BeWo sejtvonal
A BeWo egy humán koriokarcinómából származó sejtvonal, amelyet széles körben használnak az orvostudományi kutatásban. Értékes in vitro modellként szolgál a placenta fejlődésének és a humán trofoblasztok szinkitiálisodásának bonyolult folyamatának feltárásához. A kutatók ezeket a sejteket a trofoblasztok viselkedésének, a hormontermelésnek és a placentán keresztüli anyagszállításnak a tanulmányozására is felhasználják. Emellett a BeWo sejtek toxikológiai, fertőzés- és betegségátviteli kutatásokban is alkalmazhatók.
Ez a cikk a BeWo sejtekkel kapcsolatos alapvető ismereteket tartalmazza, amelyek segíthetnek Önnek a kutatásában. A cikk a következőket tartalmazza:
- A BeWo sejtek általános jellemzői és eredete
- BeWo sejtvonal: tenyésztési információk
- A BeWo sejtvonal előnyei és hátrányai
- A BeWo sejtek kutatási alkalmazásai
- A BeWo-sejteket bemutató kutatási publikációk
- Források a BeWo sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
A BeWo sejtek általános jellemzői és eredete
A sejtvonal eredetéről és általános jellemzőiről való előzetes ismeret elengedhetetlen a kutatásban való felhasználásához. A cikk ezen része a BeWo sejtvonal eredetét, jellemző tulajdonságait és még sok mást tárja fel. Itt megtudhatja: Mi a BeWo koriokarcinóma sejtvonal? Mi a BeWo-szinkitizáció? Honnan származnak a BeWo sejtek? Mi a BeWo sejtek morfológiája? Mi a BeWo ploiditása?
- A BeWo placenta sejtvonal 1968-ban egy férfi magzat placentájának rosszindulatú terhességi koriokarcinómájából származik [1]. Ezért felbecsülhetetlen értékű modellként szolgál a placenta kutatásában.
- A BeWo sejtek epitheliális jellegű morfológiát mutatnak.
- A BeWo sejtek viszonylag kicsik, méretük 20–30 µM között mozog [2].
- A BeWo sejtek stabil kariotípussal rendelkeznek. Számuk hipo-tetraploid. A BeWo sejtek modális kromoszómaszáma 86. Ez 71 és 178 között változhat.
- A BeWo sejtek számos hormont termelnek, például humán korionikus szomatomammotropint, humán korionikus gonadotropint (hCG) és szteroid hormonokat.
- A BeWo sejtek molekuláris markereket fejeznek ki, többek között CK 7-et, E-kadherint és VE-kadherint.
B30 alvonal
A B30 a BeWo sejtek alvonalát képezi. A tápanyagok felvételének és szállításának vizsgálatára használják. Ez annak köszönhető, hogy porózus membránokon erőteljesen növekednek.
BeWo és JEG-3
A BeWo és JEG-3 sejtvonalak koriokarcinómákból származnak, és a placenta kutatásában használják őket. A BeWo sejtek alacsonyabb szinten termelnek hormonokat, mint a JEG-3 sejtek, például humán koriongonadotropint (hCG) és ösztradiolt.
BeWo sejtvonal: Tenyésztési információk
A sejtkultúra fenntartása bonyolult lehet, ha nem ismeri a legfontosabb részleteket. Például: Mennyi a BeWo sejtek duplázódási ideje? Mi a BeWo sejtkultúra táptalaja? Hogyan tenyészthető a BeWo sejtvonal? És hogyan fagyaszthatók le a BeWo sejtek?
A BeWo-sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
A BeWo sejtek populációjának duplázódási ideje körülbelül 30 óra.
Adherens vagy szuszpenziós:
A BeWo egy adhezív sejtvonal.
Sejtbeültetési sűrűség:
A BeWo sejtek esetében ajánlott beültetési sűrűség 1 x 10⁴ sejt/cm². A beültetéshez a régi táptalajt eltávolítjuk a sejtekből, majd a sejteket 1x PBS-sel öblítjük át. Ezt követően Accutase-t (átültető oldatot) adunk hozzá, és a sejteket 8–10 percig szobahőmérsékleten inkubáljuk. Ezután a levált sejteket tenyésztőtáptalajjal keverjük össze, majd centrifugáljuk. A learatott sejteket ezután újra szuszpendáljuk, és új lombikba öntjük.
