NCI-H460 sejtek – Az NCI-H460-ról szóló ismeretek segítségével a tüdőrák-kutatás útvesztőjében
Az NCI-H460 emberi eredetű, nem kissejtes tüdőráksejtekből származó sejtvonal, amelyet gyakran használnak a tüdőrák és a toxikológiai kutatásokban. Ez a sejtvonal értékes eszköz a rákbiológia különböző aspektusainak tanulmányozásához, beleértve a daganat kialakulását, növekedését és a gyógyszerrezisztenciát. Ezenkívül az NCI-H460 sejtek megfelelő modellt nyújtanak a rákellenes szerek fejlesztéséhez.
- Növekedési tápközeg
- Az NCI-H460 tenyésztő tápközegként RPMI 1640-et használnak. Ezt 10% borjúszérummal, 2,1 mM stabil glutaminnal és 2,0 g/l NaHCO3-mal egészítik ki. A tápközeget hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
- Duplázódási idő
- Az NCI-H460 sejtvonal duplázódási ideje körülbelül 33 óra.
- Növekedési típus
- Az NCI-H460 tüdőráksejtek adhezívek.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-4
- Beszerzési forrás
- Cytion — NCI-H460 megrendelése
NCI-H460 sejtek: eredet és általános jellemzők
A sejtvonal eredete és általános jellemzői jelentősen hozzájárulnak annak kutatási alkalmazásaihoz. A cikk ezen része segít megismerni az NCI-H460 tüdőráksejtek eredetét és legfontosabb jellemzőit. Megtudhatja: Mik az NCI-H460 sejtek? Milyen típusú az NCI-H460 sejtvonal? Milyen a morfológiája az NCI-H460-nak?
- Az NCI-H460 sejtvonal egy nagysejtes tüdőrákban szenvedő európai férfi pleurális folyadékgyüleméből származik. 1982-ben A.F. Gazdar és munkatársai hozták létre.
- Az NCI-H460 tüdőráksejtek epiteliális morfológiával rendelkeznek.
- Az NCI-H460 egy hipotriploid kariotípusú tumorigenikus sejtvonal. E sejtek modális kromoszómaszáma 57. Az NCI-H460 sejtek hasonló arányban 58-as modális kromoszómaszámmal is rendelkeznek.
- Ezek a tüdőráksejtek számos, a nem kissejtes tüdődaganatokra jellemző mutációt hordoznak, például az NCI-H460 KRAS-mutációt, amelyek szerepet játszanak a sejtek szaporodásában, növekedésében, inváziójában és metasztázisában.
Az NCI-H460 sejtek tenyésztésével kapcsolatos információk
Az NCI-H460 sejtvonal megfelelő kezeléséhez és fenntartásához ismernie kell az alábbi fontos szempontokat. Az alábbiakban tájékoztatást kap az NCI-H460 sejtvonal duplázódási idejéről, az NCI-H460 tenyésztőközegéről, valamint az NCI-H460 tüdőráksejtek tenyésztésének alapvető eljárásairól.
Az NCI-H460 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
Az NCI-H460 sejtvonal duplázódási ideje körülbelül 33 óra.
Adherens vagy szuszpenziós:
Az NCI-H460 tüdőráksejtek adhezívek.
Szubkultivációs arány:
Az NCI-H460 sejtvonal esetében ajánlott szubkultivációs arány 1:2 és 1:4. A régi tápközeg eltávolítása után az adhezív sejteket 1x foszfátpuffer-sóoldattal öblítik le. Ezt követően a sejteket Accutase átültető oldattal 8–10 percig szobahőmérsékleten inkubálják. A szétválasztott sejteket tenyésztőtápközegben reszuszpendálják, majd centrifugálják. A leszedett sejteket ismét reszuszpendálják, és a tenyésztéshez új lombikba öntik.
Növekedési tápközeg:
Az NCI-H460 tenyésztéséhez RPMI 1640-et használunk. Ezt 10% borjúszérummal, 2,1 mM stabil glutaminnal és 2,0 g/l NaHCO3-mal egészítjük ki. A tápközeget hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek:
Az NCI-H460 tenyészeteket 37 °C-os hőmérsékleten, párásított inkubátorban, folyamatos 5%-os CO₂-ellátás mellett tartják.
