejtvonal felhasználható a tüdőbiológia, a toxikológia és a betegségmodellezés tanulmányozására.
2.bEAS-2B sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk
A sejtvonal tenyésztési információi megkönnyíthetik a vele való munkát. Ebben a cikkrészben a BEAS-2B tüdősejtvonal tenyésztésének minden alapját megtudhatja. Nevezetesen, tudni fogjuk: Mennyi a BEAS-2B megduplázódási ideje? Milyen a BEAS-2B táptalaj? Adherens-e a BEAS-2B sejtvonal? Hogyan kell a BEAS-2B sejteket tenyészteni?
A BEAS-2B sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A BEAS-2B populáció megduplázódási ideje körülbelül 26 óra. |
|
Adherens vagy szuszpenzióban: |
A BEAS-2B egy epithelszerű adherens sejtvonal. |
|
Sejtsűrűség: |
A BEAS-2B sejtvonalhoz ajánlott sejtsűrűség 1-2 ×104 sejt/cm2. Az adherens BEAS-2B sejteket foszfátpuffer sóoldattal öblítjük, és szobahőmérsékleten néhány percig Accutase-zal inkubáljuk. A sejtek disszociációja után friss médiumot adunk hozzá, és a sejteket centrifugálással összegyűjtjük. Az összegyűjtött sejteket óvatosan reszuszpendáljuk és a növekedéshez új lombikba öntjük. |
|
Növesztőközeg: |
A BEAS-2B tüdősejtvonal tenyésztéséhez 10% magzati szarvasmarha-szérumot tartalmazó BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) médiumot használunk. A táptalajt 2-3 naponta kell cserélni. |
|
Növekedési feltételek: |
A BEAS-2B tenyészetet 37°C-on tartjuk párásított inkubátorban, folyamatos 5%-os CO2-ellátás mellett. |
|
Tárolás: |
A lefagyasztott BEAS-2B sejtampullákat folyékony nitrogén gőzfázisában vagy elektromos fagyasztóban -150°C alatti hőmérsékleten lehet tárolni. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A BEAS-2B tüdősejtvonal fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF fagyasztási közeget használunk. A sejtek fagyasztása úgy történik, hogy a sejtek életképességének védelme érdekében percenként csak 1°C-os hőmérsékletcsökkenést engedünk meg. Ezt a fajta módszert lassú fagyasztásnak nevezik. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott vagy kriokonzervált BEAS-2B tenyészeteket 37 °C-os, antimikrobiális hatóanyagot tartalmazó vízfürdőben 40-60 másodpercig felolvasztjuk. Ezt követően a sejtekhez médiumot adunk, és közvetlenül új lombikokban tenyésztjük, vagy centrifugáljuk a fagyasztó médium összetevőinek eltávolítása érdekében. Ezután az összegyűjtött sejteket reszuszpendáljuk és tenyésztjük. Az előbbi esetben a fagyasztóközeget 24 óra elteltével eltávolítják. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A BEAS-2B kultúrák kezeléséhez 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumokra van szükség. |
3.a BEAS-2B sejtek előnyei és hátrányai
Más sejtvonalakhoz hasonlóan a BEAS-2B sejtekhez is társul néhány előny és hátrány. Ezek közül néhányat az alábbiakban tárgyalunk.
Előnyök
A BEAS-2B sejtvonal előnyei a következők:
|
Immortalizált sejtvonal |
A BEAS-2B humán hörgőhámsejtvonalat immortalizálták. Ezért tovább növekszik anélkül, hogy szeneszcenciába lépne. Ez a BEAS-2B sejtjellemző kiküszöböli a rövidebb élettartamú primer humán tüdőhámsejtek ismételt kivonásának szükségességét. |
|
Könnyen tenyészthető |
A BEAS-2B kultúrák könnyen fenntarthatók. A sejtek könnyedén növekednek és szaporodnak standard tenyésztési körülmények között. Nincsenek kényes vagy bonyolult sejttenyésztési követelmények. |
|
Emberi eredetű |
A BEAS-2B sejtvonal humán eredetű és releváns. Így ideális in vitro modell a humán légúti epitélsejtek válaszainak, viselkedésének és folyamatainak tanulmányozására. |
Hátrányok
A BEAS-2B tüdősejtvonalhoz kapcsolódó hátrányok a következők:
|
Átalakult humán tüdőhámsejtek |
A BEAS-2B sejteket Ad12-SV40 2B vírussal transzformálták, ami megváltoztathatja viselkedésüket és válaszukat az eredeti humán tüdőszövetből származó hörgőhámsejtekhez képest. |
4.a BEAS-2B sejtvonal alkalmazása a kutatásban
A BEAS-2B sejtvonal számos alkalmazást kínál az orvosbiológiai kutatásban. A BEAS-2B sejtek néhány gyakori alkalmazása a következő:
- Toxikológia: A BEAS-2B sejteket gyakran használják különböző toxinok, környezetszennyező anyagok és vegyi anyagok genotoxicitásának és citotoxicitásának vizsgálatára. A kutatók ezt a hörgőhámsejtvonalat alkalmazzák ezen anyagok tüdőegészségre gyakorolt káros hatásainak értékelésére. Emellett a mögöttes molekuláris mechanizmusokat is tanulmányozzák. Például egy 2021-ben végzett tanulmányban a BEAS-2B sejtvonalon értékelték a kadmium fém toxicitását. A kutatási eredmények azt mutatták, hogy a kadmium a MAPK jelátviteli útvonal modulációján keresztül sejtpusztulást és mitokondriális károsodást idézett elő a BEAS-2B tüdősejtvonalban [2]. Egy másik tanulmány a BEAS-2B sejtvonalat használta a cink-oxid nanorészecskék oxidatív stressz alatti toxicitásának értékelésére [3].
