B16-F10 sejtek - A B16-F10 melanoma sejtvonal vizsgálata a metasztázis kutatásban
AB16-F10 sejtek egy C57BL/6J egérből származó melanoma sejtvonalat alkotnak. Széles körben használják őket a bőrrákkutatásban. A kutatók ezeket a sejteket a daganatok kialakulásának és progressziójának, valamint a terápiás beavatkozásoknak a tanulmányozására használják. Ez a cikk a B16-F10 melanomasejtek alapvető vonatkozásaival foglalkozik. Különösen a következőket foglalja magában:
- A B16-F10 sejtvonal eredete és általános jellemzői
- A B16-F10 sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
- B16-F10 sejtek: B161616 F1616: előnyök és hátrányok: előnyök és hátrányok
- A B16-F10 sejtek kutatási alkalmazásai
- A B16-F10 sejtvonalat tartalmazó publikációk
- A B16-F10 sejtvonal forrásai: B161616 B1616: Protokollok, videók és egyéb: Protokollok, videók és egyéb: Protokollok, videók és egyéb
1. A B16-F10 sejtvonal eredete és általános jellemzői
Ez a szakasz betekintést nyújt a B16F10 melanomás daganatsejtek eredetébe és megkülönböztető tulajdonságaiba. Segítségével hatékonyan használhatja a sejtvonalat kutatómunkája során. Elsősorban a következőket fogja megtudni: Mik azok a B16-F10 sejtek? Miből származik a B16F10? Milyen a B16F12 sejtvonal morfológiája? Milyen méretű a B16F10 sejt?
- A B16-F10 a B16 tumorsejtvonal szubklónja, amely C57BL/6J egerek bőrszövetéből származik. Ebben a B16F10 melanomasejteket a B16-vonal intravénás injekciózását követően immunhiányos vagy szingén egerekbe fejlesztették ki. Ezeket a sejteket az in vivo metasztatikus tüdőkolóniák kialakítására való képességük alapján szelektáltuk, majd tíz ciklusnyi tüdőkolóniaképzés után in vitro létrehoztuk [1]. Fidler és munkatársai 1976-ban fejlesztették ki.
- A B16-F10 sejtvonalak epithelszerű és orsó alakú megjelenésűek.
- A B16-F10 sejtek hozzávetőleges mérete 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1 és B16-F10 sejtek
A B16-F1 és B16-F10 sejtek a B16 szülő sejtvonalból származnak. Mindkettő ugyanabból származik és szinte hasonló tulajdonságokkal rendelkeznek. A fő különbség azonban az áttétképző képességük. A B16-F10 sejtek magas, míg a B16-F1 sejtek alacsony metasztatikus potenciállal rendelkeznek [3].
2.a B16-F10 sejtek tenyésztésére vonatkozó információk
Egy sejtvonal kezelése és tenyésztése előtt ismernie kell a sejtvonal megduplázódási idejét, a tenyésztőközegeket, a feltételeket és a sejttenyésztési protokollokat. Ez a szakasz tárgyalja: Mi a b16-f10 sejtek megduplázódási ideje? Hogyan kell a B16F10 sejteket tenyészteni? Milyen a B16-F10 sejtek táptalaja? Milyen tenyésztési feltételek javasoltak a B16-F10 sejtek számára?