Növekedési tápközeg:
A BeWo sejtek tenyésztéséhez 10% FBS-t, 2,0 mM L-glutamint, 2,0 mM nátrium-piruvátot és 2,5 g/L NaHCO3-t tartalmazó Ham’s F12K táptalajt használunk. A BeWo sejtek táptalaját hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési körülmények:
A BeWo sejteket 37 °C-ra beállított, párásított inkubátorban, 5%-os CO₂-ellátással tartjuk.
Tárolás:
A fagyasztott BeWo-sejteket -150 °C alatti hőmérsékleten, elektromos ultralow-temperatúra-fagyasztóban vagy folyékony nitrogén gázfázisában tárolják.
Fagyasztási eljárás és táptalaj:
A BeWo sejteket CM-1 vagy CM-ACF fagyasztóközegben ajánlott fagyasztani. A sejteket lassú fagyasztási módszerrel fagyasztják. Ez a módszer percenként csupán 1 fokos hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé, így megakadályozza a sejtek hőhatását és megóvja azok életképességét.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott sejteket úgy olvasztják fel, hogy 40–60 másodpercre egy előre beállított, 37 °C-os vízfürdőbe merítik őket, amíg csak egy kis jégdarabka marad. Ezután friss tenyészközeget adnak hozzá, és a sejteket centrifugálják, hogy eltávolítsák a fagyasztóközeg összetevőit. Az összegyűjtött sejtpelletet újra szuszpendálják, és tenyésztés céljából kultúraedénybe helyezik.
Biológiai biztonsági szint:
A BeWo sejtkultúrák kezeléséhez és fenntartásához 1. szintű biológiai biztonsági laboratórium szükséges.
Közzététel: 2023 | Utolsó felülvizsgálat: 2026. május
A BeWo sejtvonal előnyei és hátrányai
A BeWo sejtek egyedülálló tulajdonságokkal rendelkeznek, és vannak specifikus előnyeik és hátrányaik. Ebben a szakaszban néhány figyelemre méltó tulajdonságot fogunk megvizsgálni.
Előnyök
A BeWo koriokarcinóma sejtvonal fő előnyei a következők:
-
In vitro placenta sejtmodell
A BeWo sejtek in vitro modellt nyújtanak a trofoblasztsejtek viselkedésének és a placenta szinkitizációjának tanulmányozásához, reprodukálva azokat a folyamatokat, amelyeket in vivo nehéz megfigyelni.
-
Hormontermelés
A BeWo sejtek hormonokat, például hCG-t és placenta-laktogént választanak ki, ami értékessé teszi őket a hormonális szabályozás tanulmányozásában és a reproduktív biológia kutatásában.
Hátrányok
A BeWo trofoblasztsejtek hátrányai a következők:
-
Rákos sejtvonal
A BeWo sejtek a placenta daganatából, a koriokarcinómából származnak. Ez az eredet nem feltétlenül tükrözi teljes mértékben a normális placenta sejtek működését.
A BeWo sejtek kutatási alkalmazásai
A BeWo sejtvonalat széles körben használják a placenta kutatásában. Az alábbiakban néhány konkrét alkalmazási területet említünk:
- Placenta és terhességgel kapcsolatos kutatás: A BeWo sejtek kulcsfontosságúak a placenta és a terhességgel kapcsolatos kutatásokban. A kutatók például ezeket a sejteket használják a placenta gáton keresztül történő anyagszállítás, beleértve a gyógyszereket, tápanyagokat és toxinokat, tanulmányozására. Emellett a hormonok termelését és szabályozását is vizsgálják, beleértve a humán koriongonadotropint (hCG), a placenta-laktogént és a szteroid hormonokat. Ez fontos a terhesség alatti hormonális változások megértése szempontjából. A 2018-ban végzett kutatások a brómtartalmú égésgátlók (BFR-ek) hatását vizsgálták a szulfotranszferáz aktivitására az emberi trofoblasztos sejtvonalban (BeWo). Ez az enzim részt vesz a pajzsmirigy hormon intracelluláris szintjének szabályozásában [3].