- Légzőszervi betegségek modellezése: A BEAS-2B sejtvonal kiváló kutatási eszköz és in vitro modell a légzőszervi betegségek, például a krónikus obstruktív tüdőbetegség (COPD), az asztma, a tüdőrák és a vírusfertőzések, például a SARS-CoV-2 tanulmányozására. A kutatók a BEAS-2B sejtvonalban általában betegséggel kapcsolatos állapotokat idéznek elő, és tanulmányozzák a mögöttes sejtszintű és molekuláris mechanizmusokat. Ez segít a potenciális gyógyszercélpontok azonosításában és a személyre szabott terápiák kifejlesztésében. A 2022-ben végzett kutatás a BEAS-2B sejtvonalat használta, és az ösztrogén és receptorainak szerepét tanulmányozta a SARS-CoV-2 fertőzésben. Az eredmények azt mutatták, hogy a GPER1 ösztrogénreceptor magasabb expressziója csökkenti a BEAS-2B SARS-CoV-2 vírusterhelést. Ezért részt vehet a SARS-CoV-2 vírusfertőzésben vagy replikációban [4].
5.bEAS-2B sejtek: BABBAS-2B-2: kutatási publikációk: kutatási publikációk
Az alábbiakban néhány érdekes és legtöbbet idézett kutatási tanulmányt mutatunk be, amelyekben BEAS-2B sejtek szerepelnek.
A grafén toxicitása normál emberi tüdősejtekben (BEAS-2B)
Ez a tanulmány 2011-ben jelent meg a Journal of Biomedical Nanotechnology című folyóiratban. A kutatás azt javasolta, hogy a grafit-oxid apoptózist és citotoxicitást idéz elő a normál hörgőhámsejtvonalban (BEAS-2B).
Ez a kutatási cikk a Journal of Microbiology and Biotechnology című folyóiratban jelent meg (2014). Ez a tanulmány a naringenin, egy flavonoid terápiás potenciálját vizsgálta a BEAS-2B sejtvonalon. Az eredmények azt sugallták, hogy a naringenin védi a BEAS-2B tüdősejteket a paraquat által kiváltott toxicitással vagy oxidatív károsodással szemben.
Ez a tanulmány az Inhalation Toxicology (2011) című folyóiratban jelent meg. Ebben a kutatók az amorf szilícium-dioxid bevonattal ellátott mágneses nanorészecskék toxicitási hatását értékelték a BEAS-2B sejtvonalon in vitro.
A Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) című szaklapban megjelent cikk azt javasolta, hogy az ursodeoxikolsav akadályozhatja a légúti epitélsejtek rendellenes migrációját, és megakadályozhatja a SARS-CoV-2 tüskésfehérje és az ACE-2 kölcsönhatása által okozott károsodást. Így segíthet a hám bazális rétegének helyreállításában.
A radon hatása a miR-34a-indukált apoptózisra humán hörgőhám BEAS-2B sejtekben
Ez a tanulmány 2019-ben jelent meg a Journal of Toxicology and Environmental Health című folyóiratban. A kutatási eredmények szerint a krónikus radonexpozíció a mikroRNS-34a aktiválásával elősegítheti a karcinogenezist az emberi hörgőhámsejtekben (BEAS-2B).
6.sejtkultúra protokollok
A BEAS-2B sejtek sejttenyésztési protokollja itt található.
- BEAS-2B sejtek szubkultiválása: Ez a dokumentum segít megismerni a BEAS-2B sejtek táptalaját és szubkultúrázási eljárásait.
- BEAS-2B sejtvonal: Ez a weboldal tartalmazza az összes alapvető információt, amelyre a BEAS-2B sejtvonallal való munka megkezdéséhez szüksége van, beleértve annak médiumait és a proliferáló és krioprezerváló kultúrák kezelésére vonatkozó protokollokat.
Hivatkozások
- Han, X., et al., Human lung epithelial BEAS-2B cells exhibit characteristics of mesenchymal stem cells. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., A kadmium által indukált BEAS-2B sejtek apoptózisa és mitokondriumok károsodása a MAPK jelátviteli útvonalon keresztül. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., A cink-oxid (ZnO) nanorészecskék toxicitása a humán hörgőhámsejteken (BEAS-2B) oxidatív stressz hatására fokozódik. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Az ösztrogénreceptor GPER1 overexpressziója és a G1 kezelés csökkenti a SARS-CoV-2 fertőzést BEAS-2B hörgősejtekben. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.