U87MG sejtek – Glioblastoma-kutatás az U87MG felhasználásával és annak hatása az agyrák-kutatásokra
Az U-87 MG, az emberi primer glioblastoma sejtvonal, széles körben használatos a biológiai kutatásokban. Ezeket a sejteket különösen az idegtudomány és az immuno-onkológia területén alkalmazzák.
- Növekedési tápközeg
- Az U-87 MG sejtvonalat EMEM-ben (Eagle minimális esszenciális tápközeg) tenyésztik, amelyhez 1,0 g/l L-glükózt, 2,0 mM L-glutamint, 2,2 g/l NaHCO3-t, 1% NEAA-val, 1 mM nátrium-piruváttal és 10% FBS-oldattal dúsított EMEM-ben (Eagle minimális esszenciális tápközeg) tenyésztik. A tápközeget 2–3 naponta cserélni kell.
- Duplázódási idő
- Az U 87 MG sejtek populációjának duplázódási ideje 18–38 óra között mozog.
- Növekedési típus
- Az U 87 MG egy adhezív sejtvonal. A sejtek hosszúkás alakúak és monorétegben növekednek.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — U-87 MG megrendelése
- Az U-87 MG sejtvonal általános jellemzői és eredete
- Az U-87 MG sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
- Az U-87 MG sejtek előnyei és hátrányai
- Az U-87 MG sejtekkel kapcsolatos kutatási alkalmazások
- Rendelje meg még ma az U-87 MG glióma sejtvonalat
- U-87 MG sejtvonal: Kutatási publikációk
- Források az U-87 MG sejtekhez: protokollok, videók és egyebek
- Betekintés az U-87 MG glióma kutatásába: Gyakran feltett kérdések
- Hivatkozások
- Gyakran feltett kérdések
Az U-87 MG sejtvonal általános jellemzői és eredete
Ez a szakasz az U87 sejtvonal eredetét és általános jellemzőit ismerteti. Megtudhatja, mik az U-87 MG sejtek? Honnan származik az U87 sejt? Mi az U-87 MG teljes neve? Milyen nagyok az U87 sejtek? Mi az U87 sejtvonal morfológiája?
- Az U87 sejtvonal egy glioblastoma, asztrocitoma sejtvonal. 1966-ban hozták létre az Uppsalai Egyetemen. A sejteket egy glioblastomában szenvedő, 44 éves kaukázusi férfitől nyerték. Ezt a sejtvonalat hivatalosan U 87 MG-nek nevezik, ami az Uppsala 87 Malignant Glioma rövidítése.
- Az U 87 MG sejtek epiteliális sejtekhez hasonló morfológiát mutatnak.
- Az U 87 MG sejtek átmérője 12–14 µm között mozog.
- Ez az emberi glioblastoma sejtvonal hipodiploid, és a sejtpopuláció körülbelül 48%-ában a kromoszómaszám 44. Ugyanakkor a sejtpopuláció 5,9%-ában magasabb ploidiaság is előfordul.
Az U-87 MG sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
Mielőtt az U 87 MG sejtekkel dolgozna, ismernie kell a glioblastoma sejtek tenyésztésének alábbi kulcsfontosságú szempontjait. Különösen a következőket kell tudnia: Mennyi az U 87 MG sejtek populáció-megduplázódási ideje? Milyen táptalajt használnak az U87 sejtek tenyésztéséhez? Mekkora az U-87 MG sejtvonal beültetési sűrűsége?
Az U-87 MG sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Populációduplázódási idő:
Az U 87 MG sejtek populáció-duplázódási ideje 18–38 óra között mozog.
Adherens vagy szuszpenziós:
Az U 87 MG egy adhezív sejtvonal. A sejtek hosszúkás alakúak és monorétegben növekednek.
Beültetési sűrűség:
Az U 87 MG glioblastoma sejtvonalat 1 x 104 sejt/cm2 sejtsűrűséggel ajánlott beültetni. Az adhezív U87 sejteket 1 x PBS-sel mossuk át, majd Accutase oldattal inkubáljuk. Ezután a diszociált sejteket centrifugáljuk és visszanyerjük. A sejteket óvatosan újra szuszpendáljuk, majd növekedési tápközeget tartalmazó új lombikokba adjuk.
