P19 sejtek – Embriális karcinóma kutatása P19 sejtek felhasználásával
A P19 egy egér embrionális karcinóma sejtvonal. Széles körben használják az orvostudományi kutatásban, főként a fejlődésbiológia, az őssejtbiológia, a sejtdifferenciálódás és a gyógyszerszűrés tanulmányozására. Mivel a P19 sejtek differenciálódási képességgel rendelkeznek, hasznosak lehetnek olyan komplex biológiai folyamatok vizsgálatában, mint a szövetképződés és a korai embrionális fejlődés. Ebben a cikkben az egérből származó P19 sejtek alapjait ismertetjük.
- Növekedési tápközeg
- DMEM/Ham’s F12 tápközeg, amely 5% borjúszérumot, 3,1 g/l glükózt, 1,6 mM L-glutamint, 1,0 mM nátrium-piruvátot, 15 mM HEPES-t és 1,2 g/l NaHCO₃-t tartalmazó DMEM/Ham’s F12 tápközeget használnak a P19 sejtek tenyésztéséhez.
- Duplázódási idő
- A P19 sejtvonal esetében a megadott duplázódási idő körülbelül 2–3 nap.
- Növekedési típus
- A P19 embrionális karcinóma sejtvonal adhezív.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — P19 megrendelése
- A P19 sejtek általános jellemzői és eredete
- A P19 sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
- P19 sejtvonal: Előnyök és hátrányok
- A P19 sejtek kutatási alkalmazásai
- Vásárolja meg még ma a P19 sejtvonalat
- P19 sejtek: Kutatási publikációk
- Források a P19 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
- A P19 sejtvonal felfedezése: Gyakran feltett kérdések
- Hivatkozások
- Gyakran feltett kérdések
A P19 sejtek általános jellemzői és eredete
A sejtvonal általános jellemzőinek és eredetének ismerete elengedhetetlen, mielőtt elkezdené a vele való munkát. Ez a szakasz a következőket tárgyalja: Mi a P19 sejtvonal? Milyen méretű a P19 sejt? Mi a P19 sejtek eredete?
- A P19 egyfajta pluripotens embrionális karcinóma sejt, amelyet eredetileg egy C3H/He egérben kialakult teratokarcinómából nyertek. A sejtvonalat először 1982-ben McBurney és Rogers hozta létre.
- A P19 sejtek szérummal kiegészített tenyésztőközegben folyamatosan szaporodnak. Nem toxikus gyógyszerek, például retinsav és dimetil-szulfoxid (DMSO) hatására más sejttípusokká differenciálódhatnak [1].
- Ezek az egérkarcinóma-sejtek epiteliális jellegű morfológiával rendelkeznek.
- A P19 sejtvonal euploid hím kariotípussal rendelkezik (n=40; XY).
A P19 sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
A P19 sejtvonalat egyedülálló tulajdonságai miatt széles körben tenyésztik a kutató laboratóriumokban. Tenyésztése egyszerű és kezelhető. Ez a szakasz tartalmazza az összes fontos információt, amelyre szükség van a P19 sejtkultúra fenntartásához és szaporításához. Megtudjuk: Mennyi a P19 sejtek duplázódási ideje? Hogyan tenyésztjük a P19 sejtvonalat? A P19 adhezív sejtvonal?
A P19 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A P19 sejtvonal esetében a megadott duplázódási idő körülbelül 2–3 nap.
Adherens vagy szuszpenziós:
A P19 embrionális karcinóma sejtvonal adhezív.
Átültetési arány:
A P19 sejteket 48 óránként kell szubkultiválni, és ezeknél a sejteknél 1:10-es osztási arányt kell fenntartani. Az adhezív sejteket 1X foszfátpuffer-sóoldattal mossuk át, majd Accutase-szel inkubáljuk, amíg a sejtek szét nem válnak. A sejteket tenyésztőtáptalajjal keverjük össze, majd centrifugálással szüreteljük le. Az összegyűjtött sejteket óvatosan reszuszpendáljuk, és új lombikokba adagoljuk.
Növekedési tápközeg:
5% borjúszérumot tartalmazó DMEM/Ham’s F12 tápközeg, 3,1 g/l glükózt, 1,6 mM L-glutamint, 1,0 mM nátrium-piruvátot, 15 mM HEPES-t és 1,2 g/l NaHCO₃-t tartalmazó DMEM/Ham’s F12 táptalajt használunk a P19 sejtek tenyésztéséhez.