Tárolás:
Az NCI-H460 tüdőráksejtek hosszú távon folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150 °C alatti hőmérsékleten, elektromos ultralow-temperatúra-fagyasztóban tárolhatók.
Fagyasztási eljárás és táptalaj:
Az NCI-H460 sejtek fagyasztásához és tárolásához CM-1 vagy CM-ACF táptalajt használnak. A sejtek életképességének maximális megőrzése érdekében lassú fagyasztási módszer alkalmazása ajánlott.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott NCI-H460 sejteket előmelegített vízfürdőben (37 °C hőmérsékleten) 40–60 másodpercig olvasztják, amíg csak egy kis jégdarabka marad. A felolvasztott sejtekhez friss táptalajt adnak, majd centrifugálják őket a fagyasztó táptalaj összetevőinek eltávolítása érdekében. Az összegyűjtött sejtpelletet ismét szuszpendálják, majd a sejteket új, növekedéshez szükséges táptalajt tartalmazó lombikokba osztják. Az NCI-H460 sejteknek akár 24 órába is beletelhet, mire a lombik felületéhez tapadnak.
Biológiai biztonsági szint:
Az NCI-H460 tüdőráksejteket 1. biológiai biztonsági szintű laboratóriumokban kezelik és tartják fenn.
Közzététel: 2023 | Utolsó felülvizsgálat: 2026. május
Az NCI-H460 sejtek előnyei és hátrányai
Az NCI-H460 egy széles körben használt sejtvonal a tüdőrák kutatásában. Ez a szakasz az NCI-H460 tüdőráksejtekkel kapcsolatos általános előnyöket és hátrányokat tárgyalja.
Előnyök
Az NCI-H460 nem kissejtes tüdőráksejtvonal előnyei a következők:
-
A daganat eredete
Az NCI-H460 sejtvonalat egy nagysejtes tüdőrákos betegtől nyerték, így ez a sejtvonal jól reprezentálja ezt a tüdőrák-típust. A sejtvonalat modellként használják a tüdőrák biológiájának tanulmányozására, valamint új és hatékony kezelési módszerek kifejlesztésére. Az NCI-H460 sejtek tumorigenikus potenciállal rendelkeznek, és immunhiányos egerekbe injekciózhatók, hogy in vivo tumor modelleket hozzanak létre a tumor növekedésének, fejlődésének és a potenciális gyógyszerek hatékonyságának tanulmányozására.
-
Magas proliferációs arány
Az NCI-H460 nagyobb növekedési sebességet mutat, mint más nem kissejtes tüdőrák-sejtvonalak, például az A549. Ez az előny növeli a sejtvonal rendelkezésre állását, és segíti a kutatókat a reprodukálható és időérzékeny kísérletek elvégzésében.
Hátrányok
Az NCI-H460 tüdőráksejtekkel kapcsolatos hátrányok a következők:
-
Homogenitás
Az NCI-H460 sejtek homogének, mivel egyetlen beteg daganatából nyerték őket. Ezért általában hiányzik belőlük a betegek daganataiban megfigyelhető komplexitás és heterogenitás.
Az NCI-H460 sejtek kutatási alkalmazásai
Az NCI-H460 tüdőráksejteket széles körben használják a tüdőrákkal kapcsolatos kutatásokban. Íme néhány fontos kutatási alkalmazás az NCI-H460 sejtekkel kapcsolatban:
- Tüdőrák-kutatás: Az NCI-H460 sejtek felbecsülhetetlen értékű modellt jelentenek a daganat kialakulásában, növekedésében és áttétképzésében szerepet játszó sejt- és molekuláris mechanizmusok vizsgálatához. Ezenkívül a tüdőrák progressziójával összefüggő kulcsfontosságú jelátviteli útvonalak, molekuláris célpontok és különböző genetikai mutációk tanulmányozására is használják őket. Számos tanulmányt végeztek az NCI-H460 sejtekkel e tényezők hatékony vizsgálata érdekében. Egy 2019-ben végzett tanulmány azt javasolta, hogy a túltermelt nukleáris ubikvitin kazein és ciklin-függő kináz szubsztrát (NUCKS) a PI3K/AKT jelátviteli út szabályozása révén vesz részt a tumorsejtek növekedésében [1]. Hasonlóképpen, egy in vitro és in vivo vizsgálatban NCI-H460 sejteket használtak az eIF4E gén szerepének feltárására. Az eredmények rávilágítottak arra, hogy az eIF4E gén részt vesz a tüdőrák növekedésében és az angiogenezisben, és célpontként szolgálhat ígéretes tüdőrák elleni gyógyszerek kifejlesztéséhez [2].