Növekedési tápközeg:
Az U 87 MG sejtvonalat EMEM-ben (Eagle minimális esszenciális tápközeg) tenyésztik, amelyhez 1,0 g/L L-glükózt, 2,0 mM L-glutamint, 2,2 g/L NaHCO3-t, 1% NEAA-val, 1 mM nátrium-piruváttal és 10% FBS-oldattal kiegészített EMEM-ben (Eagle minimális esszenciális tápközeg) tenyésztik. A tápközeget 2–3 naponta cserélni kell.
Növekedési feltételek:
Az U-87 MG sejtek optimális növekedéséhez 5%-os CO₂-ellátású, párásított inkubátorra és 37 °C-os hőmérsékletre van szükség.
Tárolás:
Az U87 sejteket folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150 °C alatti hőmérsékleten tárolják a glioblastoma sejtek maximális életképességének fenntartása érdekében.
Fagyasztási eljárás és táptalaj:
Az U87 MG sejtek fagyasztásához a CM-1 vagy CM-ACF fagyasztóközeg alkalmas. Lassú fagyasztási folyamatot ajánlunk, mivel ez megakadályozza a sejtek sokkhatását és védi a sejtek életképességét.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott U-87 MG sejtvonalat tartalmazó fiolákat 37 °C-os vízfürdőben olvasztják fel. A sejtekhez tenyésztőközeget adnak, újra szuszpendálják őket, majd új lombikokba helyezik át tenyésztés céljából. Ezzel ellentétben az U87 sejteket centrifugálhatják a fagyasztóközeg eltávolítása érdekében, majd tenyészthetik őket.
Biológiai biztonsági szint:
Az U 87 MG sejtkultúrák kezeléséhez 1. biológiai biztonsági szint szükséges.
Az U-87 MG sejtek előnyei és hátrányai
Amikor egy sejtvonalra gondolunk, az első kérdés, ami eszünkbe jut: Milyen előnyei vannak az U-87 MG sejtek használatának? Milyen hátrányai vannak az U-87 sejteknek?
Előnyök
Az U-87 MG sejtvonalakat széles körben használják a kutatásban. A sejtvonalhoz kapcsolódó néhány előny a következő:
Előnyök
- Könnyen tenyészthetők: Az U-87 MG sejtek tenyésztése egyszerű. Nincs szükségük különleges vagy bonyolult tenyésztési feltételekre.
- Homogenitás: Az U-87 MG egy homogén sejtvonal. A populációban a legtöbb sejt azonos genetikai felépítéssel rendelkezik, és így hasonló jellemzőkkel bír. Ezeket a sejteket sejtfolyamatok tanulmányozására, gyógyszerszűrésre és tesztelésre használják.
- Jól jellemzett: Ezt a glioblastoma sejtvonalat növekedési jellemzői, morfológiája és génkifejeződése alapján jól jellemezték, ami értékes kutatási eszközzé teszi.
Hátrányok
- Korlátozott alkalmazhatóság: Az U-87 MG egy glioblastoma sejtvonal, ezért alkalmazási területe elsősorban a glioblastomák és az azok mögött álló molekuláris mechanizmusok tanulmányozására korlátozódik. Más rákfajták vizsgálatára nem feltétlenül alkalmas.
Az U-87 MG sejteket felhasználó kutatási alkalmazások
Az U87MG glioblastoma sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban, különösen a glioblastoma kutatásában. Az U 87 MG sejtek néhány kutatási alkalmazása a következő:
- Rákbiológiai kutatás: Az U87 sejtvonalat a rák növekedésének és fejlődésének, az alapul szolgáló molekuláris mechanizmusoknak, a jelátviteli útvonalaknak és a tumor mikrokörnyezetének vizsgálatára használják. Egy 2020-ban publikált tanulmány egy glioblastoma in vitro modellt, az U-87 MG sejtvonalat használta a BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) gén terápiás célpontként való vizsgálatához. Az eredmények azt mutatták, hogy a BMAL1 gén gátolja a glioblastoma sejtek szaporodását, vándorlását és invázióját a ciklin B1, a metalloproteináz-9 és a foszfo-AKT génexpressziójának elnyomásával [1]. Egy másik, 2019-ben végzett kutatás szintén az U87 sejtvonalat használta, és azt vizsgálta, hogy a lipopoliszacharid által indukált tumor nekrózis faktor-alfa (LITAF) transzkripciós faktor expressziójának lecsökkentése fokozhatja a glióma sejtek sugárérzékenységét a FOXO-1 útvonal felregulációján keresztül. A LITAF p53-indukált 7. gén (PIG7) néven is ismert [2].
