T98G sejtvonal
A T98G sejtek egy humán glioblastoma sejtvonalat alkotnak, amelyet általában az orvostudományi kutatásokban használnak. Ezeket a sejteket elsősorban az agyrák kutatásában alkalmazzák a betegség kialakulásában szerepet játszó kulcsfontosságú sejtek és molekuláris tényezők vizsgálatára. Ezenkívül segítenek a kutatóknak az új rákellenes gyógyszerek szűrésében és tesztelésében, ami hozzájárulhat a gyógyszerfejlesztéshez.
A T98G sejtvonal általános jellemzői és eredete
A cikk ezen szakasza segít megismerni a T98G sejtvonal alapvető jellemzőit. Tartalmazza a sejtvonal eredetére, morfológiájára, méretére és ploidiájára vonatkozó információkat. Ezenkívül átfogó választ ad a következő kérdésekre: Mik a T98G sejtek? Milyen típusú sejt a T98G? Honnan származik a T98G? Melyek a T98G sejtvonal jellemzői? Mi az a T98G U87 glioblastoma sejtvonal?
- A T98G sejtvonalat GH Stein hozta létre. Fibroblaszt-szerű sejtekből áll, amelyeket egy 61 éves, glioblastoma multiforme-ban szenvedő kaukázusi férfi agyszövetéből nyertek ki [1].
- A T98G sejtek nem tumorigenikusak; meztelen egerekbe injekciózva nem okoznak daganatokat. A sejtkultúrában azonban megfelelő rögzítés mellett hajlamosak szaporodni.
- Ezek a sejtek fibroblaszt-szerű morfológiával rendelkeznek.
- A T98G glioblastoma sejtvonal hiperpentaploidiát mutat. A modális kromoszómaszám 128 és 132 között változik. A sejtpopuláció 1,39%-ában magasabb ploiditás fordulhat elő.
T98 vs. T98G
Mindkettő emberi glioblastoma sejtvonal, és hasonló eredetűek. Az egyetlen különbség a sejtvonalak között a kromoszómaszám. A T98G-nek majdnem kétszer annyi kromoszómája van, mint a T98-nak. Ezért a T98G-t a T98 poliploid változataként ismerik.
T98G és U87
Az U87 és a T98G egyaránt emberi glioblastoma sejtvonalak, amelyeket az agyrák kutatásában használnak. Az U87 agresszívebb fenotípust mutat, mint a T98G GBM.
2. A T98G sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
A sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk ismerete elengedhetetlen, mielőtt megkezdené a vele kapcsolatos munkát. Ez segít abban, hogy a laboratóriumban könnyen és kényelmesen kezelhesse a sejtvonalat. Tudnia kell: Mennyi a T98G sejtvonal duplázódási ideje? Melyik tenyésztőközeg a legalkalmasabb a T98G sejtek számára? Melyek a T98G sejtek növekedési jellemzői? Mekkora a T98G sejtek beültetési sűrűsége? Hogyan kell fagyasztani a T98G sejteket?
A T98G sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A T98G sejtek hozzávetőleges duplázódási ideje 40 óra. Ez a tenyésztési körülményektől függően változhat.
Adherens vagy szuszpenziós:
A T98G sejtek adhezívek. A tenyésztőedények aljára tapadnak, és monoréteget képeznek.
Osztási arány:
A T98G sejteket 1:2–1:5 osztási arányban szubkultiválják. Ehhez a sejteket először 1X PBS-pufferrel mossák, majd szobahőmérsékleten 8–10 percig inkubálják átültető oldattal (Accutase). Az inkubálás után a levált sejteket friss tenyésztőközegbe adjuk, majd centrifugáljuk. Ezután a leülepült sejtpelletet óvatosan újra szuszpendáljuk, és a sejteket tenyésztőközeget tartalmazó tenyésztőedénybe adagoljuk.
Növekedési tápközeg:
A T98G sejtek tenyésztéséhez 10% borjúszérumot, 2 mM L-glutamint, 2,2 g/L NaHCO3-t és EBSS-t tartalmazó EMEM táptalajt használnak. A táptalajt hetente 3–4 alkalommal kell cserélni.
Növekedési körülmények:
A T98G sejteket 37 °C-ra beállított, párásított inkubátorban tartjuk, amely CO₂-ellátáshoz van csatlakoztatva.
