B16-F10 sejtek – A B16-F10 melanóma sejtvonal vizsgálata a metasztázisok kutatásában
A B16-F10 sejtek egy C57BL/6J egérből származó melanoma sejtvonalat alkotnak. Széles körben használják őket a bőrrák kutatásában. A kutatók ezeket a sejteket használják a tumor kialakulásának és progressziójának, valamint a terápiás beavatkozások tanulmányozására. Ez a cikk a B16-F10 melanoma sejtek alapvető jellemzőit tárgyalja. Különösen a következőket tartalmazza:
- Növekedési tápközeg
- A B16-F10 sejteket DMEM táptalajon tenyésztik. A táptalajt 10% FBS-sel, 4 mM L-glutaminnal, 1,5 g/l NaHCO3-mal, 4,5 g/l glükózzal és 1,0 mM nátrium-piruváttal egészítik ki az ideális sejtnövekedés érdekében. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
- Duplázódási idő
- A B16-F10 sejtek duplázódási ideje körülbelül 20,1 óra. A tenyésztési körülményektől függően ez 17 és 21 óra között változhat.
- Növekedési típus
- A B16-F10 egy adhezív sejtvonal. A sejtek gyorsan szaporodnak és monoréteget képeznek.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — B16-F10 megrendelése
- A B16-F10 sejtvonal eredete és általános jellemzői
- A B16-F10 sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
- B16-F10 sejtek: Előnyök és hátrányok
- A B16-F10 sejtek kutatási alkalmazásai
- A B16-F10 sejtvonalat bemutató publikációk
- Források a B16-F10 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
- A B16-F10 sejtvonal eredete és általános jellemzői
- A B16-F10 sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
- B16-F10 sejtek: Előnyök és hátrányok
- A B16-F10 sejtek kutatási alkalmazásai
- 5. A B16-F10 sejtvonalat bemutató publikációk
- Források a B16-F10 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
- Gyakran ismételt kérdések
A B16-F10 sejtvonal eredete és általános jellemzői
Ez a szakasz betekintést nyújt a B16F10 melanoma tumorsejtek eredetébe és megkülönböztető tulajdonságaiba. Segítséget nyújt a sejtvonal hatékony felhasználásához kutatási munkájában. Főként a következőket fogja megtudni: Mik a B16-F10 sejtek? Miből származik a B16F10? Mi a B16F12 sejtvonal morfológiája? Mekkora a B16F10 sejt mérete?
- A B16-F10 a C57BL/6J egerek bőrszövetéből származó B16 tumorsejtvonal egyik szubklónja. A B16F10 melanomasejteket úgy állították elő, hogy a B16 vonalat intravénásan beadták immunhiányos vagy szingén egerekbe. Ezeket a sejteket azért választották ki, mert képesek in vivo metasztatikus tüdőkolóniákat képezni, majd tíz ciklusnyi in vitro tüdőkolónia-képzés után állították elő őket [1]. Fidler és munkatársai fejlesztették ki 1976-ban.
- A B16-F10 sejtvonalak epitheliális jellegűek és orsó alakúak.
- A B16-F10 sejtek hozzávetőleges mérete 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1 és B16-F10 sejtek
A B16-F1 és a B16-F10 sejtek a B16 szülősejtvonalból származnak. Mindkettő ugyanabból ered, és szinte azonos jellemzőkkel rendelkezik. A fő különbség azonban a metasztatikus képességükben rejlik. A B16-F10 sejtek metasztatikus potenciálja magas, míg a B16-F1-é alacsony [3].
A B16-F10 sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
A sejtvonal kezelése és tenyésztése előtt ismernie kell annak duplázódási idejét, a tenyésztő táptalajt, a feltételeket és a sejttenyésztési protokollokat. Ebben a szakaszban a következőket tárgyaljuk: Mennyi a B16-F10 sejtek duplázódási ideje? Hogyan tenyésztik a B16-F10 sejteket? Mi a B16-F10 sejtek táptalaja? Milyen tenyésztési feltételek ajánlottak a B16-F10 sejtek esetében?
A B16-F10 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A B16-F10 sejtek duplázódási ideje körülbelül 20,1 óra. A tenyésztési feltételektől függően 17 és 21 óra között változhat.
Adherens vagy szuszpenziós:
A B16-F10 egy adhezív sejtvonal. A sejtek gyorsan szaporodnak és monoréteget képeznek.