- Gyógyszerkutatás és -fejlesztés: Az U-87 MG sejtek felhasználhatók gyógyszerszűrési és tesztelési célokra, lehetővé téve a kutatók számára új potenciális rákellenes gyógyszerek azonosítását, valamint azok hatékonyságának és toxicitásának értékelését. Egy kutatásban az U-87 MG glioblastoma sejtvonalat használták az Inula helenium (L.) kivonat rákellenes és antioxidáns hatásainak értékelésére [3]. Hasonlóképpen, egy másik publikációban is említést tettek az U-87 sejtvonal felhasználásáról növényi kivonatok citotoxikus és apoptotikus hatásának vizsgálatára [4]. Ezen felül egy 2018-ban publikált kutatás a Nuphar növényekből kivont szeszkviterpén-alkaloidok citotoxikus hatását vizsgálta érzékeny és gyógyszerrezisztens U-87 MG sejtvonalakon [5].
Rendelje meg még ma az U87 MG glióma sejtvonalat!
U-87 MG sejtvonal: Kutatási publikációk
Íme néhány kiemelkedő kutatási publikáció, amely az U-87 MG sejtvonalat tárgyalja.
A Neuroreport 2018-as számában megjelent cikk szerint a hipoxia a PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α jelátviteli út szabályozása révén fokozhatja az emberi glioblastoma sejtek migrációját és invázióját.
Ez a tanulmány a Frontiers in Pharmacology folyóirat 2020-as számában jelent meg. A kutatási eredmények szerint az Eriodictyol nevű flavonoid rákellenes hatást fejt ki az U87 sejtvonalon, és gátolja a sejtek szaporodását és a metasztázist. A vegyület a PI3K/Akt/NF-κB jelátviteli út szabályozásával fejti ki daganatellenes tulajdonságait.
Az Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) folyóiratban megjelent kutatás arra utal, hogy a Xihuang pirulának nevezett kínai gyógynövénykészítmény a ROS által aktivált Akt/mTOR/FOXO1 kaszkád célzásával képes apoptózist indukálni az U87 sejtekben.
A LITAF a FoxO1-útvonalon keresztül fokozza az emberi glióma sejtek sugárérzékenységét
Ezt a kutatási cikket 2019-ben publikálták a „Cellular and Molecular Neurobiology” folyóiratban. A tanulmány szerint a LITAF transzkripciós faktor a FOXO-1 jelátviteli út szabályozásával gátolja a glióma sejtek aktivitását és fokozza azok sugárérzékenységét.
Ez a cikk a Biointerface Research in Applied Chemistry folyóiratban jelent meg (2019). A kutatók U87MG sejteket használtak a kurkuminnal töltött PLGA nanorészecskék citotoxikus hatásának vizsgálatához.
Források az U-87 MG sejtekhez: protokollok, videók és egyéb anyagok
Az U87MG glioblastoma sejtvonalat számos rákkutató laboratóriumban használják. Néhány, ezt a sejtvonalat bemutató forrás:
- Az U87 sejtvonal transzfekciója: Ez a dokumentum az U87MG sejtek transzfekciós protokollját ismerteti.
- U 87 MG sejtvonal transzfekciója: Ez a videó egy oktatóanyag, amely lépésről lépésre elmagyarázza az U87 sejtek transzfekciós protokollját.
Az U87 sejtek sejtkultúra-protokolljához kapcsolódó forrás az alábbiakban található:
- U87 MG sejtek: Ez a link alapvető információkat tartalmaz az U87MG sejtvonalról. Tartalmazza a sejtek osztásának, fagyasztásának és felolvasztásának rövid protokolljait.