A B16-F10 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
|
Megduplázódási idő: |
A B16-F10 sejtek megduplázódási ideje körülbelül 20,1 óra. A tenyésztési körülményektől függően 17 és 21 óra között változhat. |
|
Adhezív vagy szuszpenzióban: |
A B16-F10 egy adherens sejtvonal. A sejtek gyorsan növekednek és monoréteget alkotnak. |
|
Osztott arány: |
A B16-F10 sejteket 1:2 és 1:4 közötti osztási arányban szubkultiválják. A sejteket foszfátpuffer sóoldattal (1x) mossuk, majd Accutase passzázsoldattal inkubáljuk 8-10 percig környezeti hőmérsékleten. A sejtekhez friss tápfolyadékot adunk és centrifugáljuk. A begyűjtött sejtpelletet ismét reszuszpendáljuk, és a sejteket az osztási aránynak megfelelően friss táptalajt tartalmazó új lombikba adagoljuk. |
|
Növesztőközeg: |
A B16-F10 sejteket DMEM táptalajban tenyésztjük. A táptalajt 10% FBS-szel, 4 mM L-Glutaminnal, 1,5 g/L NaHCO3-mal, 4,5 g/L glükózzal és 1,0 mM nátrium-piruváttal egészítjük ki az ideális sejtnövekedés érdekében. A tápfolyadékot hetente 2-3 alkalommal kell cserélni. |
|
Növekedési feltételek: |
A B16-F10 sejteket 37 °C-os, párásított inkubátorban, 5%-os CO2-ellátás mellett kell tenyészteni. |
|
Tárolás: |
A fagyasztott sejteket -150 °C alatt, elektromos ultraalacsony hőmérsékletű fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tároljuk a sejtek életképességének megőrzése érdekében. |
|
Fagyasztási folyamat és közeg: |
A B16-F10 sejteket CM-1 vagy CM-ACF táptalajban fagyasztjuk le a tárolás céljából. Ehhez lassú, percenként csak 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést lehetővé tevő fagyasztási folyamat ajánlott, hogy a sejtek ne szenvedjenek sokkot. |
|
Felolvasztási folyamat: |
A fagyasztott B16-F10 sejteket előre beállított 37 °C-os vízfürdőben 40-60 másodpercig olvasztjuk fel. Ezután a sejteket friss tápfolyadékhoz adjuk, és centrifugáljuk a fagyasztóközeg összetevőinek eltávolítása érdekében. Az összegyűjtött sejteket növekedési táptalajban reszuszpendáljuk, és lombikokba öntjük a tenyésztéshez. |
|
Biológiai biztonsági szint: |
A B16-F10 sejtvonal kezeléséhez és fenntartásához 1. biológiai biztonsági szintű laboratórium szükséges. |
3.b16-F10 sejtek: B161016: Előnyök és hátrányok
Más sejtvonalakhoz hasonlóan a B16-F10 sejtek is rendelkeznek bizonyos előnyökkel és hátrányokkal. Ebben a szakaszban ennek a bőrmelanoma-sejtvonalnak néhány jelentős előnyét és hátrányát tárgyaljuk.
Előnyök
A B16-F10 sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban. A B16-F10 sejtek előnyei a következők:
|
Metasztatikus potenciál |
A bőrmelanoma B16F10 sejtek nagy metasztatikus potenciállal rendelkeznek, így értékesnek bizonyulnak a rák metasztázisának és a mögöttes mechanizmusok tanulmányozásához. |
|
In vitro tumormodell |
A B16-F10 sejtek in vitro modellként szolgálnak a rák progressziójának és növekedésének tanulmányozására, segítve a kutatókat a rákot mozgató sejtes és molekuláris mechanizmusok megértésében. |
Hátrányok
A B16-F10 sejtvonalhoz kapcsolódó hátrányok a következők:
|
Egérből származó sejtvonal |
A B16-F10 egy egérből származó sejtvonal, ami korlátozza alkalmazhatóságát az ember-specifikus vizsgálatokra. Az ezekből a sejtekből származó kutatási eredmények nem mindig ültethetők át valóban a humán biológiára. |
4.a B16-F10 sejtek kutatási alkalmazásai
A B16-F10 sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban. A következőkben e sejtvonal néhány ígéretes alkalmazását tárgyaljuk.
- Rákkutatás: A B16-F10 sejtvonal értékes modell a rákos sejtek folyamatainak tanulmányozására, beleértve a proliferációt, az inváziót, a migrációt és a sejthalált vagy apoptózist. Emellett segít a kutatóknak abban, hogy betekintést nyerjenek az ezeket a sejtfolyamatokat irányító molekuláris mechanizmusokba és útvonalakba. Egy 2018-ban végzett tanulmány a CCR5 (ötös típusú C-C kemokin receptor) szerepét vizsgálta a melanomasejtek epiteliális-mesenchimális sejtek közötti átmenetben és az áttétképződésben. Az eredmények azt mutatták, hogy a CCR5 hiánya korlátozza a tumor növekedését és metasztázisát, míg a magas expresszió a B16-F10 sejtek fokozott növekedéséhez és metasztázisához vezet. További kutatások arról számoltak be, hogy a CCR5 szabályozza a TGFβ1 expresszióját, amely szabályozza a PI3K/AKT/GSK3β jelátvitelt az epiteliális-mesenchimális átmenet és a sejtmigráció elősegítése érdekében [4].