Osztási arány:
A B16-F10 sejteket 1:2–1:4 osztási arányban szubkultiválják. A sejteket foszfátpuffer-sóoldattal (1x) mossák, majd Accutase passzázsoló oldattal 8–10 percig szobahőmérsékleten inkubálják. A sejtekhez friss táptalajt adnak, majd centrifugálják. A learatott sejtpelletet újra szuszpendálják, és a sejteket az osztási aránynak megfelelően elosztják a friss tenyészközeget tartalmazó új lombikba.
Növekedési tápközeg:
A B16-F10 sejteket DMEM táptalajon tenyésztik. A táptalajt 10% FBS-sel, 4 mM L-glutaminnal, 1,5 g/l NaHCO3-mal, 4,5 g/l glükózzal és 1,0 mM nátrium-piruváttal egészítik ki az ideális sejtnövekedés érdekében. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
A B16-F10 sejteket 37 °C-on, 5% CO2-ellátással, párásított inkubátorban tenyésztik.
Tárolás:
A fagyasztott sejteket -150 °C alatt, elektromos ultra-alacsony hőmérsékletű fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tárolják a sejtek életképességének megőrzése érdekében.
Fagyasztási folyamat és táptalaj:
A B16-F10 sejteket tárolás céljából CM-1 vagy CM-ACF táptalajban fagyasztják le. Ehhez olyan lassú fagyasztási folyamatot ajánlunk, amely percenként csak 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé, hogy elkerüljük a sejtek sokkos állapotba kerülését.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott B16-F10 sejteket előre beállított 37 °C-os vízfürdőben 40–60 másodpercig felolvasztják. Ezután a sejteket friss táptalajba helyezik, és centrifugálják, hogy eltávolítsák a fagyasztó táptalaj komponenseit. Az összegyűjtött sejteket növekedési táptalajban reszuszpendálják, és tenyésztés céljából lombikokba öntik.
Biológiai biztonsági szint:
A B16-F10 sejtvonal kezeléséhez és fenntartásához 1. szintű biológiai biztonsági laboratórium szükséges.
B16-F10 sejtek: Előnyök és hátrányok
Más sejtvonalakhoz hasonlóan a B16-F10-nek is vannak előnyei és hátrányai. Ebben a szakaszban néhány jelentős előnyét és hátrányát tárgyaljuk ennek a bőrrákos sejtvonalnak.
Előnyök
A B16-F10 sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban. A B16-F10 sejtek előnyei a következők:
Metasztatikus potenciál
A B16F10 bőrmelanoma sejtek magas metasztatikus potenciállal rendelkeznek, ami értékessé teszi őket a rákos metasztázisok és az azok mögött álló mechanizmusok tanulmányozásában.
In vitro tumor modell
A B16-F10 sejtek in vitro modellként szolgálnak a rák progressziójának és növekedésének tanulmányozásához, segítve a kutatókat a rákot előidéző sejt- és molekuláris mechanizmusok megértésében.
Hátrányok
A B16-F10 sejtvonalhoz kapcsolódó hátrányok a következők:
Egérből származó sejtvonal
A B16-F10 egérből származó sejtvonal, ami korlátozza alkalmazhatóságát az emberre vonatkozó tanulmányokban. Az ezekből a sejtekből származó kutatási eredmények nem mindig fordíthatók le pontosan az emberi biológiára.
A B16-F10 sejtek kutatási alkalmazásai
A B16-F10 sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban. Itt néhány ígéretes alkalmazási területét ismertetjük.
- Rákkutatás: A B16-F10 sejtvonal értékes modell a ráksejtek folyamatainak, többek között a szaporodásnak, az inváziónak, a migrációnak és a sejthalálnak vagy apoptózisnak a tanulmányozásához. Emellett segít a kutatóknak betekintést nyerni az ezeket a sejtes folyamatokat vezérlő molekuláris mechanizmusokba és útvonalakba. Egy 2018-ban végzett tanulmány a CCR5 (C-C kemokinreceptor 5-ös típus) szerepét vizsgálta a melanómasejtek epiteliális-mesenchimális átalakulásában és metasztázisában. Az eredmények kimutatták, hogy a CCR5-hiány korlátozza a tumor növekedését és a metasztázist, míg a magas expresszió a B16-F10 sejtek fokozott növekedéséhez és metasztázisához vezet. További kutatások szerint a CCR5 szabályozza a TGFβ1 expresszióját, amely a PI3K/AKT/GSK3β jelátvitelt szabályozza, elősegítve az epiteliális-mesenchimális átalakulást és a sejtvándorlást [4].
