A "Passage Number" megértése

A "passzázsszám" fogalma a sejtkultúra központi eleme, és arra utal, hogy egy sejtvonalat hányszor szubkultúráztak vagy vittek át friss táptalajra a kriokonzerválásból vagy a referencia sejtbankból való átvétel után. Ez a mérőszám kulcsfontosságú a sejtkultúra vonalának és történetének nyomon követésében.

A folyamat áttekintése

• A rutinszerű sejttenyésztési gyakorlatban, amikor a sejtek elérnek egy bizonyos sűrűséget, a növekedés fenntartása és a túltengés megelőzése érdekében új táptalajba helyezik át őket. Minden ilyen áthelyezést passage-ként rögzítünk.
• Hagyományosan, amikor egy sejtvonalat például a 60-as passzázsnál kaptunk a letétbe helyezőtől, akkor ezzel a passzázsszámmal folytattuk, és minden egyes szubkultúrával növeltük. Ez a gyakorlat, miközben fenntartotta a történeti szálakat, gyakran vezetett ahhoz, hogy a kezdetektől fogva magas passzázsszámokat kaptunk. Tekintettel bizonyos sejtvonalak, például az 1951-ben létrehozott HeLa vonal kiterjedt és gyakran évtizedekig tartó használatára, nem lehetséges meghatározni a sejtvonal kezdete óta eltelt passzázsok teljes számát.
• A sejttenyésztési folyamataink egyértelműségének és minőségének javítása érdekében 2023 elején felülvizsgáltuk ezt a megközelítést. Mostantól kezdve, amikor új fiolából indítunk tenyészetet, függetlenül a letétbe helyezőtől származó passzázsszámtól, minden egyes gyártott tétel esetében újraindítjuk és az első passzázstól kezdve újrakezdjük a számolást

Indoklás

A passziválás létfontosságú eljárás a sejtkultúrák egészségének és kutatási célú felhasználhatóságának biztosítása érdekében. Ha a sejtek túlszaporodnak, kontaktgátlás lép fel bennük, ami csökkenti a proliferációs sebességüket, ami hátrányosan befolyásolhatja a kísérleti eredményeket. E problémák mérséklése érdekében a Cytion szigorúan ellenőrzi a sejtek sűrűségét, amelyeknél a szubkultiváció történik, így alacsony passzázsszámot tart fenn a sejtvonalak gyártása során. Ez az elővigyázatosság segít megelőzni a túlzott passzázs káros hatásait, például a morfológiai rendellenességeket, a növekedési sebesség változásait és a genetikai driftet, amelyek miatt a sejtek jelentősen eltérhetnek eredeti állapotuktól. A hosszabb ideig tartó szubkultiválás a mikrobiális szennyeződés kockázatát is növelheti.

Ígéretünk

Biztosítjuk, hogy a kutatóknak szállított sejtek a lehető legközelebb álljanak az eredeti genetikai felépítéshez és fenotípusos jellemzőkhöz, növelve ezzel a kísérleti adatok megbízhatóságát. Továbbá minden egyes passzázs aprólékos dokumentálásával a Cytion hozzájárul a kutatások nyomon követhetőségéhez és reprodukálhatóságához, ami a sejttenyésztés magas szintű gyakorlatát tükrözi. A kutatókat arra ösztönzik, hogy a sejtkultúrák egészségének és történetének referenciájaként vezessenek pontos nyilvántartást a passzázsszámokról, mind a tenyésztőedényeken, mind a laboratóriumi jegyzetfüzetükben.