ARPE-19 sejtek - Specializált pillantás a retina pigment epithelialis sejtek kutatására az ARPE-19 segítségével

AzARPE-19 humán eredetű, spontán keletkezett retinális pigment epithel sejtek. A retina biológiájának, patológiás állapotainak és terápiás beavatkozásainak (farmakológia) különböző aspektusait tanulmányozzák velük. E cikk célja, hogy átfogó betekintést nyújtson az ARPE-19 immortalizált sejtekbe. Elsősorban a sejtvonal általános jellemzőit, tenyésztési feltételeit és különféle kutatási alkalmazásait tárgyaljuk. Ezért az elolvasás révén alapos ismereteket szerezhet a következőkről:

ARPE-19 sejtek: Az ARPE ARPE ARPE: Eredet és általános tulajdonságok
ARPE-19 sejtvonal: ARPEPE ARPE ARPEPE: tenyésztéssel kapcsolatos információk
Az ARPE-19 sejtek előnyei és korlátai
Az ARPE-19 sejtvonal alkalmazása a kutatásban
ARPE-19 sejtek: ARPE ARPEPE ARPE: Kutatási publikációk
Az ARPE-19 sejtvonal forrásai: Protokollok, videók és még sok más

1. ARPE-19 sejtek: Eredet és általános jellemzők

Egy sejtvonal eredetének és általános jellemzőinek ismerete elengedhetetlen a kutatásban való hatékony felhasználásához. Ez a cikkrész az ARPE-sejtvonalra vonatkozó összes információval foglalkozik. Például: Mi az ARPE-19 sejtvonal? Miért érdemes ARPE-19 sejteket használni? Mi az ARPE-19/HPV-16 sejtvonal? Halhatatlanok-e az ARPE-19 sejtek? Milyen az ARPE-19 sejtek morfológiája és mérete?

Az ARPE-19 halhatatlan retinális pigmentepithel sejtvonal egy 19 éves férfi szeméből származik, aki egy balesetben szerzett fejsérülés következtében meghalt. Amy Aotaki-Keen hozta létre 1986-ban.
Ezek a sejtek retinális pigment epithelsejt markereket, azaz CRALBP-t és RPE-65-öt expresszálnak, ami arra utal, hogy képesek stabil monorétegek létrehozására, amelyeket morfológiai és funkcionális polaritás jellemez.
Az ARPE-19 sejtek epithelsejt-szerű morfológiával rendelkeznek.
Az ARPE-19 sejtek többnyire normális kariotípussal rendelkeznek, kivéve egy deléciót és egy addíciót a 9., illetve a 19. kromoszóma hosszú karján. Ezenkívül néhány aneuploidia is megfigyelhető [1].

Pásztázó elektronmikroszkópos felvétel (SEM) a retina pálcikáiról és csapjairól.

2.aRPE-19 sejtvonal: A tenyésztéssel kapcsolatos információk

Az alapvető sejttenyésztési információk elengedhetetlenek a sejtvonal megfelelő kezeléséhez és fenntartásához. Ez a szakasz segít megismerni az ARPE-19 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos legfontosabb tudnivalókat. Tudni fogja: mi az arpe-19 megduplázódási ideje? Mi az ARPE-19 vetési sűrűsége? Mi az ARPE-19 sejtsűrűség? Mi az ARPE-19 fagyasztási közeg? Hogyan kell az ARPE-19 sejtvonalat tenyészteni?

Az ARPE-19 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai

A populáció megduplázódási ideje:	Az ARPE-19 sejtek megduplázódási ideje körülbelül 55-65 óra. Akár 48 populációs megduplázódáson is áteshetnek.
Adhezív vagy szuszpenzióban:	Az ARPE-19 egy adherens sejtvonal.
Szubkultivációs arány:	Az ARPE-19 szubkultivációs aránya 1:3 és 1:5 között van. Az adherens sejteket 1x PBS-szel öblítjük, és 8-10 percig inkubáljuk disszociációs oldattal, accutázzal. A levált sejtekhez friss tápfolyadékot adunk és centrifugáljuk. A sejtpelletet ismét reszuszpendáltuk és friss tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőlombikba öntöttük.
Növekedési táptalaj:	Az ARPE-19 sejtvonal tenyésztéséhez DMEM vagy Ham's F12 táptalajt használunk. Az ARPE-19 táptalaj 5% FBS-t, 3,1 g/L glükózt, 15 mM HEPES-t, 1,6 mM L-Glutamint, 1,0 mM nátrium-piruvátot és 1,2 g/L NaHCO3-t tartalmaz. A tápfolyadékot hetente 2-3 alkalommal cseréljük.
Növekedési feltételek:	Az ARPE-19 sejteket 37 °C-os hőmérsékleten, 5%-os CO2-ellátás mellett, párásított inkubátorban tartjuk.
Tárolás:	A sejtvonal tárolható folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150°C alatti hőmérsékleten a sejtek életképességének hosszú távú védelme érdekében.
Fagyasztási folyamat és közeg:	Az ARPE-19 fagyasztási közegként CM-1 vagy CM-ACF fagyasztási közegként használatos. Röviden, a sejteket lassú fagyasztási módszerrel fagyasztják le, amely percenként csak 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé, és megvédi a sejteket a sokktól.
Felolvasztási folyamat:	A sejteket 37 °C-ra előzetesen beállított vízfürdőben olvasztjuk fel. Miután egy kis jégcsomó maradt, a sejteket friss táptalajhoz adjuk és centrifugáljuk. Ezáltal eltávolítják a fagyasztási közeg elemeit. Ezután a sejtpelletet reszuszpendáljuk, és a sejteket a tenyésztéshez lombikba adagoljuk.
Biológiai biztonsági szint:	Az ARPE-19 sejteket 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumokban kezelik.