Tárolás:
A fagyasztott sejteket -150 °C alatt vagy folyékony nitrogén gőzfázisában lehet tárolni a sejtek életképességének hosszú távú megőrzése érdekében.
Fagyasztási eljárás és tápközeg:
A T98G sejteket CM-1 vagy CM-ACF sejtfagyasztó tápközegben ajánlott fagyasztani. Ehhez lassú fagyasztási eljárást javasolunk, amely során a hőmérséklet percenként legfeljebb 1 °C-kal csökken. Ez megakadályozza a sejtek hőhatását és megőrzi életképességüket.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott sejteket óvatosan felolvasztjuk úgy, hogy 40–60 másodpercre 37 °C-ra előmelegített vízfürdőbe helyezzük őket. Ezután friss tenyészközegben újra szuszpendáljuk őket, és átvisszük egy új lombikba. 24 órás inkubáció után a tápközeget kicseréljük, hogy eltávolítsuk a fagyasztóközeg összetevőit.
Biológiai biztonsági szint:
A T98G-tenyészeteket a 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumban tartják.
Közzététel: 2023 | Utolsó felülvizsgálat: 2026. május
- T98G sejtvonal: Előnyök és hátrányok
- A T98G sejtek alkalmazási területei
- 2. A T98G sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- A T98G sejtek tenyésztésének legfontosabb szempontjai
- A T98G sejtvonal általános jellemzői és eredete
- 5. A T98G sejteket bemutató kutatási publikációk
- Források a T98G sejtekhez: protokollok, videók és egyéb anyagok
- Gyakran feltett kérdések
A T98G sejtvonal: előnyök és hátrányok
A T98G egy széles körben használt, emberi eredetű glioblastoma sejtvonal. Számos előnye és hátránya van, amelyek megkülönböztetik más sejtvonalaktól. A cikk ezen szakaszában néhány figyelemre méltó előnyt és hátrányt tárgyalunk.
Előnyök
A T98G sejtek előnyei a következők:
-
Jól jellemzett
Jól bevált és jól jellemzett sejtvonal. A szakirodalomban széles körben tanulmányozták és dokumentálták.
-
In vitro modell
A glioblastoma, a legagresszívebb agydaganat jellemzőit tükrözi. Értékes eszköz a betegség kutatásához, a biológiai folyamatok megértéséhez és a kezelések fejlesztéséhez.
Hátrányok
A T98G sejtekkel kapcsolatos hátrányok a következők:
-
Heterogenitás
A T98G sejtpopuláció genetikai heterogenitása a kísérleti eredmények következetlenségéhez vezethet, és bonyolíthatja az adatok értelmezését.
A T98G sejtek alkalmazásai
A T98G sejtvonal értékes eszköz a rákkutatásban. A T98G sejtek néhány főbb kutatási alkalmazását az alábbiakban soroljuk fel:
- Rákkutatás: A T98G sejtvonal értékes eszköz a glioblastoma daganatok biológiájának vizsgálatában. Ezeket a sejteket elsősorban a glioblastoma kialakulásának és progressziójának hátterében álló bonyolult molekuláris útvonalak tanulmányozására használják. Ezenkívül a daganat növekedését elősegítő genetikai mutációk és egyéb ráksejt-mechanizmusok azonosítására is alkalmazzák őket. Yang Chen és munkatársai ezekkel a sejtekkel végeztek kutatásokat, és megállapították, hogy a miRNA-21 túltermelése csökkenti a PDCD4 (programozott sejthalál fehérje 4) szintjét a T98G sejtekben. Ez a PDCD4 által közvetített T98G-sejt apoptózis gátlásához vezet. Így a tanulmány a miRNA-21-et javasolja potenciális célpontként a terápiák fejlesztéséhez [2]. Ehhez a tanulmányhoz hasonlóan Fanqiang Kong és munkatársai a mikroRNS-15a szerepét vizsgálták a T98G glioblastoma sejtek szaporodásában és inváziójában. Megállapították, hogy a miRNA-15a-5p a sejtadhéziós molekula 1-et (CADM1) célba véve elősegíti ezeket a sejtfolyamatokat [3].
