B16 sejtek - Alapvető útmutató a B16 melanomasejtekhez az onkológiai kutatásban

AB16 egy egér eredetű bőrrák (melanoma) sejtvonal. Ez a sejtvonal hatékony in vitro modell a humán bőrrákok tanulmányozására. Gyakran használják a rákos sejtek szilárd daganatképződésének és áttétképződésének vizsgálatára.

Ez a cikk segít a B16 melanoma sejtvonal alapjainak megértésében. Konkrétabban a következőket veszi sorra:

1.a B16 sejtvonal általános jellemzői és eredete

A cikk ezen szakasza a B16 melanoma sejtvonal jellemző tulajdonságait tárgyalja. Megtudhatja a válaszokat a következő gyakran feltett kérdésekre. Ilyen például: Mi a B16 rákos sejtvonal? Honnan származnak a B16 sejtek? Mekkora a B16 sejtek mérete?

A B16 sejtvonalat 1954-ben hozták létre. Ezeket a sejteket C57BL/6J egerekből nyerték, amelyek bőrében spontán daganat keletkezett a Maine állambeli Jackson Laboratoriesban.
Ezek melanint termelő hámsejtek, amelyek képesek áttétet képezni a lépben, a májban és a tüdőben.
A melanoma B16 sejtek monolayerként növekednek, és epithelszerű és orsó alakú sejtmorfológiát mutatnak.
A B16 sejtvonal mérete körülbelül 15,4 μm.
A B16 sejteknek különböző szubklónjai vannak, köztük a B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 és B16F10. Ezek az alvonalak különböznek a B16 szülői sejtektől, és megtartanak néhány sajátos jellemzőt. Ilyen például a morfológia, a sejtméret és más tulajdonságok eltérése. A B16F10 magas tüdőmetasztatikus képességgel rendelkezik, és a B164A5 a legagresszívabb bőrrákos sejtvonal a B16F10, B16-GMCSF és B16FLT3 sejtekhez képest [1].

3D animáció egy növekvő bőrrák, például a rosszindulatú melanoma közeli felvételéről, amely a környező szöveteket gyulladásba hozza.

2.a B16 sejtvonal tenyésztési információi

Egy sejtvonal fenntartása vagy tenyésztése előtt érdemes megkeresni a legfontosabb információkat a megduplázódási időre, a sejttípusra, a tenyésztőközegre, a tenyésztési körülményekre stb. vonatkozóan. Itt ez a szakasz tartalmazza a B16 sejtek tenyésztéséhez szükséges összes információt.

A B16 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai

A populáció megduplázódási ideje:	A B16 sejtek átlagos populációduplázódási ideje becslések szerint 24 óra.
Adhezív vagy szuszpenzióban:	A B16 sejtek tapadnak és monoszlopokban növekednek.
Ültetési sűrűség:	A B16 sejteket 1-2 x¹⁰⁴ ^sejt/cm2 sejtsűrűséggel ajánlott elvetni. A megtapadt B16 sejteket 1 x PBS-szel öblítjük, és Accutase oldattal disszociáljuk a felszínről. A sejteket centrifugáljuk, és a sejtpelletet reszuszpendáljuk a növekedési tápfolyadékban. Később ezeket a sejteket egy új lombikba adagoljuk a növekedéshez.
Növesztőközeg:	A B16 sejteket EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) táptalajban tenyésztjük, amely 10 % magzati szarvasmarha-szérumot (FBS) tartalmaz. A táptalajt hetente 2-3 alkalommal kell megújítani.
Növekedési feltételek:	A B16-sejtvonal tenyésztésére 5 %-os_{CO2-ellátással} és 37 °C-os hőmérsékleten működő, párásított inkubátor szolgál.
Tárolás:	Ezeket a sejteket -150 °C alatti hőmérsékleten vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tároljuk a sejtek életképességének védelme érdekében.
Fagyasztási folyamat és közeg:	A CM-1 vagy CM-ACF fagyasztási közeget a B16 sejtek lassú fagyasztási eljárással történő fagyasztásához használják.
Felolvasztási folyamat:	A fagyasztott B16 sejteket 37 °C-on, antimikrobiális szert tartalmazó vízfürdőben olvasztjuk fel. A felolvasztott sejtek közvetlenül tenyészthetők a növekedési tápfolyadékot tartalmazó lombikokba adagolva. Emellett ezeket a sejteket centrifugálhatjuk a fagyasztó közeg összetevőinek eltávolítása céljából, majd új közegben tenyészthetjük.
Biológiai biztonsági szint:	A B16 sejtvonalat az első biológiai biztonsági szintű laboratóriumban kell kezelni vagy fenntartani.