- Fertőzés- és betegségkutatás: A BeWo sejteket a kórokozók és a placenta sejtek közötti kölcsönhatás vizsgálatára is használják. Ez a kutatás értékes segítséget nyújt az anyáról a magzatra átterjedő betegségek megértésében, valamint a magzat egészségét védő stratégiák kidolgozásában. Ezenkívül ez a sejtvonal segíti a kutatókat a terhesség alatt fellépő szövődmények, például a preeclampsia vizsgálatában. Például egy 2023-ban Michalina Bralewska által végzett tanulmány a BeWo trofoblasztsejt-modellt használta, és megállapította, hogy mind a kromogranin A (CgA), mind az abból származó peptid, a katestatin (CST) szerepet játszhat a preeclampsia (PE) patogenezisének bonyolult folyamatában [4]. Egy későbbi tanulmány a BeWo koriokarcinóma sejtvonalat felhasználva a trichosanthin rákellenes potenciálját vizsgálta. A kutatás keretében különös figyelmet fordítottak a biomarkerek felfedezésére is, azáltal, hogy a kísérlet előtt és után összehasonlító proteomikai elemzést végeztek [5].
5. A BeWo-sejteket bemutató kutatási publikációk
Íme néhány jelentős kutatási publikáció, amely a BeWo trofoblasztsejteket tárgyalja.
A Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) folyóiratban megjelent tanulmány szerint az AMPK jelátvitel a FUNDC1 és a PRKN által elősegített mitofágia útvonalakon keresztül aktiválja a mitofágiát a BeWo trofoblasztsejtekben. Ennek eredményeként a mitofágia segít fenntartani az ATP-termelést és a mitokondriális membránpotenciált.
Ez a cikk az Animal Cells and Systems (2020) folyóiratban jelent meg. A tanulmány azt állította, hogy az etilparaben a kaszpáz-3 útvonal szabályozása révén közvetíti a BeWo sejtek apoptózisát.
A Drug Metabolism and Disposition (2023) folyóiratban megjelent tanulmány placenta sejtvonalakat, köztük BeWo, JAR, JEG-3 és HTR-8/SVneo sejteket használt a sejtekben történő xenobiotikumok és szteroidok lerakódásának vizsgálatához.
Az International Journal of Molecular Medicine (2020) folyóiratban megjelent kutatási cikk szerint az APJ-receptor ligandumaként működő apelin az APJ, az ERK1/2, a stat3 és az AMPK jelátviteli útvonalakon keresztül elősegíti a BeWo sejtek proliferációját. Ezért ez a placenta fejlődését szabályozó alapvető adipokin lehet.
Az Epilepsia (2021) folyóiratban megjelent tanulmány a magzati tápanyagok és a rohamgátló gyógyszerek hatását vizsgálta a humán eredetű trofoblasztos sejtvonal, a BeWo kolin-transzporterére.
Források a BeWo sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
Íme néhány online forrás a BeWo sejtekkel kapcsolatban:
- In vitro transzfekció: Ez a videó segít megismerni az adhezív sejtek in vitro plazmid DNS-transzfekciós protokollját.
Az alábbi link a BeWo sejtek sejtkultúrájával kapcsolatos információkat tartalmaz:
- BeWo sejtek: Ez a weboldal alapvető sejtkultúra-információkat tartalmaz a BeWo sejtvonalról. Ide tartoznak a sejtközegre és a tenyésztési feltételekre vonatkozó információk. Emellett protokollokat is tartalmaz a szubkultúrázáshoz, valamint a kriokonzervált és proliferatív kultúrák kezeléséhez.
Hivatkozások
- Weber, M. és munkatársai, Hat humán trofoblaszt sejtvonal citogenomikája. Placenta, 2021. 103: 72–75. o.
- Kolokol'tsova, T. és munkatársai, A trofoblasztok jellemzői hosszú távú tenyésztés során. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: 259–265. o.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt és H.M. Stapleton, A pajzsmirigy hormon-szulfotranszferáz aktivitásának zavara brómtartalmú égésgátló vegyi anyagok hatására az emberi koriokarcinóma placenta sejtvonalban, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: 81–88. o.
- Bralewska, M., T. Pietrucha és A. Sakowicz, A CgA-ból származó CST fehérje szintjének csökkenése a HTR-8/SVneo és BeWo trofoblast sejtvonalakban a preeclampsiás környezet hatására. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): 7124. o.
- Hu, Y. és társai, A trichosanthin gyógyszer BeWo sejtvonalhoz való hozzáadásának összehasonlító proteomikai elemzése. Molecules, 2022. 27(5): 1603. o.