- Gyógyszerkutatás és -fejlesztés: Az NCI-H460, egy humán tüdőrák-sejtvonal, széles körben használatos a gyógyszerkutatásban és -fejlesztésben. A kutatók ezeket a sejteket használják új gyógyszerjelöltek, célzott terápiák, valamint főként az NCI-H460 KRAS-mutációkat célzó kezelések toxicitásának és hatékonyságának vizsgálatára. Haoyue Hu és munkatársai által 2023-ban végzett tanulmányban NCI-H460 sejteket használtak az anlotinib gyógyszer rákellenes hatásainak vizsgálatához. Az eredmények azt mutatták, hogy az anlotinib a MEK/ERK jelátviteli kaszkád gátlásával részben befolyásolta a KRAS-mutáns tüdőráksejtek növekedését [3]. Hasonlóképpen, egy fenolos vegyületet, a karnozinsavat is szűrték antiproliferatív és proapoptotikus hatások szempontjából NCI-H460 sejtek felhasználásával [4].
- Gyógyszerrezisztencia: Az NCI-H460 sejtvonal ideális a tüdőrák gyógyszerrezisztencia-mechanizmusának vizsgálatához. A kutatók ezeket a sejteket használják gyógyszerrezisztencia-modellek kidolgozására, hogy azonosítsák az alapul szolgáló géneket, molekuláris tényezőket és jelátviteli útvonalakat. Például egy tanulmányban a pemetrexeddel, egy többcélpontú antifolát-szerrel szemben rezisztens NCI-H460 sejteket hoztak létre, hogy tanulmányozzák a nem kissejtes tüdőrákos sejtekben a pemetrexed-rezisztencia mögöttes molekuláris mechanizmusait [5].
Vásárolja meg az NCI-H460 sejtvonalat: az út a tüdőrák-kutatás felé
Az NCI-H460 sejtvonalat bemutató kutatási publikációk
Íme néhány érdekes kutatási publikáció az NCI-H460 tüdőrákos sejtvonalról.
A Molecules (2023) folyóiratban megjelent tanulmány szerint a fekete babból nyert természetes α-1,6-glükán, a BBWPW, a PI3K/AKT/MAPK útvonal szabályozása révén gátolja az NCI-H460 sejtek szaporodását.
A Phytomedicine (2019) folyóiratban megjelent cikk azt vizsgálta, hogy a dioscin-6′-O-acetát, egy új természetes vegyület, antiproliferatív hatást fejt ki az NCI-H460 tüdőráksejtekre.
A miRNA-425-5p a PTEN/PI3K/AKT jelátviteli tengelyen keresztül fokozza a tüdőrák növekedését
A BMC Pulmonary Medicine (2020) folyóiratban megjelent kutatás szerint a mikroRNS-425-5p a PTEN/PI3K/AKT útvonalon keresztül fokozza a tüdőrák tumorogenezisét.
A Molecular Medicine Reports (2017) című folyóiratban megjelent cikk a quinalizarin vegyület daganatellenes potenciálját és az azt alátámasztó mechanizmusokat mutatta be az NCI-H460 és más tüdőráksejtek esetében.
A Food and Function (2019) folyóiratban megjelent kutatás az Eucalyptus globulus Labill. kivonat potenciális rákellenes hatását emeli ki NCI-H460 sejtek felhasználásával. Az eredmények azt mutatták, hogy a növényi kivonat ezeket a hatásokat az NCI-H460 sejtek p53-expressziójának növelésével és a sejtciklus-profil modulálásával érte el.
Források az NCI-H460 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyéb anyagok
Íme néhány online forrás az NCI-H460 tüdőráksejtekről.
- NCI-H460 sejtek transzfekciója: Ez a videó bemutató lépésről lépésre bemutatja az NCI-H460 sejtek plazmid-DNS-sel történő transzfekcióját.
Az alábbi linkek elengedhetetlen sejtkultúra-információkat tartalmaznak az H460 sejtekhez.