B16 melanomasejtek félig konfluens rétege 10x és 20x nagyításban.

3. b16 sejtvonal: B1616: előnyök és hátrányok

Más sejtvonalakhoz hasonlóan a B16 sejtvonal is az előnyök és hátrányok egyedi keverékével rendelkezik. Ennek a melanoma-sejtvonalnak néhány jelentős előnyét és hátrányát soroljuk fel ebben a szakaszban.

Előnyök

A B16 az első hatékony egér eszköz, amelyet széles körben használnak az áttétképződés kutatásában az általa kínált előnyök miatt. Ennek a bőrrákos sejtvonalnak néhány előnye a következő:

Könnyen tenyészthető	A B16 sejtvonal könnyen tenyészthető a kutatólaboratóriumokban. Széles körben használják a rákos sejtek biológiájának, a jelátviteli útvonalaknak és egyéb vizsgálatokra.
Gyorsan növekszik	A B16 melanoma sejtvonal magas proliferációs rátát mutat, így alkalmas a sejtosztódási és növekedési folyamatok tanulmányozására.
Tumorigenitás	A B16 tumorigén sejtvonal tumorszerű tulajdonságokkal rendelkezik, mint például az invázió, a migráció és a proliferáció. Értékes a tumorképződés, a progresszió és az áttétképződés tanulmányozására.

Hátrányok

A B16 sejtvonalhoz kapcsolódó hátrányok a következők:

A humán vonatkozás hiánya	Mivel a B16 egy egér melanoma sejtvonal, nem biztos, hogy pontosan reprezentálja az emberi bőrrák biológiáját, ami korlátozza a kutatási eredmények átültethetőségét.
Heterogenitás	A B16 sejtek heterogének, ugyanazon a tenyészeten belül is eltérő genetikai és fenotípusos tulajdonságokat mutatnak. Ez befolyásolhatja az eredmények megbízhatóságát és reprodukálhatóságát.

4. a B16 sejtek alkalmazása

A B16 sejtvonalat széles körben használják kutatási tanulmányokban. E sejtvonal néhány ígéretes alkalmazása a következő:

Tumorbiológia: Ez az egér bőrrákos sejtvonal tumorigén, és széles körben használják a tumorbiológia megértéséhez. Számos tanulmányt végeztek a tumorsejtek növekedése, proliferációja és metasztázisának hátterében álló sejtmechanizmusok feltárására a B16 sejtek felhasználásával. Egy 2020-ban végzett kutatásban B16 sejteket használtak fel a hosszú nem kódoló RNS, az LncRNS MEG3 szerepének vizsgálatára a melanoma kialakulásában, növekedésében és metasztázisában. Ez a kutatás megállapította, hogy a nem kódoló RNS modulálja a miRNS-21/E-Cadherin tengelyt, hogy stimulálja ezeket a sejtes eseményeket [2]. Ehhez hasonlóan kutatást végeztek a Notch1 jelátvitel lehetséges szerepének vizsgálatára a tumor által kiváltott immunszuppresszióban B16 sejtek felhasználásával [3].
Gyógyszerkutatás: A B16 sejteket gyógyszerjelöltek potenciális terápiás hatásainak validálására és tesztelésére használják. Egy tanulmányban a neogambogénsav, egy természetes vegyület daganatellenes hatását értékelték B16 sejtvonalon. A vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy ez a vegyület modulálja a PI3K/Akt/mTOR jelátviteli útvonalat, és ezáltal rákos sejtpusztulást okoz [4]. Egy másik tanulmány a Ginsenoside Rg3, egy szaponin melanomaellenes hatását vizsgálta B16 sejtvonalon. A kutatás azt javasolta, hogy ez a természetes vegyület az ERK és Akt jelátviteli útvonalak downregulálásával okoz daganatellenes hatást [5].

430,00 EUR*

Tartalom: 1.5 milliliter

Árak adók és szállítási költségek nélkül

cryovial

Termékszám: 305154

5.b16 sejteket tartalmazó kutatási publikációk

Íme néhány jelentős kutatási publikáció a B16 melanoma sejtvonallal kapcsolatban.

Az LncRNS MEG3 elősegíti a melanoma növekedését, metasztázisát és kialakulását a miR-21/E-kadherin tengely modulálásán keresztül

A Cancer Cell International folyóiratban (2020) megjelent publikáció azt javasolta, hogy a hosszú nem kódoló RNS MEG3 a miRNS-21/E-kadherin tengely modulálásával fokozza a B16 melanomasejtek kialakulását, növekedését és metasztázisát.