ARPE-19 sejtek 10x nagyításban, szubkultiválás után és félig folyékony állapotban.

3.az ARPE-19 sejtek előnyei és korlátai

Az ARPE-19 sejteket széles körben használják a retina sejtbiológiai vizsgálataiban. Más sejtekhez hasonlóan ezek is rendelkeznek bizonyos előnyökkel és korlátokkal. Ezek közül néhányat felsorolunk ebben a szakaszban:

Előnyök

Az ARPE-19 sejtvonal fő előnyei a következők:

Retinális sejtmodell	Az ARPE-19 sejtek nagyon hasonlítanak a humán retina pigment epithel sejtekhez, így ideálisak a retina betegségeinek tanulmányozására és a gyógyszerek tesztelésére.
Stabil növekedési sebesség	Ezek a sejtek stabil növekedést mutatnak, és hosszabb ideig fenntarthatók, ami megkönnyíti a hosszú távú kísérleteket.
Transzfekciós alkalmasság	Az ARPE-19 sejtvonal kiváló transzfekciós gazdatest, széles körben használják mind tranziens, mind stabil expressziós vizsgálatokban.

Korlátozások

Az ARPE-19 sejtvonallal kapcsolatos néhány korlátozást mutatunk be:

Korlátozott differenciálódás

Az ARPE-19 differenciálódása korlátozott a primer retinasejtekhez képest. Ez potenciálisan hatással lehet bizonyos differenciálódással kapcsolatos vizsgálatokra.

4.az ARPE-19 sejtvonal alkalmazása a kutatásban

Az ARPE-19 sejtvonalnak számos alkalmazása van a retina kutatásában. Az alábbiakban ennek a retinális pigment epithel sejtvonalnak néhány specifikus és jelentős kutatási felhasználásáról beszéltünk.

Retina betegségek kutatása: Az ARPE-19 sejtek értékes betekintést nyújtanak a retina patogenezisébe. A kutatók a sejteket a betegség mechanizmusainak és a lehetséges kezeléseknek a vizsgálatára használják. Egy 2020-ban végzett vizsgálat megállapította, hogy a cirkuláris RNS hsa_circ_0041795 kölcsönhatásba lép a miRNS-646-tal és a VEGFC-vel, hogy elősegítse a magas glükóz által kiváltott károsodást az ARPE-19 humán retina pigment epithel sejtekben. Ezért a tanulmány ezt a cirkuláris RNS-t hatékony terápiás és diagnosztikai célpontként javasolja a diabéteszes retinopátia elleni küzdelemben [2]. Hasonlóképpen Jing Yang és munkatársai ARPE-19 sejteket használtak, és betekintést nyújtottak a diabéteszes retinopátia patogenezisébe. Azt vizsgálták, hogy az lncRNS SNHG1 (Small Nucleolar RNA Host Gene 1) gátlása elnyomhatja a magas glükózzal kezelt ARPE-19 sejtek gyulladásos válaszát és epithelialis-mesenchymalis átmenetét [3].
Gyógyszerkísérletek: Az ARPE-19 sejteket a gyógyszerek és vegyületek hatékonyságának és biztonságosságának értékelésére használják, segítve a retinabetegségek kezelésére vagy terápiáinak kifejlesztését. Egy 2019-ben végzett vizsgálat például a Syzygium malaccense bioaktív anyagainak védő hatását mutatta ki a hidrogén-peroxid által kiváltott stresszel szemben emberi retina pigment epithel sejtekben, az ARPE-19 sejtekben [4]. Ezt követően egy tanulmány a Prunella vulgaris var. L kivonat terápiás szerepét találta a kék fény által kiváltott károsodás ellen ARPE-19 sejtekben és egérmodellben [5].

650,00 EUR*

Tartalom: 1.5 milliliter

Árak adók és szállítási költségek nélkül

cryovial

Termékszám: 305025

5.aRPE-19 sejtek: ARPEPE ARPEPE: kutatási publikációk

Az alábbiakban néhány érdekes kutatási publikáció található, amelyekben az ARPE-19 retinális pigment epithel sejtek szerepelnek.