Növekedési feltételek:
A P19 embrionális karcinóma sejtvonal tenyésztéséhez elengedhetetlen egy 37 °C-ra beállított, párásított inkubátor, amelybe 5% CO₂-t juttatnak.
Tárolás:
A fagyasztott P19 sejtes fiolákat -150 °C alatti hőmérsékleten, fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gázfázisában kell tárolni a sejtek hosszú távú életképességének megőrzése érdekében.
Fagyasztási eljárás és táptalaj:
A P19 sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF táptalajt lehet használni lassú fagyasztási módszerrel, amely megóvja a sejteket a hőmérsékleti sokktól és megőrzi életképességüket.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott P19 sejtek 37 °C-os vízfürdőben olvaszthatók fel úgy, hogy a fiolát 40–60 másodpercig gyorsan rázják. A sejtekhez friss táptalajt adnak, majd centrifugálják őket a fagyasztó táptalaj elemeinek eltávolítása érdekében. A sejtpalettát ismét szuszpendálják, majd a sejteket új lombikba öntik a szaporodáshoz.
Biológiai biztonsági szint:
A P19 sejtvonalhoz 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumi körülmények szükségesek.
P19 sejtvonal: Előnyök és hátrányok
Ebben a részben a P19 sejtvonal előnyeit és hátrányait tárgyaljuk.
Előnyök
- Differenciálódási potenciál: A P19 sejtek különböző sejttípusokká képesek differenciálódni, beleértve a szívizomsejteket, az idegsejteket és a mikroglia sejteket. Differenciálódásukhoz nem toxikus gyógyszerekre van szükségük, például retinsavra és dimetil-szulfoxidra (DMSO). A retinsav neuronok, mikroglia- és asztroglia-sejtek kialakulását indukálja, míg a DMSO a szívizomsejtek és a simaizomsejtek fejlődését indítja el. Így a P19 sejtek hasznosak a sejtdifferenciálódás és a fejlődési folyamatok tanulmányozásában.
- Modellrendszer: A pluripotens embrionális karcinóma sejtvonal, a P19, értékes modell a korai embrionális fejlődés tanulmányozásához. A kutatók a P19-sejteket használják a sejtjelátviteli útvonalak, valamint az ezekben a folyamatokban részt vevő sejtes és molekuláris mechanizmusok feltárására.
Hátrányok
- Egér eredet: A P19 egy egér embrionális karcinóma sejtvonal. Következésképpen az ezeket a sejteket felhasználó tanulmányok eredményei nem feltétlenül alkalmazhatók teljes mértékben az emberi biológiára és folyamatokra.
A P19-sejtek kutatási alkalmazásai
A P19 sejteknek számos kutatási alkalmazása van differenciálódási képességük, valamint a fejlődésbiológiához és az őssejtkutatáshoz fűződő relevanciájuk miatt. A P19 embrionális karcinóma sejtek néhány fontos kutatási alkalmazása a következő:
- Sejtdifferenciálódási vizsgálatok: Mint tudjuk, a P19 sejtek neuronokká, mikroglia-sejtekké, simaizomsejtekké és szívizomsejtekké differenciálódhatnak; ezért széles körben használják őket a sejtdifferenciálódási folyamatok tanulmányozására. Ezen felül segítik az idegrendszeri és szívfejlődés, valamint az azok mögött meghúzódó mechanizmusok kutatását. Egy 2018-ban végzett tanulmány megállapította, hogy a reaktív oxigénszármazékok (ROS) irányítják a P19-sejtek specifikus sejttípusokká történő differenciálódását, és megakadályozzák más sejttípusok indukcióját [3]. Egy másik tanulmány a retinsav által közvetített idegrendszeri differenciálódási folyamatot vizsgálta, és megállapította a PI3K/Akt/GSK3β jelátviteli út részvételét [4].
- Fejlődésbiológia: A P19-sejtek felbecsülhetetlen értékű modellek a korai embrionális fejlődés tanulmányozásához. Segítenek a kutatóknak megérteni az olyan komplex biológiai folyamatokat, mint például a szövetképződés az embrió fejlődése során. A kutatás P19-sejteket használt, és a kamrai septumdefektus (VSD) kialakulásában szerepet játszó molekuláris tényezőket vizsgálta. Az eredmények rávilágítottak arra, hogy egy hosszú, nem kódoló SNHG6 RNS hozzájárul a VSD kialakulásához azáltal, hogy negatívan szabályozza a miRNA-101-et és aktiválja a Wnt/β-katenin jelátviteli útvonalat [5].
