PANC1 sejtek: kulcsfontosságú szerepük feltárása a hasnyálmirigyrák-kutatásban
A PANC1 egy humán epiteliális tumorsejtvonal, amelyet gyakran használnak a rákkutatásban. In vitro modellként alkalmazzák a hasnyálmirigyrák biológiájának, karcinogenezisének, valamint az azt alátámasztó sejtes és molekuláris mechanizmusok tanulmányozására, továbbá a potenciális rákellenes terápiák értékelésére.
- Növekedési tápközeg
- A PANC1 sejtek tenyésztéséhez DMEM-et használnak, amely 10% borjúszérumot (FBS), 4,5 g/l glükózt, 4 mM L-glutamint, 1,5 g/l NaHCO3-t és 1,0 mM nátrium-piruvátot tartalmaz. A PANC1 sejtek táptalaját hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
- Duplázódási idő
- A PANC1 hasnyálmirigy-sejtvonal mérsékelt szaporodási sebességet mutat, duplázódási ideje 25,83 ± 2,03 óra.
- Növekedési típus
- A PANC1 egy epiteliális adhéziós sejtvonal.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — PANC1 megrendelése
A PANC1 sejtvonal általános jellemzői és eredete
Ez a cikk a PANC1 sejtvonalról nyújt alapvető ismereteket. Például: mit jelent a PANC-1? Mik a PANC-1 sejtek? Mi a PANC1 eredete? Milyen a PANC 1 morfológiája? Milyen méretűek a PANC 1 sejtek?
- A PANC1 hasnyálmirigyrákos sejtvonalat egy 56 éves, hasnyálmirigy-csatorna-karcinómában szenvedő kaukázusi férfitől nyerték. Ezt a folyamatos tumorsejtvonalat Michael Lieber és munkatársai hozták létre 1975-ben [1].
- A PANC1 sejtek differenciálódási képessége gyenge, de potenciálisan képesek áttétek képzésére.
- Ezek az emberi hasnyálmirigyrákos sejtek hámsejtszerű morfológiát mutatnak.
- A PANC 1 hipertriploid kariotípussal rendelkezik. A PANC 1 sejtvonalra vonatkozóan jelentett modális kromoszómaszám 63. A genomban egy kis gyűrűkromoszóma és három jól elkülöníthető markerkromoszóma található.
A PANC1 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
Ez a szakasz a PANC1 sejtkultúrával kapcsolatos információkat tartalmazza. A sejtvonal tenyésztési feltételeinek ismerete megkönnyíti a munkát. A következő témákról fogunk beszélni: Mennyi a PANC-1 sejtek duplázódási ideje? Hogyan tenyésztjük a PANC1 sejteket? A PANC 1 sejtek adhezívek? Mi a PANC 1 sejtkultúra-táptalaj?
A PANC1 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A PANC-1 hasnyálmirigy-sejtvonal mérsékelt szaporodási sebességet mutat, duplázódási ideje 25,83 ± 2,03 óra.
Adherens vagy szuszpenziós:
A PANC-1 egy adhezív epiteliális sejtvonal.
Beültetési sűrűség:
A PANC1 sejteket 1 x 10⁴ sejt/cm² sűrűséggel vetjük be. A bevetéshez a sejteket PBS-sel (foszfátpuffer-sóoldat) mossuk, majd disszociációs oldattal, azaz Accutase-szel inkubáljuk 8–10 percig szobahőmérsékleten. A levált sejteket friss tápközegben reszuszpendálják, majd centrifugálják. A sejtpelletet gondosan reszuszpendálják a tenyésztőközegben, majd a sejteket új lombikokba öntik a szaporodáshoz.
Növekedési tápközeg:
A PANC1 sejtek tenyésztéséhez 10% borjúszérummal (FBS), 4,5 g/l glükózzal, 4 mM L-glutaminnal, 1,5 g/l NaHCO3-mal és 1,0 mM nátrium-piruváttal kiegészített DMEM-et használnak.
A PANC1 sejtek táptalaját hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
A PANC1 sejteket 37 °C hőmérsékletű, párásított inkubátorban, 5%-os CO₂-koncentráció mellett tenyésztik.
Tárolás:
A PANC sejteket a sejtek életképességének megőrzése érdekében folyékony nitrogén gőzfázisában vagy elektromos ultrahideg-tárolóban (-150 °C alatti hőmérsékleten) tárolják.