- Gyógyszerkísérletek és fejlesztés: A B16F10 melanoma tumorsejtek rendkívül agresszívek, ezért alkalmasak a potenciális daganatellenes gyógyszerek és kezelések tesztelésére. A kutatók ezeket a sejteket alkalmazzák, és felmérik a különböző vegyületek sejtnövekedésre, proliferációra és metasztázisra gyakorolt hatását, ezzel segítve a gyógyszerfejlesztést. Egy 2018-ban Valentina Nanni és munkatársai által végzett tanulmány a Spartium junceum virágok hidroalkoholos kivonatának terápiás hatásait vizsgálta. A tanulmány azt javasolta, hogy a virágkivonat hatékonyan indukálja a B16-F10 sejtek szeneszcenciáját, ami a sejtnövekedés és a melanogenezis elfojtásához vezet, így potenciális rákellenes hatást fejthet ki [5].
5.b16-F10 sejtvonalat tartalmazó publikációk
Íme néhány jelentős kutatási publikáció a B16-F10 melanoma sejtvonallal kapcsolatban:
Ez a tanulmány a Nutrients című folyóiratban jelent meg (2020). Azt javasolta, hogy a Sorghum bicolor etanolos kivonata anti-melanogén hatással rendelkezik a B16F10 bőrmelanoma sejtekben.
A kalcitriol gátolja a proliferációt és potenciálisan apoptózist indukál a B16-F10 sejtekben
A Medical Science Monitor Basic Research (2022) című szaklapban megjelent kutatás azt javasolta, hogy a kalcitriol hatóanyag a proliferáció gátlásával és az apoptózis indukálásával tumorellenes hatást fejt ki a B16-F10 melanomasejtekben.
Ez a cikk a Biochemical and Biophysical Research Communications (2022) című folyóiratban jelent meg. Az eredmények azt mutatták, hogy a kardolok, a rezorcinolos lipidek intenzív citotoxicitást fejtenek ki a B16-F10 sejtvonalon.
Az Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) című szaklapban megjelent tanulmány a Ginkgo biloba exocarp kivonat antimetasztatikus potenciálját vizsgálta B16-F10 sejtek segítségével.
A World Neurosurgery (2018) című szaklapban megjelent kutatás azt javasolta, hogy a timokinon hatékony terápia lehet az intracerebrális metasztatikus elváltozások ellen, mivel elnyomja a B16-F10 sejtek növekedését és apoptózist indukál.
6.a B16-F10 sejtvonal forrásai: B161616: Protokollok, videók és még sok más: Protokollok, videók és még sok más
A B16F10 endotélsejteket széles körben használják a bőrrákkutatásban. Az alábbiakban néhány online forrás ismerteti a tenyésztési és transzfekciós protokollokat:
- B16F10 melanoma sejtek transzfekciója: B16-F10 sejtek transzfekciós protokolljának elsajátításában segíthet ez a videós bemutató.
- B16-F10 transzfekció: Ez a dokumentum elmagyarázza a B16F10 bőrmelanoma sejtek in vitro DNS-transzfekciós protokollját.
A következő link tartalmazza a B16-F10 sejtek sejttenyésztési protokollját:
- B16-F10 sejtek szubkultúrázása: Ez a weboldal hasznos információkat tartalmaz a B16F10 melanoma tumorsejtekkel kapcsolatban. Tartalmazza a növekedési táptalajokat, a duplázódási időt, a tenyésztési feltételeket és a sejtek szubkultúrázásának protokollját, valamint a kriokonzervált és a proliferatív kultúrák kezelését.
Hivatkozások
- Poste, G., et al., Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultured cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono és S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device. Mikrogépek, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al., Négy különböző B16 egér melanoma sejt-alvonal viselkedése: C57BL/6J bőrön. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Liu, J., et al., A CCR5 magas expressziója melanomában fokozza az epiteliális-mesenchymális átmenetet és az áttétképzést a TGFβ1-en keresztül. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., Spartium junceum L. virágainak hidroalkoholos kivonata gátolja a növekedést és a melanogenezist B16-F10 sejtekben azáltal, hogy szeneszcenciát indukál. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.