Egy új psoralénszármazék-MPFC fokozza a melanogenezist a p38 MAPK és a PKA jelátviteli útvonalak aktiválásán keresztül a B16 sejtekben

Ez a cikk az International Journal of Molecular Medicine című folyóiratban jelent meg 2018-ban. Ez a tanulmány egy psoralénszármazék- 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g] kromen-2-on (MPFC) melanogén hatását és mechanizmusait vizsgálta B16 sejtekben. A tanulmány azt javasolta, hogy ez a származék a PKA és a p38 MAPK sejtszignálok stimulálásával elősegíti a melanogenezist.

A Notch1 jelátvitel a melanomasejtekben a TGF-β1 felszabályozásán keresztül elősegítette a tumor által kiváltott immunszuppressziót

Ez a kutatás 2018-ban jelent meg a Journal of Experimental & Clinical Cancer Research című folyóiratban. A tanulmány eredményei arra utalnak, hogy a Notch1 jelátvitel aktiválása a B16 sejtekben megakadályozhatja a tumorellenes immunitást a TGF-β1 gén expressziójának felfokozásával.

A neogambogénsav a PI3K/Akt/mTOR jelátviteli útvonalon keresztül apoptózist indukál a B16-os melanomasejtekben

Ezt a tanulmányt Chunlan Wu és munkatársai végezték 2020-ban, és az Acta Biochimica Polonica folyóiratban jelent meg. A kutatás szerint a neogambogénsav, egy természetes vegyület, a PI3K/Akt/mTOR jelátviteli kaszkád modulálásával képes a B16 melanoma sejtek halálát okozni.

Egy irídium(III)-komplex mint hatásos rákellenes szer apoptózist és autofágiát indukál a B16 sejtekben az AKT/mTOR útvonal gátlásán keresztül

Ez a kutatási cikk a European Journal of Medicinal Chemistry 2018-as számában jelent meg. Ebben a tanulmányban a kutatók egy vegyület, az irídium (III) komplex rákellenes hatását vizsgálták B16 melanomasejtek segítségével.

Az ailanton sejtciklus-megállást és apoptózist indukál a B16 és A375 melanómasejtekben

Ez a tanulmány azt javasolta, hogy egy növényi bioaktív anyag, az Ailanthone rákellenes potenciállal rendelkezik, mivel apoptózist és sejtciklus-megállást képes kiváltani a B16 és A375 melanomasejtekben. Ez a tanulmány a Biomolecules című szaklapban jelent meg 2019-ben.

6. források a B16 sejtvonalhoz: B16 B1616: Jegyzőkönyvek, videók és más anyagok: Protokollok, videók és más

A B16 sejtvonalról korlátozott mennyiségű forrás áll rendelkezésre, amely elmagyarázza a tenyésztési és transzfekciós protokollokat.

Melanoma sejtek tenyésztése: Ez a videó értékes tippeket ad a melanoma sejtvonalak tenyésztéséhez.
Egy sejtvonal szubkultúrázása: Ez a videó egy sejtvonal általános szubkultúrázási protokollját ismerteti.
B16F10 sejtvonal transzfekciója: Ez a videó a B16 melanoma sejtek egy alvonalának transzfekciós protokollját ismerteti. Segíthet a B16 sejtek transzfekciós protokolljának optimalizálásában.

Az alábbiakban néhány sejttenyésztési protokollt mutatunk be B16 sejtekhez.

B16 sejtek tenyésztése: Ez a weboldal tartalmazza a B16 sejtek tenyésztéséhez szükséges összes információt, beleértve a növekedési táptalajt, a szubkultúrát, a sejtek felolvasztását és fagyasztását.

Hivatkozások

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell subline: C57 BL/6J bőrön. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNS MEG3 elősegíti a melanoma növekedését, metasztázisát és kialakulását a miR-21/E-kadherin tengely modulálásán keresztül. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., A Notch1 jelátvitel melanomasejtekben elősegítette a tumor által kiváltott immunszuppressziót a TGF-β1 felszabályozásán keresztül. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., A neogambogénsav a PI3K/Akt/mTOR jelátviteli útvonalon keresztül indukálja a melanoma B16 sejtek apoptózisát. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., A ginsenozid Rg3 daganatellenes aktivitása melanomában az ERK és Akt útvonalak downregulációján keresztül. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.