- Gyógyszervizsgálat és -fejlesztés: A B16F10 melanoma tumorsejtek rendkívül agresszívek, ezért alkalmasak potenciális daganatellenes gyógyszerek és kezelések tesztelésére. A kutatók ezeket a sejteket használják, és értékelik a különböző vegyületek hatását a sejtnövekedésre, a proliferációra és a metasztázisra, elősegítve ezzel a gyógyszerfejlesztést. Valentina Nanni és munkatársai által 2018-ban végzett tanulmány a Spartium junceumvirágok hidroalkoholos kivonatának terápiás hatásait vizsgálta. A tanulmány szerint a virágkivonat hatékonyan indukálta a B16-F10 sejtek szeneszcenciáját, ami a sejtnövekedés és a melanogenezis gátlásához vezet, így potenciális rákellenes hatást fejt ki [5].
5. A B16-F10 sejtvonalat bemutató publikációk
Íme néhány jelentős kutatási publikáció, amely a B16-F10 melanoma sejtvonalat mutatja be:
Ez a tanulmány a Nutrients (2020) folyóiratban jelent meg. A tanulmány szerint a Sorghum bicolor etanolos kivonatának anti-melanogén hatása van a B16F10 bőrmelanoma sejtekben.
A kalcitriol gátolja a szaporodást és potenciálisan apoptózist indukál a B16–F10 sejtekben
A Medical Science Monitor Basic Research (2022) folyóiratban megjelent kutatás szerint a kalcitriol gyógyszer gátolja a szaporodást és apoptózist indukál a B16-F10 melanómasejtekben, így tumorellenes hatást fejt ki.
Ez a cikk a Biochemical and Biophysical Research Communications (2022) folyóiratban jelent meg. Az eredmények szerint a kardolok, a rezorcinol-lipidek, erős citotoxikus hatást gyakorolnak a B16-F10 sejtvonalra.
Az Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) folyóiratban megjelent tanulmány a B16-F10 sejtek felhasználásával vizsgálta a Ginkgo biloba héjkivonat metasztázisgátló potenciálját.
A World Neurosurgery (2018) folyóiratban megjelent kutatás szerint a timochinon hatékony terápiát jelenthet az intracerebrális metasztatikus elváltozások ellen, mivel gátolja a B16-F10 sejtek növekedését és apoptózist indukál.
Források a B16-F10 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
A B16F10 endoteliális sejteket széles körben használják a bőrrák kutatásában. Íme néhány online forrás, amely elmagyarázza a tenyésztési és transzfekciós protokollokat:
- B16F10 melanoma sejtek transzfekciója: Ez a videó bemutató segíthet megtanulni a B16-F10 sejtek transzfekciós protokollját.
- B16-F10 transzfekció: Ez a dokumentum elmagyarázza a bőrmelanoma B16F10 sejtek in vitro DNS-transzfekciós protokollját.
Az alábbi link a B16-F10 sejtek sejtkultúra-protokollját tartalmazza:
- B16-F10 szubkultiválás: Ez a weboldal hasznos információkat tartalmaz a B16F10 melanoma tumorsejtekről. Tartalmazza a tenyésztőközeget, a duplázódási időt, a tenyésztési feltételeket és a sejtek szubkultiválásának protokollját, valamint a kriokonzervált és proliferatív tenyészetek kezelését.
Hivatkozások
- Poste, G. és munkatársai, A tenyésztett sejtvonalakból, szubkután tumorokból és egyedi tüdőmetasztázisokból izolált B16 melanoma klónok metasztatikus tulajdonságainak összehasonlítása. Cancer Research, 1982. 42(7): 2770–2778. o.
- Nakamura, M., D. Ono és S. Sugita, B16 melanoma sejtváltozatok mechanofenotipizálása a (-)-epigallokatechin-gallát kezelés hatékonyságának értékeléséhez kúpos mikrofluidikus eszköz alkalmazásával. Micromachines, 2019. 10(3): 207. o.
- Danciu, C. és munkatársai, Négy különböző B16 egér melanoma sejtvonal viselkedése: C57BL/6J bőr. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): 73–80. o.
- Liu, J. és munkatársai, A CCR5 magas expressziója a melanómában fokozza az epiteliális-mesenchimális átalakulást és a metasztázist a TGFβ1-en keresztül. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): 481–493. o.
- Nanni, V. és munkatársai: A Spartium junceum L. virágok hidroalkoholos kivonata gátolja a növekedést és a melanogenezist a B16-F10 sejtekben az öregedés indukálásával. Phytomedicine, 2018. 46: 1–10. o.