Betekintés az U87 MG glioma kutatásába: Glilioma Glilioma: Gyakran ismételt kérdések
A glióma sejtvonalak, mint például az U87 glioblasztóma sejtek, emberi gliomákból származó tenyésztett sejtek, amelyeket széles körben használnak a rákkutatásban a tumor biológiájának, genetikájának és a gyógyszerekre adott válaszoknak a tanulmányozására. Modellként szolgálnak a tumor viselkedésének megértéséhez és a terápiás stratégiák teszteléséhez.
Az izogén sejtvonal egyetlen sejtből származó sejtekre utal, amelyek biztosítják a genetikai egységességet. A glióma kutatásában az izogén vonalak következetes modellt biztosítanak a genetikai változások és a tumor növekedésére és a kezelésekre adott válaszra gyakorolt hatásuk tanulmányozásához.
A glióma sejtvonalak DNS-profilja kritikus fontosságú a genetikai változások azonosítása, a tumorfejlődés megértése és a célzott terápiák kifejlesztése szempontjából. Segít a daganatok genetikai markerek, például az IDH1 mutációk alapján történő osztályozásában.
A sejttenyésztési táptalajban lévő szérum alapvető növekedési faktorokat, hormonokat és tápanyagokat biztosít a glióma sejtek számára. Összetétele azonban befolyásolhatja a kísérleti reprodukálhatóságot, ezért egyre gyakrabban alkalmaznak szérummentes vagy meghatározott szérumos körülményeket.
A glióma sejtvonalak sejtcitotoxicitását olyan vizsgálatokkal értékelik, mint az áramlási citometria, amely a sejtek egészségét, életképességét és pusztulását méri gyógyszerekkel vagy immunsejtekkel, például természetes ölősejtekkel (NK) történő kezelés után.
Az NK-sejtek citotoxicitása kritikus szerepet játszik a glióma kezelésének kutatásában, mivel az NK-sejtek előzetes szenzibilizáció nélkül képesek felismerni és elpusztítani a tumorsejteket. Az NK-sejtek és a glióma-sejtek közötti kölcsönhatások tanulmányozása segít olyan stratégiák kidolgozásában, amelyek fokozzák az NK-sejtek által közvetített tumortisztítást.
A kiindulási tumor összefüggést biztosít a tumor eredeti biológiai környezetével és jellemzőivel. Ennek megértése segít a sejtvonalakon végzett vizsgálatok eredményeinek a tényleges tumor viselkedésével és a betegek prognózisával való korrelálásában.
Az elektronmikroszkópia lehetővé teszi a glióma sejtvonalak sejtes és szubcelluláris struktúráinak részletes vizualizálását, ami elengedhetetlen a sejtmorfológia, a szervezeti állapot és a kezelést követő változások vizsgálatához.
Az NKG2D ligandum a tumorsejteken expresszálódik, és az NK sejtek NKG2D receptorához kötődik, citotoxikus választ váltva ki. Ennek a kölcsönhatásnak a tanulmányozása segít megérteni és potenciálisan fokozni a glióma elleni immunválaszt.
a 3D-s sejtkultúra-modellek pontosabban utánozzák a tumor mikrokörnyezetét, így jobb betekintést nyújtanak a glióma növekedésének, migrációjának és gyógyszerrezisztenciájának vizsgálatába. Ez a technika kulcsfontosságú a relevánsabb transzlációs onkológiai vizsgálatokhoz.
Hivatkozások
- Gwon, D.H. és munkatársai: A BMAL1 gátolja az U87MG sejtek szaporodását, vándorlását és invázióját a ciklin B1, a foszfo-AKT és a metalloproteináz-9 expressziójának csökkentése révén. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C. és munkatársai: A LITAF a FoxO1-útvonalon keresztül fokozza az emberi glióma sejtek sugárérzékenységét. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): 871–882. o.
- Koc, K. és munkatársai: az Inula helenium (L.) kivonat antioxidáns és rákellenes hatásai az emberi U-87 MG glioblastoma sejtvonalban. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): 658–661. o.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh és A. Ghasempour, Növényi kivonatok által kiváltott citotoxicitás és apoptózis indukció emlőrák-, bőrrák- és glioblastoma-sejtekben. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): 5131–5142. o.
- Fukaya, M. és munkatársai, A Nuphar-növényekből származó szeszkviterpén-alkaloidok citotoxicitása érzékeny és gyógyszerrezisztens sejtvonalak esetében. Food Funct, 2018. 9(12): 6279–6286. o.