Az ARPE-19 sejtek mikroRNS-válaszainak értékelése az oxidatív stresszel szemben

Ez a kutatási cikk 2018-ban jelent meg a Cutaneous and Ocular Toxicology című folyóiratban. Ez a tanulmány értékelte a miRNS-expressziót az ARPE-19 humán retinális pigmentepithel sejtekben hidrogén-peroxid kezeléssel kiváltott oxidatív stresszre adott válaszként.

Az ARPE-19 kondicionált közeg elősegíti a zsírból származó mesenchymális őssejtek neurális differenciálódását

A World Journal of Stem Cells (2021) című folyóiratban megjelent publikáció azt javasolta, hogy az ARPE-19 sejtek kondicionált médiuma olyan növekedési faktorokat tartalmaz, amelyek elősegítik a zsírszövetekből származó mesenchymális őssejtek neurális differenciálódását.

A kvercetin gátolja az IL-1β által kiváltott gyulladásos citokinek és kemokinek termelését az ARPE-19 sejtekben a MAPK és az NF-κB jelátviteli útvonalakon keresztül

Ez a tanulmány az International Journal of Molecular Sciences című folyóiratban jelent meg (2019). Megállapítja, hogy a kvercetin a MAPK és az NF-κB kaszkádok aktiválódásának megakadályozásával védi az IL-1β által stimulált kemokinek felszabadulását az ARPE-19 sejtekben, így javítva a gyulladásos választ.

A resveratrol modulálja a SIRT1 és a DNMT funkcióit, és helyreállítja a LINE-1 metilációs szintjét az ARPE-19 sejtekben oxidatív stressz és gyulladás hatására

Ez a kutatási cikk az International Journal of Molecular Sciences című folyóiratban jelent meg (2018). Ebben a tanulmányban az oxidatív stressz és a gyulladás lehetséges hatásait vizsgálták a SIRT1 (Sirtuin 1) és a DNMT-k (DNS-metiltranszferázok) funkcióira, valamint a LINE-1 (long interspersed nuclear element-1) metilációjára ARPE-19 sejtekben.

A Chrysanthemum boreale virágkivonatok védő hatása az A2E által kiváltott retinakárosodással szemben ARPE-19 sejtekben

Az Antioxidants (2022) című szaklapban megjelent cikk szerint a Chrysanthemum boreale virágkivonatok védőhatást fejtenek ki az N-retinilidén-N-retiniletanolamin (A2E) által kiváltott retinakárosodással szemben ARPE-19 sejtekben.

6.források az ARPE-19 sejtvonalhoz: ARPEPE ARPEPE: Protokollok, videók és még sok más

Az ARPE-19 egy széles körben használt retina epithel sejtvonal. Az ARPE-19 sejttenyésztési és transzfekciós protokollokat tartalmazó, rendelkezésre álló forrásokat itt soroljuk fel:

ARPE-19 transzfekció: Ez a videó lépésről lépésre mutatja be az ARPE-19 sejtvonal transzfekciós protokollját.

Itt található néhány forrás, amely az ARPE-19 sejttenyésztési protokollt írja le:

ARPE-19 sejttenyésztési protokoll: Ez a link az ARPE-19 sejtek tenyésztésével és fenntartásával kapcsolatos információkat tartalmaz. Tartalmazza az ARPE-19 táptalajra, a tenyésztési körülményekre, a szubkultúrázási protokollokra, valamint a proliferatív és kriokonzervált kultúrák kezelésére vonatkozó információkat.

Hivatkozások

Schnichels, S., et al., Retina in a dish: Cell cultures, retinal explants and animal models for common diseases of the retina. Progress in retinal and eye research, 2021. 81: p. 100880.
Sun, H. és X. Kang, A hsa_circ_0041795 hozzájárul a magas glükóz által kiváltott humán retinális pigment epithel sejtek (ARPE 19) károsodásához a miR-646 szivacsozásán és a VEGFC aktiválásán keresztül. Gén, 2020. 747: p. 144654.
Yang, J., et al., Silenced SNHG1 Inhibited Epithelial-Mesenchymal Transition and Inflammatory Response of ARPE-19 Cells Induced by High Glucose. J Inflamm Res, 2021. 14: p. 1563-1573.
Arumugam, B., et al., Syzygium malaccense-ből származó miricetin-származékok védő hatása a hidrogén-peroxid által kiváltott stressz ellen ARPE-19 sejtekben. Molekuláris látás, 2019. 25: p. 47.
Kim, J., K. Cho és S.-Y. Choung, A Prunella vulgaris var. L kivonat védő hatása a kék fény által kiváltott károsodások ellen ARPE-19 sejtekben és egér retinában. Free Radical Biology and Medicine, 2020. 152: p. 622-631.