Fagyasztási eljárás és tápközeg:
A PANC1 sejteket CM-1 vagy CM-ACF táptalajban fagyasztják le. A PANC1 sejtek fagyasztásához olyan lassú fagyasztási módszert alkalmaznak, amely percenként csupán 1 °C hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé.
Felolvasztási folyamat:
A sejteket 37 °C-os vízfürdőben olvasztják fel, amíg csak egy kis jégdarab marad. A felolvasztott sejteket táptalajban reszuszpendálják, majd centrifugálják, hogy eltávolítsák a fagyasztó táptalaj maradványait. A sejtpalettát gondosan újra szuszpendálják, majd a sejteket 5 x 10⁴ sejt/cm² sűrűséggel új tenyésztőedényekbe adagolják tenyésztés céljából. A PANC1 sejtek tapadásához közel 48 óra szükséges.
Biológiai biztonsági szint:
A PANC1 sejtkultúrához az 1. biológiai biztonsági szint ajánlott.
A PANC1 sejtek előnyei
Minden sejtvonalnak megvannak a maga előnyei és hátrányai, amelyek megkülönböztetik a többitől. Ez a szakasz a PANC1 sejtvonal előnyeit és hátrányait ismerteti.
Előnyök
A PANC1 sejtek fő előnyei a következők:
-
In vitro hasnyálmirigyrák-modell
A PANC1 az emberi hasnyálmirigy-csatorna adenokarcinóma jellemzőit tükrözi. Ezért in vitro modellként használják a hasnyálmirigy-daganat kialakulásának, növekedésének és a kapcsolódó molekuláris mechanizmusok tanulmányozására.
-
Genetikai mutációk
A PANC1 sejtek számos, a hasnyálmirigy-daganatokban előforduló mutációt hordoznak, így értékesek a betegséggel kapcsolatos jelátviteli útvonalak tanulmányozásához. Ezek a mutációk főként a PANC1 KRAS és a PANC1 P53 mutációkat foglalják magukban.
alkalmazásai
A PANC1 emberi ráksejtvonalat gyakran alkalmazzák a hasnyálmirigyrák kutatásában. Itt néhány gyakori kutatási területet említünk.
- Rákbiológia: A PANC1 sejteket a hasnyálmirigyrák kialakulásának, növekedésének és számos egyéb sejtfolyamat – többek között a proliferáció, az invázió, a migráció és a sejthalál – vizsgálatára használják. Ezen felül a hasnyálmirigyrák kialakulásában szerepet játszó különböző sejtjelátviteli útvonalakat, genetikai mutációkat és molekuláris mechanizmusokat is tanulmányozzák. Egy 2018-ban végzett tanulmány PANC1-sejteket használt, és megállapította, hogy az omeprazol az aril-hidrokarbon-receptor által közvetített JNK-indukció révén gátolja a hasnyálmirigy-daganatsejtek invázióját. A JNK aktiválása viszont más sejtgeneket modulál, és a rákkeltő tényezők gátlását eredményezi [3]. Hasonlóképpen egy másik tanulmány kimutatta, hogy az AKT és az ERK jelátviteli útvonalak részt vesznek az emberi hasnyálmirigyrákos PANC1 sejtek szaporodásában, inváziójában és migrációjában [4].
- Gyógyszerszűrés: A PANC1 sejtvonal értékes eszközként szolgál a potenciális rákellenes gyógyszerek vagy terápiák szűréséhez. A kutatók általában a gyógyszerrezisztenciát vizsgálják, és a potenciális gyógyszerjelöltek hatásmechanizmusait tanulmányozzák. Samira Alipour és munkatársai által 2022-ben végzett kutatások arra utaltak, hogy a Portulaca oleracea kivonat apoptotikus és citotoxikus hatást fejt ki a PANC1 sejtekre, és így potenciális hasnyálmirigyrák-kezelésként szolgálhat. A növény ezeket a daganatellenes hatásokat a CDK1 és a P53 gének szabályozásával fejti ki [5].
PANC-1 sejtek vásárlása: az út a hasnyálmirigyrák-kutatás felé
A PANC1-sejteket bemutató publikációk
Ebben a szakaszban néhány érdekes és gyakran hivatkozott, a PANC1 sejteket bemutató kutatási publikációt említünk.
Ezt a kutatást 2019-ben publikálták az „Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology” című nemzetközi folyóiratban. A tanulmány szerint a Scutellaria barbata növényből zöld szintézissel előállított arany nanorészecskék daganatellenes hatást fejtenek ki a PANC1 hasnyálmirigyrákos sejtvonal ellen.