- Gyógyszervizsgálat: A P19 egér embrionális karcinóma sejtvonalat potenciális gyógyszerjelöltek szűrésére is használják. Egy tanulmányban differenciált P19-sejtből származó idegsejteket használtak, és a szintetikus L-Dopa, valamint a Mucuna pruriens magjából nyert vizes kivonat idegvédő, acetilkolinészteráz-gátló hatásait vizsgálták. Az eredmények azt mutatták, hogy a növényi kivonat az L-Dopához képest ígéretes eredményeket mutatott [6].
Vásárolja meg még ma a P19 sejtvonalat!
P19 sejtek: Kutatási publikációk
Ez a cikk egy része néhány érdekes, a P19 sejteket bemutató kutatási publikációt ismertet.
Ez a cikk 2017-ben jelent meg az Oncology Reports folyóiratban. A tanulmány azt állította, hogy az agyalapi mirigy nemi hormonjai irányítják a teratokarcinóma sejtvonalak – beleértve a P19 sejteket is – adhézióját, proliferációját és migrációját.
Az Experimental & Molecular Medicine folyóiratban (2018) megjelent publikáció P19-sejteket használt, és a hosszú, nem kódoló RNS, az uc.4 működését vizsgálta. Az eredmények kimutatták, hogy az uc.4 a TGF-béta jelátviteli útvonal modulálása révén befolyásolja a sejtek differenciálódását.
Ez a kutatási cikk 2018-ban jelent meg a Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine folyóiratban. A tanulmány megállapította, hogy a természetes agyszöveti kivonat és a háromdimenziós sejtkultúra felgyorsíthatja a P19 embrionális karcinóma sejtek idegsejtekké történő differenciálódását.
Ezt a tanulmányt 2020-ban publikálták a Journal of Ethnopharmacology című folyóiratban. A tanulmány azt állította, hogy a Cichorium intybus L. levélkivonat indukálhatja a P19 embrionális karcinóma sejtek differenciálódását inzulintermelő hasnyálmirigy-β-sejtekké.
Ezt a kutatást a Molecules folyóiratban tették közzé (2022). A tanulmány a Mucuna pruriens magkivonat neuroprotektív és acetilkolinészteráz-gátló hatásait vizsgálta P19 sejtvonalbeli idegsejtekre.
Források a P19 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyéb anyagok
Az alábbiakban néhány forrás található a P19-sejtekkel kapcsolatban.
- A P19 sejtek idegsejt-differenciálódásának protokollja: Ez a cikk tartalmazza a P19 sejtek idegsejt-differenciálódásának protokollját és egyéb hasznos információkat a P19 sejtek differenciálódásáról.
- P19 sejtek transzfekciója: Ez a link segít megismerni a P19 sejtek transzfekciós protokollját.
Az alábbi link a P19 sejtek tenyésztési protokollját tartalmazza.
- P19 sejtek: Ez a weboldal minden hasznos információt tartalmaz a P19 sejtvonalról, beleértve a tenyésztési feltételeket, a P19 sejtek táptalaját, a sejtek szétválasztását és még sok mást.
A P19 sejtvonal felfedezése: P1919: Gyakran Ismételt Kérdések
Hivatkozások
- McBurney, M.W., P19 embrionális karcinóma sejtek. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): 135–40. o.
- Bressler, J. és munkatársai, P19 embrionális karcinóma sejtvonal: modell a gén–környezet kölcsönhatások tanulmányozásához. Cell Culture Techniques, 2011: 223–240. o.
- Pashkovskaia, N., U. Gey és G. Rödel, A mitokondriális ROS irányítja az egér pluripotens P19 sejtek differenciálódását. Stem Cell Research, 2018. 30: 180–191. o.
- Fu, F. és munkatársai: Az all-transz-retinsav a PI3K/Akt/GSK3β jelátviteli útvonalban részt vevő neuronokká indukálja a P19 sejtek differenciálódását. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): 4386–4396. o.
- Jiang, Y. és munkatársai: A hosszú, nem kódoló SNHG6 RNS a miR-101 negatív szabályozása és a Wnt/β-katenin jelátviteli út aktiválása révén hozzájárul a kamrai septumdefektus kialakulásához. Die Pharmazie – Nemzetközi Gyógyszerészeti Tudományos Folyóirat, 2019. 74(1): 23–28. o.
- Kamkaen, N. és munkatársai: A Mucuna pruriens magjából készült vizes kivonat a szintetikus L-dopához képest javította a neuroprotektív és az acetilkolinészteráz-gátló hatásokat. Molecules, 2022. 27(10): 3131. o.