- Gyógyszervizsgálatok és terápiák fejlesztése: A T98G kiváló in vitro glioblastoma-modellként szolgál új gyógyszerek szűréséhez, valamint platformot biztosít a potenciális rákterápiák hatékonyságának értékeléséhez. A kutatók emellett számos vegyületet és terápiát tesztelnek annak érdekében, hogy azonosítsák és felfedezzék a legígéretesebb glioblastoma-ellenes tulajdonságokkal rendelkező gyógyszerjelölteket. Ez új gyógyszerek és kezelési stratégiák kifejlesztéséhez vezet, reményt kínálva a glioblastoma-betegek számára. Egy ilyen tanulmány a corilagin nevű természetes vegyület rákellenes potenciálját vizsgálta a temozolomid-rezisztens T98G GBM sejtvonalban. A tanulmány eredményei arra utalnak, hogy a corilagin a temozolomiddal kombinálva erőteljesebb antiproliferatív és antiapoptotikus hatást vált ki a sejtekben [4].
5. A T98G sejtekkel kapcsolatos kutatási publikációk
Az alábbiakban néhány érdekes és gyakran hivatkozott kutatási publikációt mutatunk be a T98G glioblastoma sejtvonalról.
Az SR9009, egy REV-ERB agonista kemoterápiás hatása az emberi glioblastoma T98G sejtekre
Ez az ASN Neuro folyóiratban (2019) megjelent publikáció az SR9009 nevű REV-ERB agonista rákellenes hatásait vizsgálta a T98G glioblastoma sejtekre.
A Neurochemical Research folyóiratban (2019) megjelent kutatási cikk azt állította, hogy a nátrium-butirát és a kvercetin szinergisztikusan gátolják a védő autofágiát a T98G sejtekben, és fokozzák a sejtek apoptózisát.
A Genes (2023) folyóiratban megjelent tanulmányban a T98G hipoxiához alkalmazkodott sejtvonalat RNS-szekvenálásnak vetették alá, és az IRE1-et (inozitol-igénylő enzim 1) ígéretes terápiás célpontként javasolták.
Ez a cikk az Oncology Letters (2017) folyóiratban jelent meg. A tanulmány azt vizsgálta, hogy a miRNA-548c-3p a T98G onkogéneket (c-Myb) veszi célba a T98G sejtek szaporodásának és vándorlásának gátlása érdekében.
A Journal of Medicinal Plants Research (2011) folyóiratban megjelent cikk szerint a Dracocephalum tanguticum kloroform-kivonata a kaszpáz-3, a Bax és a p21 gének szabályozásával gyakorol antiproliferatív hatást a T98G sejtekre.
Források a T98G sejtekhez: protokollok, videók és egyéb anyagok
Itt találhatók a T98G sejtek tenyésztésére és transzfekciójára vonatkozó protokollokat tartalmazó források.
- T98G-transzfekció: Ez a kutatási cikk tartalmazza a T98G-transzfekció protokollját. Röviden ismerteti a módszert és a szükséges reagenseket.
Az alábbi linkek nagy segítséget nyújtanak a T98G sejtkultúra-protokoll elsajátításában, és megkönnyítik a vele való munkát.
- T98G sejtek: Ez a weboldal fontos információkat tartalmaz a T98G sejtkultúra-protokollokkal kapcsolatban, beleértve az alkultúrázást, valamint a proliferatív és kriokonzervált kultúrák kezelését. Ezenkívül segítséget nyújt a sejtnövekedési táptalajok, a tenyésztési feltételek és a duplázódási idő megismerésében is.
Hivatkozások
- Haehl, E., Endoteliális sejtek által kiváltott sugárrezisztencia glioblastómában. 2021, Tübingeni Egyetem.
- Chen, Y. és munkatársai: A mikroRNS-21 lecsökkenti a PDCD4 tumor-szupresszor expresszióját az emberi glioblastoma T98G sejtben. Cancer Letters, 2008. 272(2): 197–205. o.
- Kong, F. és munkatársai: A mikroRNS-15a-5p a sejtadhéziós molekula 1-et célba véve elősegíti a T98G glioblastoma sejtek proliferációját és invázióját. Oncology Letters, 2021. 21(2): 1–1. o.
- Milani, R. és munkatársai: A corilagin magas szintű apoptózist indukál a temozolomid-rezisztens T98G glióma sejtvonalban. Oncol Res, 2018. 26(9): 1307–1315. o.