A „Toxicology and Environmental Health Sciences” (2020) című folyóiratban megjelent cikk a Delonix regia kivonat és az ezüst-nanorészecskék rákellenes potenciálját vizsgálta két emberi ráksejtvonalon, nevezetesen a PANC1-en és az MCF7-en.
Aranynanorészecskék szintézise a Panax notoginseng leveléből és azok rákellenes hatása a PANC-1 hasnyálmirigyrákos sejtvonalon
Ez a cikk 2019-ben jelent meg az Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology című nemzetközi folyóiratban. A tanulmány a Panax notoginseng növény levélkivonatából szintetizált arany-nanorészecskék terápiás hatásait vizsgálta a PANC1 hasnyálmirigyrák-sejtvonalon.
A KS-58 előállítása, mint az első, in vivo rákellenes hatást mutató K-Ras (G12D)-gátló peptid
Ezt a tanulmányt a Nature Scientific Reports folyóiratban tették közzé (2020). A kutatók egy KS-58 nevű peptidet állítottak elő, amely in vitro körülmények között szelektíven gátolja a PANC-1 sejtvonalban előforduló KRAS G12D mutációt.
Az izorhamnetin az S-fázis leállítása révén gátolja a PANC-1 hasnyálmirigyrákos sejtek szaporodását
Ezt a kutatást 2018-ban a Biomedicine & Pharmacotherapy folyóiratban tették közzé. A tanulmány szerint az izorhamnetin nevű flavonoid a sejtciklus S-fázisának leállítása révén gátolja a PANC-1 sejtek szaporodását.
Egy új LIMK2-gátló blokkolja a Panc-1 tumor növekedését egér-xenotranszplantációs modellben
Az Oncoscience folyóiratban (2014) megjelent tanulmány azt állította, hogy egy új LIMK2-gátló gátolja a tumor növekedését a PANC-1 egér-xenotranszplantációs modellben.
Források a PANC1 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyéb anyagok
Az alábbiakban felsorolunk néhány, a PANC 1 sejtekkel kapcsolatos forrást.
- PANC-1 transzfekció: Ez a videó egy oktatóanyag a PANC-1 transzfekciós protokoll elsajátításához.
- Sejtvonal szubkultiválása: Ez a videó az adhezív sejtvonalak szubkultiválásának általános protokollját mutatja be.
Az alábbi linkek a PANC1 sejtek sejtkultúrájának protokollját tartalmazzák.
- PANC 1 sejtek: Ez a link a PANC1 sejtvonal felolvasztására és szubkultiválására vonatkozó protokollt tartalmazza.
- PANC 1 sejtkultúra: Ez a weboldal segítséget nyújt a PANC 1 sejtkultúrával kapcsolatos összes fontos információ megismerésében, beleértve a PANC 1 sejtkultúra táptalaját, a sejtek felolvasztását, fagyasztását és az áttenyésztési protokollt.
GYIK: A PANC-1 sejtek és alkalmazásaik ismertetése
Hivatkozások
- Lieber, M. és munkatársai: Folyamatos tumorsejtvonal (PANC-1) létrehozása emberi exokrin hasnyálmirigy-karcinómából. International Journal of Cancer, 1975. 15(5): 741–747. o.
- Kim, Y. és munkatársai: Hasnyálmirigy-duktális adenokarcinóma sejtvonalak összehasonlító proteomikai profilozása. Mol Cells, 2014. 37(12): 888–98. o.
- Jin, U.-H. és munkatársai: A hasnyálmirigyrák Panc1 sejtjeinek migrációját gátló omeprazol hatása a JNK aril-hidrokarbon-receptor általi aktivációjától függ. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2018. 501(3): 751–757. o.
- Yuetong, L. és munkatársai: A szalidrozid az AKT és az ERK jelátviteli útvonalon keresztül gátolja az emberi hasnyálmirigyrákos PANC1 és SW1990 sejtek szaporodását, vándorlását és invázióját. Die Pharmazie – An International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2020. 75(8): 385–388. o.
- Alipour, S., L. Pishkar és V. Chaleshi, A Portulaca oleracea kivonat citotoxikus hatása a CDK1 és a P53 génkifejeződés szabályozására hasnyálmirigyrákos sejtvonalban. Nutrition and Cancer, 2022. 74(5): 1792–1801. o.