- NCI-H460 sejtek: Ez a weboldal fontos információkat nyújt az NCI-H460 sejtek táptalajáról, az áttenyésztésről, valamint a fagyasztási és felolvasztási eljárásokról.
- NCI-H460 sejtek átültetése: Ez a dokumentum útmutatást nyújt az NCI-H460 sejtvonal átültetéséhez és szubkultiválásához. Ezen felül segít megismerni az NCI-H460 sejtek transzfekciós protokollját is.
Az NCI-H460 sejtvonal feltárása: GYIK és érdekességek
Az NCI-H460 sejtvonal egy nagysejtes tüdőrákos betegtől származik, így értékes modell az ilyen típusú tüdőrák tanulmányozására.
Az NCI-H460 sejteket a tüdőrák biológiájának vizsgálatára, új kezelések kifejlesztésére és a potenciális gyógyszerek hatékonyságának értékelésére használják. Immunhiányos egerekbe is be lehet őket injektálni, hogy in vivo tumormodelleket hozzanak létre a tumor növekedésének és fejlődésének tanulmányozására.
Mind az NCI-H460, mind az A549 sejtvonalak tüdőrákból származnak, de az NCI-H460 nagysejtes karcinómát, míg az A549 adenokarcinómát képvisel. Ez a szövettani altípusbeli különbség befolyásolja jellemzőiket és viselkedésüket.
Igen, az NCI-H460 sejtek tumorogén potenciállal rendelkeznek, és immunhiányos egerekbe ültethetők xenograft modellek létrehozásához, megkönnyítve a nagysejtes tüdőrák in vivo tanulmányozását.
A paclitaxel más vegyületekkel való kombinálása fokozhatja az NCI-H460 sejtekre kifejtett citotoxikus hatását, ami potenciálisan javíthatja a tüdőrák kezelésének eredményeit.
Igen, az NCI-H460 sejtek hipoxantin-guanin-foszforibozil-transzferázt expresszálnak, amely elengedhetetlen a nukleotid-anyagcseréhez és a sejtproliferációhoz.
Az NCI-H460 sejteket gyakran használják a rákkutatásban és a toxikológiai kutatásokban a tumor növekedésének tanulmányozására, a vegyületek citotoxikus hatásainak értékelésére és a gyógyszerrezisztencia mechanizmusainak vizsgálatára.
Az NCI-H460 sejtek jellemzően neurofilament triplet fehérjéket expresszálnak, amelyek részt vesznek a citoszkeletális szerkezet fenntartásában, és szerepet játszhatnak a rákos sejtek migrációjában és inváziójában.
A κB útvonal többek között részt vesz az NCI-H460 sejtek proliferációjának és túlélésének szabályozásában, ami potenciális célpontokat kínál a tüdőrák terápiás beavatkozásához.
Igen, az NCI-H460 sejteket gyakran használják in vitro modellként a kemoterápiás szerek, köztük a paclitaxel és a karboplatin citotoxikus hatásainak értékelésére, segítve ezzel a hatékony rákellenes kezelések kifejlesztését.
Hivatkozások
- Hu, C. és munkatársai: A NUCKS a Pi3k/Akt jelátviteli útvonalon keresztül elősegíti a tüdőrákos sejtek szaporodását, vándorlását és invázióját. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): E55–61. o.
- Qi, X. és munkatársai: Az EGPI-1, egy új eIF4E/eIF4G kölcsönhatás-gátló, a Ras/MNK/ERK/eIF4E jelátviteli útvonalon keresztül gátolja a tüdőrákos sejtek növekedését és az angiogenezist. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: 109773. o.
- Hu, H. és munkatársai: Az anlotinib a MEK/ERK jelátviteli út gátlása révén rákellenes hatást fejt ki a KRAS-mutációval rendelkező tüdőráksejtekre. Cancer Management and Research, 2020: 3579–3587. o.
- Corveloni, A.C. és munkatársai: A karnozinsav antiproliferatív és proapoptotikus hatást fejt ki a tumoros NCI-H460 és a nem tumoros IMR-90 tüdősejtekben. Journal of Toxicology and Environmental Health, A. rész, 2020. 83(10): 412–421. o.
- Xu, Y.-L. és munkatársai: Pemetrexed-rezisztens NCI-H460/PMT sejtek létrehozása és jellemzése. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (korábban Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): 731–739. o.